MX2008010772A

MX2008010772A - Compuestos basados en imidazol, composiciones que los comprenden y metodos de su uso.

Info

Publication number: MX2008010772A
Application number: MX2008010772A
Authority: MX
Inventors: David J Augeri; Jeffrey Bagdanoff; Lakmal W Boteju; Kenneth G Carson; Theodore C Jessop; David S Kimball
Original assignee: Lexicon Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2006-02-24
Filing date: 2007-02-21
Publication date: 2008-09-01
Also published as: PL2010501T3; SG170024A1; IL193297A0; EP2010501A2; NZ570308A; EA200870292A1; US8404732B2; DK2010501T3; US20130005775A1; US20100076030A1; US20070208063A1; WO2007100617A2; EP2010501B1; AU2007221265A1; EP2090334B1; ZA200806842B; US8093267B2; JP2009527564A; EP2090334A2; CA2643021C

Abstract

Se describen compuestos basados en imidazol, composiciones que los comprenden y métodos de uso de los mismos, para el tratamiento, prevención y manejo de enfermedades y desórdenes inflamatorios y autoinmunes. Compuestos particulares son de la fórmula I: (ver fórmula).

Description

COMPUESTOS BASADOS EN IMIDAZOL, COMPOSICIONES QUE LOS COMPRENDEN Y MÉTODOS DE SU USO Esta solicitud reclama prioridad de la solicitud de patente de los E.U.A. Número de Serie 11/698,253, presentada en enero 25, 2007, y las solicitudes provisionales de patente de los E.U.A. Números de Serie 60/776,473, presentada en febrero 24, 2006 y 60/815,221, presentada en junio 20, 2006, todas las cuales se incorporan aquí por referencia. 1 CAMPO DE LA INVENCIÓN ? Esta invención se refiere a compuestos basados en imidazol, y a métodos para su uso en el tratamiento, prevención y manejo de diversas enfermedades y desordenes. 2 ANTECEDENTES Esfingosina-l-fosfato (S1P) es una molécula bioactiva con efectos potentes en sistemas de múltiples órganos. Saba, J.D. and Hla, T. Circ. Res. 94:724-734 (2004) . Aunque algunos creen que el compuesto es un mensajero secundario intracelular , su modo de acción todavía es materia de debate. Id. Sin duda, incluso su metabolismo se entiende poco. Hla, T., Science 309:1682-3 (2005) . Los investigadores actualmente creen que S1P se forma por la fosforilación de esfingosina, y degrada por desfosforilación o ruptura o escisión. Sus escisión en etanolamina fosfato y un aldehido de cadena larga, supuestamente es catalizada por S1P liasa. Id.; Pyne & Pyne, Biochem J. 349:385-402 (2000) .

Esfingosina-l-fosfato liasa es una enzima dependiente de vitamina B6 situada en la membrana del retículo endopláasmico . Van Veldhoven and Mannaerts, J. Biol. Chem. 266:12502-12507 (1991) ; Van Veldhoven and Mannaerts, Adv. Lipid. Res. 26:69 (1993) . Las secuencias de polinucleót ido y amino ácido de SP1 liasa humana y sus productos de genes, se describen en la solicitud de patente PCT número WO 99/16888. Recientemente, Schwab y colaboradores concluyen que un componente del color caramelo III, 2-acetil-4-tetrahidroxibutilimidazol (THI), inhibe la actividad S1P liasa cuando se administra a ratones. Schwab, S. et al., Science 309:1735-1739 (2005) . Mientras que otros han postulado que THI ejerce sus efectos por un mecanismo diferente (ver, por ejemplo, Pyne, S.G., ACGC Chem. Res. Comm. 11:108-112 (2000)), es claro que la administración del compuesto a ratas y ratones induce linfopenia y provoca la acumulación de células T maduras en el timo. Ver, por ejemplo, Schwab, supra; Pyne, S.G., ACGC Chem. Res. Comm. 11:108-112 (2000) ; Gugsyan, R., et al., Immunology 93(3) :398-404 (1998); Halweg, K.M. and Büchi, G., J. Org . Chem. 50:1134-1136 (1985) ; patente de los E.U.A. número 4,567,194 otorgada a Kroeplien y Rosdorfer. Todavía, no hay reportes conocidos de THI que tiene un efecto inmunológico en animales diferentes a ratones y ratas. Aunque la patente de los E.U.A. Número 4,567,194 alega que THI y algunos compuestos relacionados pueden ser útiles como agentes medicinales inmunosupresores , estudios del compuesto en humanos no encuentran efectos inmunológicos . Ver Thuvander, A. and Oskarsson, A., Fd. Chem. Toxic. 32(1):7-13 (1994); Houben, G.F., et al., Fd. Chem. Toxic. 30 ( 9 ): 749-757 (1992). 3 COMPENDIO DE LA INVENCIÓN Esta invención se dirige en parte a compuestos de la fórmula I: I y sus sales y solvatos (por ejemplo, hidratos) farmacéuticamente aceptables, en donde: X es O o NR3; Ri es ORi¾, NHOH, hidrógeno, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R2 es OR2A, C(0)OR2A, hidrógeno, halógeno, nitrilo, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alqilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R3 es OR3A, N(R3A)2, NHC(0)R3A, NHS02R3A, O hidrógeno; R4 es OR4A, OC (O) R4A, hidrógeno, halógeno, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R5 es N(RSA)2, hidrógeno, hidroxi, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; y cada uno de RiA, R2A, 3?, R A, y RSA es independientemente hidrógeno u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo. Esta invención también abarca composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de la fórmula I, y métodos para tratar enfermedades y desordenes inflamatorios utilizando compuestos de la fórmula I. 4 BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Ciertos aspectos de esta invención pueden comprenderse con referencia a las siguientes figuras: 0 La Figura 1 proporciona una gráfica de puntos de citometria de flujo (FACS) representativa que muestra el efecto de control de vehículo (VC) , un compuesto de la invención (Compuesto 1), y THI en composición de célula T (CD4+ y CD8 + ) de timo, y promedio/Sd para todos los ratones (n = 3) . La Figura 2 proporciona una gráfica de puntos de FACS representativo que muestra el efecto de control de vehículo (VC) , un compuesto de la invención (Compuesto 1), y THI en un subconjunto de células CD4+ (emigrantes tímicos recientes) en ratones. La Figura 3 proporciona un trazo de puntos de FACS representativo que muestra el efecto de control de vehículo (VC) , un compuesto de la invención (Compuesto 1), y THI en un subconjunto de células CD8+ (emigrantes tímicos recientes) en ratones . La Figura 4 muestra el efecto de control de vehículo, THI, Compuesto 1, Compuesto 2 en conteos de sangre entera de ratones. La Figura 5 muestra el efecto de dosis oral sencilla de un compuesto de la invención en artritis inducida por colágeno en ratones. La Figura 6 muestra el efecto de dosis oral sencilla de un compuesto de la invención en conteos de linfocitos y leucocitos de monos cynomolgus o cangrejeros. 5 DESCRIPCIÓN DETALLADA Esta invención resulta, en parte, de estudios de ratones de la alteración genética de ratones con S1P liasa y substancialmente se refiera a compuestos que se consideran útiles en el tratamiento, prevención y/o administración de enfermedades y desordenes auto inmunes e inflamatorios. 5.1 Definiciones A menos que se indique de otra forma, el término "alquenilo" significa un hidrocarburo de cadena recta, ramificada y/o cíclica que tiene de 2 a 20 (por ejemplo, 2 a o 2 a 6) átomos de carbono, e incluye al menos un doble enlace de carbono-carbono. Porciones alquenilo representativas incluyen vinilo, allilo, 1-butenilo, 2-butenilo, isobutilenilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 3-metil-l-butenilo, 2-metil-2-butenilo, 2 , 3-dimetil-2-butenilo, 1-hexenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 1-heptenilo, 2-heptenilo, 3-heptenilo, 1-octenilo, 2-octenilo, 3-octenilo, 1-nonenilo, 2-nonenilo, 3-nonenilo, 1-decenilo, 2-decenilo y 3-decenilo. A menos que se indique de otra forma, el término "alquilo" significa un hidrocarburo de cadena recta, ramificada y/o cíclica ( "cicloalquilo" ) que tiene de 1 a 20 (por ejemplo, 1 a 10 o 1 a 4) átomos de carbono. Porciones alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, se refieren como "alquilo inferior". Ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no están limitados a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, , 4-dimetilpentilo, octilo, 2,2,4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo y dodecilo. Porciones cicloalquilo pueden ser monociclicas o mult iciclicas , y ejemplos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y adamantilo. Ejemplos adicionales de porciones alquilo tienen porciones lineales, ramificadas y/o cíclicas (por ejemplo, l-etil-4-metil-ciclohexilo) . El término "alquilo" incluye hidrocarburos saturados así como porciones alquenilo y alquinilo.

A menos que se indique de otra forma, el término "alquilarilo" o "alquilo-arilo" significa una porción alquilo ligada a una porción arilo. A menos que se indique de otra forma, el término "alquilheterarilo" o "alquilo-heteroarilo" significa una porción alquilo ligada a una porción heteroarilo. A menos que se indique de otra forma, el término "alquilheterociclo" o "alquilo-heterociclo" significa una porción alquilo unida a una porción heterociclo. A menos que se indique de otra forma, el término "alquinilo" significa un hidrocarburo de cadena recta, ramificada y/o cíclica que tiene de 2 a 20 (por ejemplo, 2 a 20 o 2 a 6) átomos de carbono, e incluye cuando menos un triple enlace de carbono-carbono. Porciones alquinilo representativas incluye acetilenilo, propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 1-pentinilo, 2-pentinilo, 3-metil-l-butinilo, 4-pentinilo, 1-hexinilo, 2-hexinilo, 5-hexinilo, 1-heptinilo, 2-heptinilo, 6-heptinilo, 1-octinilo, 2-octinilo, 7-octinilo, 1-noninilo, 2-noninilo, 8-noninilo, 1-decinilo, 2-decinilo y 9-decinilo. A menos que se indique de otra forma, el término "alcoxi" significa un grupo O-alquilo. Ejemplos de grupos alcoxi incluye, pero no están limitados a, -OCH3, -OCH2CH3, -0(CH2)2CH3, -0(CH2)3CH3, -0(CH2)4CH3, y -0(CH2)5CH3. A menos que se indique de otra forma, el término "arilo" significa un anillo aromático o un sistema de anillo aromático o parcialmente aromático, compuesto por átomos de carbono e hidrógeno. Una porción arilo puede comprender múltiples anillos unidos o fusionados en conjunto. Ejemplos de porciones arilo incluyen, pero no están limitados a, antracenilo, azulenilo, bifenilo, fluorenilo, indano, indenilo, naftilo, fenantrenilo, fenilo, 1 , 2 , 3 , 4-tetrahidro-naftaleno, tolilo. A menos que se indique de otra forma, el término "arilalquilo" o "arilo-alquilo" significa una porción arilo ligada a una porción alquilo. A menos que se indique de otra forma, el término "agente reductor de linfocitos en circulación" significa un compuesto que tiene un factor de reducción de linfocitos en circulación (CLRF = circulating lymphocyte reduction factor) mayor a aproximadamente 20 por ciento. A menos que se indique de otra forma, el término "factor de reducción de linfocitos en circulación" o "CLRF" significa la disminución en número de linfocitos en circulación en ratones, provocada por administración oral en una sola dosis de un compuesto a 100 mg/kg, como se determina por el método descrito en los Ejemplos siguientes. A menos que se indique de otra forma, los términos "halógeno" y "halo" abarcan flúor, cloro, bromo e yodo. A menos que se indique de otra forma, el término "heteroarilo" se refiere a una porción alquilo (por ejemplo, lineal, ramificada o cíclico) en donde al menos uno de sus átomos de carbono, se ha reemplazado con un heteroátomo (por ejemplo, N, 0 o S) . A menos que se indique de otra forma, el término "heteroarilo" significa una porción arilo en donde al menos uno de sus átomos de carbono, se ha reemplazado con un heteroátomo (por ejemplo, N, 0 o S) . Ejemplos incluyen, pero no están limitados a, acridinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzoisotiazolilo, benzoisoxazolilo, benzoquinazolinilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, imidazolilo, indolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, ftalazinilo, pirazinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridilo, pirimidinilo, pirimidilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, tetrazolilo, tiazolilo y triazinilo . A menos que se indique de otra forma, el término "heteroarilalquilo" o "heteroarilo-alquilo" significa una porción heteroarilo ligada a una porción alquilo. A menos que se indique de otra forma, el término "heterociclo" se refiere a un anillo o sistema de anillos monocíclico o policíclico aromático, parcialmente aromático o no aromático, que comprende carbono, hidrógeno y cuando menos un heteroátomo (por ejemplo, N, O o S) . Un heterociclo puede comprender múltiples anillos (es decir, dos o más) fusionados o unidos en conjunto. Heterociclos incluyen heteroarilos . Ejemplos incluyen, pero no están limitados a, benzo [1,3] dioxolilo, 2 , 3-dihidro-benzo [1, 4]dioxinilo, cinnolinilo, furanilo, hidantoinilo, morfolinilo, oxetanilo, oxiranilo, piperazinilo, piperidinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo , tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo y valerolactamilo. A menos que se indique de otra forma, el término "heterocicloalquilo" o "heterociclo-alquilo" se refiere a una porción heterociclo ligada a una porción alquilo. A menos que se indique de otra forma, el término "heterocicloalquilo" se refiere a un heterociclo no aromático . A menos que se indique de otra forma, el término "heterocicloalquilalquilo" o "heterocicloalquilo-alquilo" se refiere a una porción heterocicloalquilo ligada a una porción alquilo . A menos que se indique de otra forma, los términos "manejo", "manejar" y "administración" abarcan el evitar la recurrencia de la enfermedad o desorden especificado en un paciente que ya ha sufrido por la enfermedad o desorden, y/o alargar el tiempo que un paciente tiene que sufrir la enfermedad o desorden permanezca en remisión. Los términos abarcan modular el umbral, desarrollo y/o duración de las enfermedad o desorden, o cambiar la forma en la que un paciente responde a la enfermedad o desorden. A menos de que se indique de otra forma, el término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales preparadas a partir de ácidos o bases no tóxicos farmacéuticamente aceptables, incluyendo bases ácidos y bases inorgánicos y bases y ácidos orgánicos. Sales de adición base farmacéuticamente aceptables convenientes incluyen, pero no están limitados a, sales metálicas elaboradas de aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y zinc o sales orgánicas elaboradas de lisina, N, ' -dibenciletilendiamina, cloroprocaina , colina, dietanolamina , etilendiamina , meglumina (N-metilglucamina ) y procaina. Ácidos no tóxicos convenientes incluyen, pero no están limitados a, ácidos inorgánicos y orgánicos tales como acético, alginico, antranilico, benzensulfónico, benzoico, camforsulfónico, cítrico, etenosulfónico, fórmico, fumárico, furoico, galacturónico, glucónico, glucurónico, glutámico, glicólico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maleico, málico, mandélico, metansulfónico, múcico, nítrico, pamoico, pantoténico, fenilacético, fosfórico, propiónico, salicílico, esteárico, succínico, sulfanílico, sulfúrico, ácido tartárico, y ácido p-toluensulfónico . Ácidos no tóxicos específico incluyendo ácidos clorhídricos, hidrobromico, fosfórico, sulfúrico, y metansulfónicos . Ejemplos de sales especificas incluyen de esta manera sales hidrocloruro y mesilato. Otras son bien conocidas en la especialidad. Ver por ejemplo, Remington' s Pharmaceutical Sciences (18th ed., Mack Publishing, Easton PA: 1990; and Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19th ed., Mack Publishing, Easton PA: 1995) . A menos que se indique de otra forma, los términos "evitar", "prevenir" y "prevención" contemplan una acción que ocurre antes de que un paciente empiece a sufrir de una enfermedad o desorden especificado, que inhibe o reduce la severidad de la enfermedad o desorden. En otras palabras, los términos abarcan profilaxis. A menos que se indique de otra forma, una "cantidad profilácticamente efectiva" de un compuesto es una cantidad suficiente para evitar una enfermedad o condición, o uno más síntomas asociados con la enfermedad o condición, o evitar su recurrencia. Una cantidad profilácticamente efectiva de un compuesto significa una cantidad de agente terapéutico, solo o en combinación con otros agentes, que proporciona un beneficio profiláctico en la prevención de la enfermedad. El término "cantidad profilácticamente efectiva" puede abarcar una cantidad que mejora la total profilaxis o mejora la eficacia profiláctica de otro agente profiláctico. A menos que se indique de otra forma, el término "agente que mejora el nivel S1P" significa un compuesto que tiene un factor que mejora el nivel S1P (SLEF = S1P level enhancing factor) de al menos aproximadamente 10 veces. A menos que se indique de otra forma, el término "factor que mejora el nivel S1P" o "SLEF" significa el aumento en S1P en los vasos de ratones, provocado por la administración oral de una sola dosis de un compuesto a 100 mg/kg, como se determina por el método descrito en los Ejemplos siguientes. A menos que se indique de otra forma, el término "mezcla estereoisomérica" abarca mezclas racemicas asi como mezclas estereoméricamente enriquecidas (por ejemplo, R/S = 30/70, 35/65, 40/60, 45/55, 55/45, 60/40, 65/35 y 70/30) . A menos que se indique de otra forma, el término "estereoméricamente puro" significa una composición que comprende un estereoisómero de un compuesto y está substancialmente libre de otros estereoisómeros de este compuesto. Por ejemplo, una composición estereoméricamente pura de un compuesto que tiene un estereocentro estará substancialmente libre del estereoisómero opuesto del compuesto. Una composición estereoméricamente pura de un compuesto que tiene dos estereocentros estará substancialmente libre de otros diaestereoisómeros del compuesto. Un compuesto estereoméricamente puro típico comprende más que aproximadamente 80% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos que aproximadamente 20% en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, más que aproximadamente 90% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos que aproximadamente 10% en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, más que aproximadamente 95% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos que aproximadamente 5% en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, más que aproximadamente 97% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos que aproximadamente 3% en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o más que aproximadamente 99% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos que aproximadamente 1% en peso de los otros estereoisómeros del compuesto. A menos que se indique de otra forma, el término "substituido", cuando se utiliza para describir una estructura o porción química, se refiere a un derivado de esa estructura o porción en donde uno o más de sus átomos de hidrógeno está substituido con una porción química o grupo funcional tal como, pero no limitado a, alcohol, aldehido, alcoxi, alcanoiloxi, alcoxicarbonilo, alquenilo, alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, propilo, t-butil) , alquinilo, alquilcarboniloxi ( -OC (O) alquil ) , amida ( -C (O) NH-alquil- o -alquilNHC (0) alquil) , amidinilo (-C (NH) NH-alquil o -C(NR)NH2), amina (primaria, secundaria y terciaria tal como alquilamino, arilamino, arilalquilamino) , aroilo, arilo, ariloxi, azo, carbamoilo ( -NHC (O) O-alquil- o -OC (O) H-alquil ) , carbamil (por ejemplo, CONH2, así como CONH-alquil, CONH-aril, y CONH-arilalquil), carbonilo, carboxilo, ácido carboxílico, anhídrido de ácido carboxílico, cloruro de ácido carboxílico, ciano, éster, epoxido, éter (por ejemplo, metoxi, etoxi) , guanidino, halo, haloalquil (por ejemplo, -CC13, -CF3, -C(CF3)3), heteroalquil, hemiacetal, imina (primario y secundarios), isocianato, isotiocianato, cetona, ,nitrilo, 0 nitro, oxo, fosfodiéster , sulfuro, sulfonamido (por ejemplo, S02NH2) , sulfona, sulfonilo (incluyendo alquilsulfonilo, arilsulfonilo y arilalquilsulfonilo) , sulfóxido, tiol (por ejemplo, sulfhidro, tioéter) y urea ( -NHCONH-alquil- ) . A menos que se indique de otra forma, una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto, es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento o manejo de una enfermedad o condición, o para retardar o reducir al mínimo uno o más síntomas asociados con la enfermedad o condición. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto significa una cantidad de agente terapéutico, solo o en combinación con otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento o manejo de la enfermedad o condición. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" puede abarcar una cantidad que mejora la terapia total, reduce o evita síntomas o causas de una enfermedad o condición o mejora la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico.

A menos que se indique de otra forma, los términos "tratar" y "tratamiento" contemplan una acción que ocurre mientras que un paciente sufre de la enfermedad o desorden especificado, lo que reduce la severidad de la enfermedad o desorden, o retarda o frena el avance de la enfermedad o desorden . A menos de que se indique de otra forma, el término "incluir" tiene el mismo significado que "incluye, pero no esta limitado a", y el término "incluye" tiene el mismo significado que "incluye pero no esta limitado a". En forma similar, el término "tal como" tiene el mismo significado que el término "tal como, pero no limitado a". A menos de que se indique de otra forma, uno o más adjetivos inmediatamente precedentes a una serie de nombres o sustantivos habrá de considerarse que aplica a cada uno de los nombres. Por ejemplo, la frase "opcionalmente sustituido alquilo, arilo o heteroarilo" tiene el mismo significado que "opcionalmente sustituido alquilo, opcionalmente sustituido arilo, u opcionalmente sustituido heteroarilo". Habrá de notarse que una porción química que forma parte de un compuesto más grande puede describirse aquí utilizando un nombre comúnmente acordado cuando existe como una sola molécula o nombre comúnmente acordado como subradical. Por ejemplo, el término "piridina" y "piridilo" se les otorga el mismo significado cuyo se utiliza para describir una poción conectada a otras pociones químicas. De esta manera, las dos frases "XOH, en donde X es piridilo" y "XOH, en donde X es piridina" se les otorga el mismo significado y abarca los compuestos piridina-2-ol , piridina- 3-ol y piridina-4-ol . También habrá de notarse si la estereoquímica de una estructura a una poción de una estructura no se indica por ejemplo con negritas o líneas punteadas, la estructura o la porción de la estructura habrá de interpretarse que abarca todo sus estereoisómeros . Aún más, cualquier átomo que se ilustre en un dibujo con valencias insatisfechas se considera que está conectado a suficientes átomos de hidrógeno para satisfacer las valencias. Además, enlaces químicos ilustrados con una línea sólida paralela a una línea punteada abarcan tanto uniones o enlaces sencillos o dobles (por ejemplo, aromáticas) si lo permiten las valencias. 5.2 Compues os Esta invención abarca compuestos de la fórmula I: sus sales y solvatos (por ejemplo, hidratos) farmacéuticamente aceptables, en donde: X es 0 o NR3; Ri es ORIA, NHOH, hidrógeno, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo ; R2 es OR2A, C(0)OR2A, hidrógeno, halógeno, nitrilo, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alqilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R3 es 0R3A, N(R3A)2, NHC(0)R3A, NHS02R3A, o hidrógeno; R4 es 0RA, OC(0)R4A, hidrógeno, halógeno, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R5 es N(RsA)2, hidrógeno, hidroxi, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; y cada uno de RiA, R2A, R3A, R^IA, y RSA es independientemente hidrógeno u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo. Compuestos particulares de la fórmula I son tales que si X es O; Ri es alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, fenilo, bencilo o feniletilo; R2 es hidrógeno; y uno de R4 y R5 es hidroxilo; el otro de R4 y R5 no es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxialquilo de 1 a 6 átomos de carbono, polihidroxialquilo de 1 a 6 átomos de carbono que tiene hasta un hidroxilo por carbono, poliacetilalquilo de 1 a 6 átomos de carbono que tiene hasta un acetilo por carbono, fenilo, bencilo o feniletilo. En modalidades particulares, el compuesto no es 2-acetil-4-tetrahidroxibutilimidazol, 1- (4- (1,1,2,2, 4-pentahidroxibutil) -lH-imidazol-2-yl) etanona, 1- ( 2-acetil-lH-imidazol-4-il ) butano-1 , 1 , 2 , 2-tetrail tetraacetato, o l-(2-acetil-lH-imidazol-4 -il ) butano-1, 1, 2, 2, 4 -pentail pentaacetato . Una modalidad particular abarca compuestos de la fórmula II: II y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables, en donde: X es O o NR3; Ri es OiA, NHOH, hidrógeno, u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R2 es 02A, C(0)02A, hidrógeno, halógeno, nitrilo, u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R3 es 03A, N(R3A)2, NHC(0)R3A, NHS02R3A, o hidrógeno; R6 es 06A, OC(0)R6A, N(R6B)2, NHC(0)R6B, hidrógeno, o halógeno; R7 es 07A, OC(0)R7A, N(R7B)2, NHC(0)R7B, hidrógeno, o halógeno; R8 es 08A, 0C(0)R8A, N(R8B)2/ NHC(0)R8B, hidrógeno, o halógeno; R9 es CH209A, CH2OC(0)R9A, N(R9B)2, NHC(0)R9B, hidrógeno, o halógeno; a cada uno de RiA, 2A, 3A / 6A / R7A r ReA y 9A son independientemente hidrógeno u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo ; y cada una de R$Br R B, R8B y RgB son independientemente hidrógeno o alquilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos hidroxi o halógeno. Compuestos particulares de la fórmula II son tales que: 1) si X es O, Ri es alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, fenilo, bencilo o feniletilo, y R2 es hidrógeno, al menos dos de R6, R7, R8 y 9 no son hidroxilo o acetato; 2) si X es O, Ri es metilo, R2 es hidrógeno, R6 y 7 son ambos hidroxilo, y uno de R8 y R9 es hidrógeno, el otro no es NHC(0)R9B; 3) si X es O, Ri es OiA, RiA es hidrógeno o alquilo inferior, y R2 es hidrógeno, al menos uno pero no todos de R6, R7, R8 y R9 son hidroxilo o acetato. Compuestos particulares de la invención son de la fórmula II (a) : III en donde: Z es alquilo opcionalmente sustituido; Ri es 0iA, NHOH, hidrógeno, u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R2 es 02A, C(0)02A, hidrógeno, halógeno, nitrilo, u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquiloheterociclo, o heterocicloalquilo; R3 es 03A, N(R3A)2, NHC(0)R3A, NHS02R3A, o hidrógeno; y cada uno de RÍA/ R2Ar y R3A es independientemente hidrógeno u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquiloheterociclo, o heterocicloalquilo. Otra modalidad de la invención abarca el compuesto de la fórmula IV: IV y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables, en donde: Ri es OiA, NHOH, hidrógeno, u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquiloheterociclo, o heterocicloalquilo; R3 es 03A, N(R3A)2, NHC(0)R3A, NHS02R3A, o hidrógeno; R6 es 06A, OC(0)R6A, N(R6B)2, NHC(0)R6B, hidrógeno, o halógeno; R7 es 07A, OC(0)R7A, N(R7B)2, NHC(0)R7B, hidrógeno, o halógeno; R8 es 08A, OC(0)R8A, N(R8B)2, NHC(0)R8B, hidrógeno, o halógeno; R9 es CH209A, CH2OC(0)R9A, N(R9B)2, NHC(0)R9B, hidrógeno, o halógeno; y cada uno de RiA, R3A, R6A, R7A, SA y R9A es independientemente hidrógeno u opcionalmente sustituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo. Compuestos particulares son de la fórmula IV(a) : IV(a) con respecto a cada una de las fórmulas IVa mostradas anteriormente que contiene las porciones descritas a continuación, ciertas modalidades de la invención son tales que: En algunos, X es O. En otros, X es NR3. En algunos, Ri es hidrógeno. En otros, Ri es alquilo inferior opcionalmente sustituido. En otros, Ri es NHOH. En otros Ri es OiA y RÍA es, por ejemplo hidrógeno o alquilo inferior opcionalmente sustituido. En algunos, R2 es hidrógeno. En otros R2 no es hidrógeno. En otros R2 es nitrilo. En otros, R2 es alquilo inferior opcionalmente sustituido. En otros R2 es 02A. En otros R2 es C(0)02A- En algunos, R2A es hidrógeno o alquilo inferior opcionalmente sustituido. En algunos, R3 es 03A. En otros R3 es N(R3A)2 o NHC(0)R3A. En otros R3 es NHS02R3A. En algunos, R3A es hidrógeno u opcionalmente sustituido alquilo inferior. En otros, R3A es opcionalmente sustituido arilo o heterociclo. En algunos, R4 es 04A. En otros, R4 es halógeno.

En algunos, R5 es N(R5A)2- En otros, R5 es hidrógeno. En otros, R5 es hidroxilo. En otros, R5 es heteroalquilo (por ejemplo, alcoxi) . En otros, R5 es alquilo opcionalmente sustituido. En otros, R5 es arilo opcionalmente sustituido. En algunos, uno o más R6, R7, Rg, y R9 es hidroxi o halógeno. En algunos, todos de R6, R7, Rs, y R9 son hidroxilo o acetato. En algunos, Z es alquilo opcionalmente sustituido con una o más pociones hidroxilo, acetato o halógeno. Compuestos de la invención pueden contener uno o más estereocentros , y pueden existi.r como mezclas racémicas de enantiómeros o mezclas de diaesterómeros . Esta invención abarca formas estereoméricamente puras de estos compuestos, asi como mezcla de esas formas. Estereoisómeros pueden ser asiméricamente sintetizados o resueltos utilizando técnicas standard tales como agentes de resolución quiral o columnas quirales. Ver, por ejemplo, Jacques, J., et al., Enantiomers , Racemates y Resolutions (Wiley Interscience , New Yok, 1981); Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemestry de Carbón Compuestos (McGraw Hill, NY, 1962); y Wilen, S. H., Tables de Resolving Agents y Optical Resolutions, p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. de Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972) . Esta invención también abarca mezclas estereoisoméricas de compuestos aquí descritos. También abarca isómeros de configuración de compuestos descritos aquí, ya sea en mezcla o en forma pura o sustancialmente pura, tal como isómeros cis (Z) y trans (E) alqueno e isómeros sin y anti oxima . Compuestos preferidos de la invención son agentes de reducción de linfocitos en circulación. Ciertos compuestos inhiben la cantidad de linfocitos en circulación, como se determina utilizando el método descrito en los ejemplos, en más de aproximadamente 20, 50, 75, 100, 150 ó 200 por ciento. En este aspecto, se ha encontrado que mientras que THI es capaz de reducir linfocitos en circulación en ratones, muchos análogos y derivados de THI, tales como 1- ( 4-metil-5-( (1S,2R,3R)-1,2,3, -tetrahidroxibutil ) tiazol-2-ul) etanona, tienen poco o ningún efecto en linfocitos en circulación, a pesar de reportes por el contrario. Ver WO 97/46543. Sin estar limitados por teoría, los compuestos de la invención se considera que afectan la ruta metabólica S1P, y pueden inhibir S1P liasa directa o indirectamente in vivo. Compuestos particulares son agentes de mejora de nivel S1P. Ciertos compuestos aumentan la cantidad de S1P, como se determinó utilizando el método descrito a continuación en los ejemplos, en más de aproximadamente 10, 15, 20, 25, ó 30 veces . Compuestos de la invención pueden prepararse por métodos conocidos en la especialidad (por ejemplo, al variar y agregar a los enfoques descritos en Pyne, S.G., ACGC Chem.

Res. Comm. 11:108-112 (2000); Halweg, K.M. y Büchi, G . , J.Og.Chem. 50:1134-1136 (1985)) . Compuestos también pueden elaborarse por los métodos descritos a continuación y sus variantes, que serán aparentes para aquellos con destreza ordinaria en la especialidad. 5.3 Métodos de uso Esta invención abarca un método para modular (por ejemplo, incrementar) la cantidad de S1P en un paciente (por ejemplo, un ratón, una rata, un perro, un gato o un humano) que lo requiera, que comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la invención (es decir, un compuesto aquí descrito) . Otra modalidad abarca un método para reducir el número de células T en la sangre de un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la invención. Otra modalidad abarca un método para tratar, manejar o evitar una enfermedad afectada por (o que tiene síntomas afectados por) niveles S1P, que comprende administrar a un paciente que lo requiere una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un compuesto de la invención. Otra modalidad abarca un método para suprimir inmunorespuesta en un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la invención . Otra modalidad que abarca un método para tratar, manejar o evitar una enfermedad o desorden autoinmune o inflamatorio, que comprende administrar a un paciente que lo requiere, una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un compuesto de la invención. Ejemplos de enfermedades y desordenes incluyen espondilitis anquilosante, asma (por ejemplo, asma bronquial), dermatitis atópica, enfermedad de Behcet, enfermedad de injerto-contra-anfitrión, síndrome de Kawasaki, lupus eritematosus , esclerosis múltiple, miastenia gravis, polinosis, psoriasis, artritis psoiásica, artritis reumatoide, escleroderma , rechazo de transplante (por ejemplo, de un órgano, célula o médula ósea), diabetes tipo I, y uveítis. Enfermedades y desordenes adicionales incluyen enfermedad de Addison, síndrome de anti-fosfolípidos , gastritis atrófica autoinmune, aclohidra autoinmune, enfermedad Celiaca, enfermedad de Crohn, síndrome de Cushing, dermatomiositis , síndrome de Goodpasture, enfermedad de Grave, tiroiditis de Hashimoto, atrofia adrenal idiopática, trombocitopenia idiopática, síndrome de Lambert-Eaton , penfigoide, penfigus vulgar, anemia perniciosa, poliarteritis nodosa, cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante primaria, Raynauds, síndrome de Reiter, policondritis de relapso, síndrome de Schmidt, síndrome de Sjogren, oftalmía simpática, arteritis de Takayasu, arteritis temporal, tirotoxicosis , colitis ulcerativa, y granulomatosis de Wegener . La cantidad, ruta de administración y programa de dosificación de un compuesto depende de factores tales como la indicación específica a tratar, evitar o manejar, y la edad, sexo y condición de paciente. Los papeles desempeñados por estos factores son bien conocidos en la técnica y pueden ser alojados por experimentación rutinaria. En una modalidad particular, un compuesto de la invención se administra a un paciente humano en una cantidad de aproximadamente 0.5, 1, 2.5 ó 5 mpk . 5.4 Formulaciones Farmacéuticas Esta invención abarca composiciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos de la invención. Ciertas composiciones farmacéuticas son formas de dosis unitarias sencillas adecuadas para administración oral, mucosal (por ejemplo, nasal, sublingual, vaginal, bucal, o rectal), parenteral (por ejemplo, subcutánea, intravenosa, inyección de bolo, intramuscular, o intraarterial ) , o administración transdérmica a un paciente. Ejemplos de formas de dosis incluyen pero no están limitados a: tabletas; cápsulas; comprimidos oblongos, tales como cápsulas de gelatina elástica suave; obleas; pastillas; comprimidos; dispersiones, supositorios ungüentos, cataplasmas (emplastos); pastas, polvos, vendajes, cremas, enyesados; soluciones, parches, aerosoles (por ejemplo rocíos o inhaladores nasales) ; geles; formas de dosis líquidas adecuadas para administración oral o mucosal a un paciente, incluyendo suspensiones (por ejemplo suspensiones de líquido acuoso o no acuoso, emulsiones de aceite-a-agua, o emulsiones líquidas de agua-en-aceite ) , soluciones, y elíxires; formas de dosis líquidas adecuadas para administración parenteral a un paciente; y sólidos estériles (por ejemplo sólidos cristalinos o amorfos) que pueden ser reconstituidos para proporcionar formas de dosis líquidas adecuadas para administración parenteral a un paciente . La formulación deberá ser adecuada al modo de administración. Por ejemplo, administración oral requieré revestimientos entéricos para proteger los compuestos de esta invención contra degradación en el tracto gastrointestinal. De manera similar, una formulación puede contener ingredientes que faciliten el suministro del o los ingredientes activos al sitio de acción. Por ejemplo, pueden administrarse compuestos en formulaciones liposomales, a fin de protegerlos contra-enzimas degradativas , facilitar el transporte del sistema circulatorio y efectuar el suministro a través de membranas celulares en sitios intracelulares . De manera similar, compuestos deficientemente solubles pueden incorporarse en formas de dosis liquidas (y formas de dosis adecuadas para reconstitución) con el auxilio de agentes solubilizantes , emulsificantes y surfactantes tales como, pero no limitados a ciclodextrinas (por ejemplo , a-ciclodextrina , ß-ciclodextrina , Captesol®, y EncapsinMR (ver, por ejemplo, Daves y Brewster, 2004, Nat . Rev. Drug Pese. 3:1023-1034), Labrasol®, Labrafil®, Labrafac®, cremafor, y solventes no acuosos tales como, pero no limitados a, etil alcohol, isopropil alcohol, etil carbonato, etil acetato, bencil alcohol, bencil benzoato, propilen glicol, 1,3-butilen glicol, .dimetil fomamida, dimetil sulfoxida (DMSO), aceites biocompatibles (por ejemplo, aceites de semillas de algodón, nueces molidas, maíz, gérmen, oliva, ricino y de ajonjolí), glicerol, tetrahidrofurfuril alcohol, polietilen glicoles, ásteres de ácidos grasos de sorbitan y sus mezclas (por ejemplo, DMSO : aceite de maíz). Compuestos deficientemente solubles también pueden incorporarse en suspensiones, utilizando otras técnicas conocidas en la especialidad. Por ejemplo, nano partículas de un compuesto pueden suspenderse en un líquido para proporcionar una nanosuspensión (ver, por ejemplo, Rabinow, 2004, Nature Rev. Drug Pise. 3:785-796). Formas de compuestos en nanopartículas aquí descritas pueden prepararse por los métodos descritos en las publicaciones de patente de los E.U.A. Números 2004-0164194, 2004-0195413, 2004-0251332, 2005-0042177 Al, 2005-0031691 Al, y en las patentes de los E.U.A. Números 5,145,684, 5,510,118, 5,518,187, 5,534,270, 5,543,133, 5,662,883, 5,665,331, 5,718,388, 5,718,919, 5,834,025, 5,862,999, 6,431,478, 6,742,734, 6,745,962, la totalidad de cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia. En una modalidad, la forma de nanopart iculas comprende partículas que tienen un tamaño de partículas promedio menor a aproximadamente 2000 nm, menor que aproximadamente 1000 nm, o menor que aproximadamente 500 nm. La composición, forma y tipo de una forma de dosis variarán dependiendo de su uso. Por ejemplo, una forma de dosis empleada en el tratamiento agudo de una enfermedad, puede contener más grandes cantidades de uno o más de los ingredientes activos que comprende, que una forma de dosis empleada en un tratamiento crónico de la misma enfermedad. Similarmente, una forma de dosis parenteral puede contener cantidades más pequeñas de uno o más de los ingredientes activos que comprende, que una forma de dosis oral utilizada para tratar la misma enfermedad. Estas y otras formas en donde formas de dosis específicas abarcadas por la invención, variarán entre sí, serán fácilmente aparentes para aquellos con destreza en la técnica. Ver, por ejemplo, Remington' s Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990) . .4.1 Formas de Dosis Orales Composiciones farmacéuticas de la invención adecuadas para la administración oral pueden presentarse como formas de dosis discretas, tales como, pero no limitadas a tabletas (por ejemplo tabletas mast icables ) , comprimidos oblongos, cápsulas y líquidos (por ejemplo jarabes de sabor) . Estas formas de dosis contienen cantidades predeterminadas de ingredientes activos y pueden prepararse por métodos de farmacia bien conocidos por aquellos con destreza en la especialidad. Ver, por ejemplo, Remíngton' s Pharmaceutical Sciences, 18th ed . , Mack Publishing, Easton PA (1990) . Formas de dosis orales típicas se preparan al combinar el o los ingredientes activos en una mezcla íntima con al menos un excipiente de acuerdo con técnicas de formulación farmacéutica convencional. Excipientes pueden tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración. Debido a su facilidad de administración, tabletas y cápsulas representan las formas de dosis orales más ventajosas. Si se desea, las tabletas pueden ser revestidas por técnicas acuosas o no acuosas standard. Estas formas de dosis pueden prepararse por métodos de farmacia convencionales. En general, composiciones farmacéuticas y formas de dosis se preparan al mezclar de manera uniforme e íntima los ingredientes activos con portadores líquidos, portadores sólidos finamente divididos o ambos, y después conformar el producto en la presentación deseada, de ser necesario. Pueden incorporarse desintegrantes en formas de dosis sólidas para facilitar rápida disolución. Lubricantes también pueden incorporarse para facilitar la fabricación de formas de dosis (por ejemplo tabletas) . 5.4.2 Formas de Dosis Parenteral Formas de dosis parenterales pueden administrarse a pacientes por diversas rutas incluyendo pero no limitadas a subcutánea, intravenosa (incluyendo inyección de bolo) intramuscular e intraarterial . Debido a que su administración típicamente supera las defensas naturales del paciente contra contaminantes, las formas de dosis parenterales son específicamente estériles o capaces de esterilizarse antes de administración a un paciente. Ejemplos de formas de dosis parenterales incluyen pero no están limitadas a, soluciones listas para inyección, productos secos listos para disolverse o suspenderse en un vehículo farmacéuticamente aceptable para inyección, suspensiones listas para inyección y emulsiones. Vehículos convenientes que pueden utilizarse para proporcionar formas de dosis parenterales de la invención, son bien conocidos por aquellos con destreza en la técnica. Ejemplos incluyen pero no están limitados a: agua para inyección USP; vehículos acuosos tales como, pero no limitados a, inyección de cloruro de sodio, inyección de Ringer, inyección de Dextrosa, inyección de Dextrosa y cloruro de sodio, e inyección de Ringer Lactada; vehículos visibles en agua tales como, pero no limitados a etil alcohol, polietilen glicol y polipropilen glicol; y vehículos no acuosos tales como pero no limitados a aceite de maíz, aceite de semillas de algodón, aceite de cacahuate, aceite de ajonjolí, etil oleato, isopropil miristato, y bencil benzoato . 5.4.3 Formas de Dosis Transdérmicas Tópicas y Mucosales Formas de dosis transdérmicas, tópicas y mucosales incluyen pero no están limitadas a soluciones oftálmicas rocíos, aerosoles, cremas, lociones, ungüentos geles, soluciones, emulsiones, suspensiones u otras formas conocidas por una persona con destreza en la técnica. Ver, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th and 18th eds . , Mack Publishing, Easton PA (1980 & 1990); and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4th ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985) . Formas de dosis transdérmicas incluyen parches de "tipo depósito" o "tipo matriz", que pueden aplicarse a la piel y usarse por un periodo - específico de tiempo para permitir la penetración de una cantidad deseada de ingredientes activos. Excipientes convenientes (por ejemplo, portadores y diluyentes) y otros materiales que pueden emplearse para proporcionar formas de dosis transdérmicas tópicas y mucosales, son bien conocidos por aquellos con destreza en la técnicas farmacéuticas y dependen del tejido particular al cual se aplicará la forma de dosis o composición farmacéutica determinada . Dependiendo del tejido especifico a tratar, componentes adicionales pueden emplearse antes de, en conjunto con o subsecuente a tratamiento con ingredientes activos de la invención. Por ejemplo, mejoradores de penetración pueden emplearse para ayudar a suministrar ingredientes activos al tejido. El pH de una composición farmacéutica o forma de dosis, o del tejido al cual la composición farmacéutica o forma de dosis se aplica, también puede ajustarse para mejorar el suministro de uno o más ingredientes activos. Similarmente, la polaridad de un portador solvente, su concentración iónica o tonicidad pueden ajustarse para mejorar la entrega. Compuestos tales como esteratos también pueden agregarse a las composiciones farmacéuticas o formas de dosis para alterar ventajosamente la hidrofilicidad o lipofilicidad de uno o más ingredientes activos, para mejorar el suministro. En este aspecto, los esteratos pueden servir como un vehículo lípido para la formulación, como un agente emulsificante y surfactante o como un agente para mejora de penetración o mejora de suministro. Diferentes sales hidratos u solvatos de los ingredientes activos pueden emplearse para ajusfar adicionalmente las propiedades de la composición resultante . 6 EJEMPLOS Aspectos de esta invención pueden comprenderse a partir de los siguientes ejemplos, que no limitan su alcance. 6.1 Ratones con alteración genética de S1P lisasa Atrapamiento de genes es un método para mutagénesis de inserción al azar, que utiliza un fragmento de ADN que codifica un reportero o gen marcador seleccionable como mutágeno. Vectores trampa para genes se han diseñado para integrar en intrones o exones en una forma que permita que la maquinaria de combinación celular combine exones codificados con vectores ARNs celulares. Vectores de trampa de genes típicamente contienen secuencias marcadoras seleccionables que se preceden por fuertes secuencias de aceptores de combinación y no están precedidas por un promotor. De esta manera, cuando estos vectores se integran en un gen, la maquinaria de combinación ¦ celular combina exones del gen atrapado en el extremo 5' de la secuencia de marcadores seleccionables. Típicamente, estos genes marcadores seleccionables solo pueden expresarse si en vector que codifica el gen se ha integrado en un intron. Los eventos de trampa de genes resultantes, subsecuentemente se identifican al seleccionar células que pueden sobrevivir cultivo selectivo . Células madre embriónicas (cepa murina derivada A129) se mutaron por un proceso que involucra la inserción de cuando menos una porción de una secuencia de vector de ingeniería genética en el gen Spl liasa. Las células madre embriónicas mutadas después se microinyectaron en blastocitos, que subsecuentemente se introdujeron en anfitriones hembra pseudo preñadas y llevaron a término utilizando métodos establecidos. En este caso, el virus se inserta entre las secciones 1 y 2, y altera el gen Spl liasa. Los animales quiméricos resultantes subsecuentemente se criaron para producir descendencia capaz de transmisión de línea germinal de un alelo que contiene la mutación de ingeniería en el gen Spl liasa. Técnicas útiles para alterar un gen en una célula, y especialmente en una célula ES que pueden ya haber sido un gen alterado como se describe en las patentes de los E.U.A. Números 6,136,566; 6,139,833 y 6,207,371 y la solicitud de patente de los E.U.A. Número de Serie 08/728,963, cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. 6.2 Efectos hematológicos de alteración de gen S1P Liasa Sangre entera se recolecta por sangrado retroorbital y coloca en un tubo de recolección de sangre capilar que contiene EDTA. La sangre se analiza utilizando el analizador Cell-Dyn 3500R (Abbott Diagnostics) . El analizador emplea tecnologías duales para proporcionar la base para una identificación diferencial de leucocitos (WBC = white blood cell) en cinco partes. Separación de dispersión polarizada de múltiples ángulos (M. A. P. S . S . = Multi-Angle Polarized Scatter Separation) proporciona el conteo de leucocitos primario e información diferencial, mientras que la impedancia proporciona información adicional en la presencia de linfocitos frágiles y glóbulos rojos hipotónicamente resistentes . Aproximadamente 135 microlitros de sangre entera se aspiran en el analizador utilizando una bomba peristáltica. Cuatro técnicas de medición independiente se emplearon por el sistema Cell-Dyn 3500R (Abbott, IL) para obtener los parámetros hematológicos . El conteo óptico WBC ( OC = Optical Count) y datos diferenciales WBC se midieron en el canal de flujo óptico, resultando en la identificación de las subpoblaciones WBC (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos, y basófilos) para el diferencial WBC de cinco partes. El conteo de imperancia WBC (WIC = WBC Impedance Count) se mide en un canal de impedancia eléctrica. Los datos de plaquetas y RBC se midieron en un segundo canal de imperancia eléctrica. La hemoglobina se midió en el canal espectrofotométrico . La muestra se aspiró, diluyó, mezcló y las medidas para cada parámetro se obtuvieron durante cada ciclo del instrumento. Los parámetros de análisis hematológico final obtenidos fueron conteo de glóbulos blancos, neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos, basófilos, glóbulos rojos, hemoglobina, hematocrito, plaquetas, ancho de distribución de glóbulos rojos, volumen corpuscular promedio y volumen de plaquetas promedio. Muestras de sangre se obtuvieron para un total de 16 ratones. Análisis y comparación de las muestras de sangre se obtuvieron de 7 ratones de tipo silvestre, 6 ratones heterocigotos y tres ratones homocigotos . No hubo diferencias asociadas con genotipo significante entre ratones de diferentes grupos respecto a conteo de glóbulos rojos promedio (RBC) , niveles de hemoglobina, volumen corpuscular promedio, hemoglobina corpuscular promedio, concentración de hemoglobina corpuscular promedio, conteo de plaquetas o volumen promedio de plaquetas. Hubo diferencias en hematocrito y ancho de distribución de glóbulos rojos. El promedio de hematocrito en ratones homocigotos (-/-) fue 37 ± 2.56 por ciento, en ratones heterocigotos (+/-), 40.9 ± 4 por ciento y en ratones de tipo silvestre ( + /+ ) fue 44.7 ± 2.7 por ciento. El ancho de distribución de glóbulos rojos en ratones homocigotos (-/-) fue 25.2 ± 4.2 por ciento, en ratones heterocigotos ( +/-), 17.6 ± 1.9 por ciento y en ratones de tipo silvestre (+/+) fue 17.2 ± 2 por ciento. Similarmente , ratones deficientes en SP1 liasa no tuvieron diferencias significantes en los conteos de glóbulos blancos totales, en comparación con ratones heterocigotos o de tipo silvestre. Ratones homocigotos (-/-) tuvieron un conteo de glóbulos blancos total de 7200 ± 700 células/µ?. Ratones heterocigotos (+/-) tuvieron un conteo de glóbulos blancos total de 6200 ± 1800 células/µ? y ratones de tipo silvestre (+/+) tuvieron un conteo de glóbulos blancos total de 7200 ± 2600 células/µ?. En los ratones que fueron homocigotos para alteración de SP1 liasa, conteos de linfocitos se disminuyeron mientras que el número de neutrófilos, monocitos, eosinófilos, y basófilos, se incrementó. Los conteos de linfocitos de la sangre de ratones homocigotos (-/-) para alteración en el gen SP1 liasa se redujo enormemente. El conteo promedio de linfocitos en ratones homocigotos (-/-) fue 847 ± 139 células/µ?, en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de linfocitos fue 4582 ± 2364 células/µ?, en oposición al conteo de linfocitos promedio en ratones de tipo silvestre ( + /+ ) que fue 6126 ± 2151 células/µ?. En contraste, conteo de neutrófilos promedio en ratones homocigotos (-/-) fue 5020 ± 612 células/µ?, mientras que en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de neutrófilos fue 1380 ± 1140 células/µ? y en ratones de tipo silvestre (+/+) tuvo un conteo promedio de neutrófilos de solo 886 ± 479 células/µ?. Similarmente, el conteo promedio de monocitos en ratones homocigotos (-/-) fue 950 ± 218 células/µ?, mientras que en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de monocitos fue 250 ± 108 células/µ? y en ratones de tipo silvestre (+/+) el conteo de monocitos promedio fue solo 146 ± 92 células/µ?. Igualmente, con eosinófilos, el conteo promedio de eosinófilos en ratones homocigotos (-/-) fue 247 ± 297 células/µ?, mientras que en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de eosinófilos fue 8 + 8 células/µ? y en ratones de tipo silvestre (+/+) el conteo promedio de eosinófilos fue solo 14 ± 21 células/µ?. Lo mismo es cierto para basófilos. El conteo promedio de basófilos en ratones homocigotos (-/-) fue 130 ± 90 células/µ?, en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de basófilos fue 7 ± 5 células/µ? y en ratones de tipo silvestre (+/+) el conteo promedio de basófilos fue solo 16 ± 11 células/µ?. Similarmente , el conteo promedio de monocitos en ratones homocigotos (-/-) fue 950 ± 218 células/µ?, mientras que en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de monocitos fue 250 ± 108 células/µ? y en ratones de tipo silvestre (+/+) el conteo promedio de monocitos fue solo 146 ± 92 células/µ?. Igualmente, con eosinófilos, el conteo promedio de eosinófilos en ratones homocigotos (-/-) fue 247 ± 297 células/µ?, mientras que en ratones heterocigotos (+/-) el conteo promedio de eosinófilos fue 8 ± 8 células/µ? y en ratones de tipo silvestre (+/+) el conteo promedio de eosinófilos fue solo 14 ± 21 células/µ?. 6.3 Síntesis de (E/Z) -1- (4- ( (1R,2S,3R) -1,2,3,4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-yl) -etanona oxima 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il] -etanona (THI, preparada de acuerdo con Halweg, K.M. and Büchi, G., J.Org.Chem. 50:1134-1136 (1985)) (350 mg, 1.52 inmoles) se suspende en agua (10 mi) . Hidrocloruro de hidroxilamina (126.8 mg, 1.82 mmoles, 1.2 eq.) y acetato de sodio (247.3 mg, 3.04 mmol. 2 eq. ) se agrega y la suspensión se agita a 50°C. La mezcla de reacción vira a claro después de aproximadamente 4 horas. La agitación se continúa a 50°C por 16 horas. Análisis LCMS indica la formación de producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se dejó que alcanzara la temperatura ambiente y se pasó a través de un filtro de porosidad fina. Esta solución se empleó directamente para purificar el producto al utilizar HPLC preparativa: columna de sílice Atlantis HILIC 30 x 100 mm; agua 2% - 21% en acetonitrilo durante 6 minutos; 45 ml/min; con detección a 254 nm. Las fracciones de producto se recolectaron y el acetonitrilo se evapora bajo presión reducida. La solución acuosa se liofilizó para dar al producto, una mezcla de isómeros de aproximadamente 3:1 anti:sin, como un sólido blanco: 284 mg (77%). LCMS: columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 0 - 17% MeOH (0.1% TFA) en agua (0.1% TFA) sobre 5 minutos; gasto de flujo = 3 ml/min; Detección 220nm; tiempos de retención: 0.56 min (isómero sin, 246.0 (M+l)) y 0.69 min (isómero anti, 246.0 (M+l)). XH RMN (D20 y DC1) d 2.15 y 2.22 (singletes, 3H) , 3.5 - 3.72 (m, 4H) , 4.76 (br, protones OH y H20) , 4.95 y 4.97 (singletes, 1H , 7.17 y 7.25 (singletes, 1H) . 13C RMN (D20 y DC1) d 10.80, 16.76, 63.06, 64.59, 64.75, 70.86, 72.75, 72.85, 117.22, 117.64, 135.32, 138.39, 141.35, 144.12. 6.4 Síntesis de_ (E) -1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il) -etanona oxima Este compuesto se prepara en dos etapas, como se muestra a continuación: HO OH HO HO OH V H0\ OH HCI - "V OH N - - NH Dioxano N. . , NH N N ' O Pb r. OH Primero, a un matraz cargado con THI (21.20 mmoles, 4.88g) se agrega agua (25 mi) y HC1 acuoso 1N (21.2 mi, 21.2 mmoles) . Después de que todos los sólidos se disuelven, una solución de tritil hidroxilamina (25.44 mmoles, 7.00 g) en dioxano (55 mi) se agrega y la reacción se mantiene a 50°C por 4h. Al terminar, la reacción se enfria a temperatura ambiente y la solución se ajusta a pH=7 por adición de NaOH acuoso 1N. La solución neutralizada después se concentra a una masa plástica, que se purifica por cromatografía instantánea en gel de sílice [10% MeOH/1% NH4OH (solución al 5% en peso en agua) en DC ] para proporcionar el tritil-éter como un plástico claro. El tratamiento de la masa plástica con hexano y concentración proporciona una espuma blanca, que puede secarse al vacío a un sólido en escamas (10.00 g, rendimiento 97%) . Segundo, a una solución a temperatura ambiente, vigorosamente agitada del tritil oxima-éter (4.8 g, 10 mmoles) en dioxano (90 mi) se agrega a una solución de HC1 en dioxano (4M, 60 mi) . Después de unos cuantos minutos, se observó un precipitado blanco, y la agitación se continúa por un total de 30 minutos, antes de pasar sobre filtro de vidrio fritado y enjuagar la torta con dioxano y éter. La torta se redisolvió en agua (200 mi) , sónico por 5 min, después se enfrió a 0 grados C, trató con celito (5 g), y filtró sobre un filtro de vidrio filtado. La solución acuosa se concentró a sequedad, después se aisló de metanol (30 ml)/dietil éter (60 mi) para proporcionar la £-oxima como un polvo blanco analíticamente puro (3.8 g, 80% rendimiento) . 6.5 Síntesis de (E/Z) -1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il) etanona O-metil oxima El compuesto citado se preparó como se describe anteriormente en el Ejemplo 6.3 al utilizar hidrocloruro de metoxilamina en lugar de hidrocloruro de hidroxilamina , en 74% de rendimiento. El producto fue un sólido esponjoso blanco. LCMS: Columna sunfire C-18, 4.6 x 50mm; 0 - 17% MeOH (0.1% TFA) en agua (0.1% TFA) sobre 5 min; gasto de flujo = 3 mi /min; Detección 220 nm; Tiempos de retención: 1.59 minutos (isómero syn, 260.1 (M+l)) y 1.73 minutos (isómero anti, 260.1 (M+l) ) . *H RMN (D20) d 2.18 y 2.22 (singletes, 3H) , 3.54 - 3.60 (m, 1H) , 3.66 - 3.79 (m, 3H) , 3.94 y 3.95 (singletes, 3H) , 4.76 (br, OH protones y H20) , 4.93 y 4.97 (singletes, 1H) , 7.17 y 7.25 (singletes, 1H) . 13C RMN (D20) d 11.55, 17.56, 62.32, 62.38, 62.99, 63.07, 67.09, 71.54, 73.86, 119.09, 138.64, 139.79, 142.95, 144.98, 148.97. 6.6 Síntesis de (1- (5-metil-4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il) etanono El compuesto citado se prepara en siete etapas utilizando el proceso establecido a continuación. e2NS02CI, TEA n-Buü, THF, -78 °C N . N- c_ ... . DC SO? Me. desPues> .0. .-¦'-·. · N- '· - O TIP OH OH HO HO ="0 NaBH4, EtOH, O 0 °C N . . . N S02 e2 CsF, EtOH S02N e2 OTIPS 6 HO OH HO h^Oaceiona.HCI conc. OH N . . NH (2:2:1 ) Me2NS03H 4-Metilimidazol-l-dimetilaminosulfonamida (2) : A una solución a temperatura ambiente de 4-metil imidazol 1 (3.00 g, 36.54 mmoles) en tolueno (200 mi) se agregan consecutivamente trietilamina (5.6 mi, 40.20 mmoles) y cloruro de W,]V-dimetilaminosulfamoilo (3.9 mi, 36.54 mmoles) . El recipiente se almacenó en un refrigerador a 5 grados C por 48 horas, después los sólidos se separaron por filtración de la reacción y el licor se concentró para obtener una mezcla 2.5:1 de regioisómeros 2 y 2a. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre el gel de sílice (eluyente 80-100% etil acetato : hexano) para obtener 2:2a. en una mezcla 5.5:1 de regioisómeros (4.31 g, 62% rendimiento) : M+l=190.1 4-Meti-2-acetilimidazol-l-dimetilaminosulfonamida (3) : A una solución a -78 grados C del imidazol 2 (1.99 g, 10.54 mmoles) en tetrahidrofurano (70 mi), se agrega lentamente una solución de n-BuLi en hexano (2.5M, 11.60 mi) . Después de 40 minutos AJ-metoxi-N-metilacetamida (1.30 g, 12.65 mmoles) por gotas a una solución enfriada. La reacción se deja que caliente a temperatura ambiente y mantiene por 2 horas. Al terminar, la reacción se neutraliza por adición de NH4CI acuoso saturado (20 mi), después diluye con agua (20 mi) . Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con etil acetato (2 x 30 mi) . Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 mi), después secaron sobre MgSC y concentraron. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea sobre sílice (60-80% eluyente etil acetato : hexano) para proporcionar 3 como un aceite (1.85 g, 76% rendimiento): M+l = 232.1. 4-Metil-2- (1- (triisopropilsililoxi) vinil) -1-dimetilaminosulfonamida (4) : A una solución de imidazol 3 (1.65 g, 7.14 mmoles) en diclorometano (45 mi) se agregan consecutivamente trietilamina (1.00 mi, 14.28 mmoles) y triisopropilsilil trifluorometanesulfonato (2.12 mi, 7.86 mmoles) . La reacción se mantiene a temperatura ambiente por 20 horas, después neutraliza por adición de aHC03 acuoso saturado (20 mi) . La mezcla se diluye con agua (20 mi) y las capas se separan. La capa acuosa se lava con diclorometano (2 x 20 mi) y las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con solución de salmuera (20 mi), después secaron sobre MgS04 y concentraron. El aceite resultante se purifica por cromatografía instantánea sobre gel de síllice (eluyente 1-2% metanol : diclorometano) para proporcionar silil enol éter 4 como un aceite naranja (2.26 g, 83% rendimiento): M+l= 388.2. Lactol (5) : A una solución a -78 grados C de imidazol 4 (2.26 g, 5.84 mmoles) en tetrahidrofurano (40 mi) se agrega lentamente una solución de hexano de n-BuLi (2.5M, 3.27 mi). Después de 30 minutos, una solución de (-) -2,3-0-isopropilidina-D-eritronolactona (1.66 g, 10.51 mmoles) en tetrahidrofurano (10 mi) se agrega lentamente a la solución - 78 grados C. La reacción se mantiene a -78 grados C por 2 horas, después se deja que caliente a 0 grados C antes de neutralizar la reacción al agregar NH4C1 acuoso saturado (20 mi) . La mezcla se diluye con agua (10 mi) y las capas se separan. Las fracciones orgánicas se lavan con etil acetato (2 x 20 mi), y las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 mi) después secaron sobre gS04 y concentraron. El producto crudo se purifica el gel de sílice (eluyente 30-50% etil acetato : hexano ) para proporcionar el lactol 5 (2.69 g, 85% rendimiento) como una espuma blanca: M+l =546.4. Diol (6) : A una solución a 0 grados C de lactol 5 (2.09 g, 3.83 moles) en etanol (70 mi) se agrega NaBH4 granular (1.4 g, 38.32 minóles) en unas cuantas porciones. Después de 2 horas, la reacción se calienta a temperatura ambiente por 30 minutos, después concentra. El residuo se redisuelve el agua (40 mi) y etil acetato (40 mi). La mezcla bifásica se agitó vigorosamente por 10 minutos, después las capas se separan. La capa acuosa se lava con etil acetato (2 x 40 mi) y las fracciones orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mi), después secan sobre MgS0 y concentran. La espuma cruda se purifica por cromatografía instantánea sobre sílice (eluyente 5% metanol : diclorometano) para proporcionar el diol 6 (1.88 g, 90% rendimiento) como una mezcla 3:1 de diasterómeros inseparables en la posición bencílica: M+l= 547.4. Imidazol (7): Fluoruro de cesio (315 mg, 2.08 mmoles) se agrega a una solución del imidazol 6 (567 mg, 1.04 mmoles) en etanol (10 mi) y calienta a 65 grados C. Después de 1 hora, la reacción se enfría a temperatura ambiente y tratar con NH4C1 acuoso saturado (1 mi), después concentra. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea sobre gel de sílice (eluyente 5% metanol : diclorometano) para proporcionar imidazol 7 (380 mg, 94% rendimiento) como una espuma blanca: M+l=392.1. Producto final (8) : El imidazol protegido 7 (380 mg, 0.97 mmoi) se disuelve en acetona (6 mi) y trata consecutivamente con agua (6 mi) y HC1 acuoso concentrado (3 mi) . El recipiente se calentó a 40 grados C por 45 minutos, después se enfrió a temperatura ambiente y concentró. El material crudo se purificó por cromatografía preparativa de fase inversa en una columna a 150mm x 30 mm Zorbax C-6 utilizando solventes no amortiguados por el siguiente método: corrida isocrática a 1% acetronitrilo : agua por 5 minutos (TR=1.52 minutos). Después de liofilización, el compuesto 8 se obtiene como la sal de ácido dimetilaminosulfámico como un sólido amorfo: M+l= 245.1; 1H RMN (400 MHz, CDC13) mayor S 5.04 (d, 1H), 3.62 (comp. m, 2H) , 3.42 (comp. m, 2H) , 2.62 (s, 6H) , 2.43 (s, 3H) , 2.21 (s, 3H) ; menor d 5.01 (d, 1?) , 3.79 (comp. m, 2H) , 3.55 (comp. m, 2H) , 2.62 (s, 6H) , 2.43 (s, 3H) , 2.21 (s, 3H) . 6.7 Síntesis de (1R,2S,3R) -1- (2- (1-hidrazonoetilo) -1H- imidazol-4-il) butano-1 ,2,3, 4-tetraol 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4 -Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il] -etanono (THI, preparado de acuerdo con Halweg, K.M. and Büchi, G., J. Org. Chem. 50:1134-1136 (1985)) (148 mg, 0.64 mmol) se suspende en metanol (3 mi) y agua (1 mi). Hidrato de hidrazina (35 mg, 0.7 mmol, 1.2 eq. ) en ácido acético (una gota) se agregaron y la suspensión se agitó a 50 grados C por 6 horas. Análisis LCMS indicó la formación de producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con tetrahidrofurano . El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con tetrahidrofurano para dar el producto como una mezcla de aproximadamente isómeros 3:1 E:Z, como un sólido blanco: 90 mg (58%) . LCMS: Columna Zorbax C-8, 4.6 x 150mm; 10 - 90% en agua (10 mM acetato de amonio) sobre 6 min; gasto de flujo = 2 mi /min; Detección 220 nm; Tiempos de retención: 0.576 minutos (isómeros syn 245.0 ( +l)) y 1.08 minutos (isómero anti 245.0 (M+l)). XH RMN (DMSO-d6) d 2.5 (singlete, 3H bajo DMSO), 3.4 - 3.7 (m, 4H), 4.3 (m, 2H), 4.6 (m, 2H) , 4.8 (m, 1H) , 4.9 y 5.0 (dobletes, 1H) , 7.04 y 7.21 (singletes, 1H) . 6.8 Síntesis de N'-(l-(4-( (IR, 2S , 3R) -1,2,3,4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- il) etiliden) acetohidrazida l-[4-((lR,2S,3R)-l,2,3, 4-Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (160 mg, 0.70 mmol) se suspende en metanol (3 mi) y agua (1 mi) . Hidrazina acética (56 mg, 0.75 mmol, 1.2 eq. ) y ácido hidrocloridrico (una gota, 12 N) se agregan y la suspensión se agita a 50 grados C por 48 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfria a temperatura ambiente y diluye con tetrahidrofurano. El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con tetrahidrofurano para dar el producto, una mezcla de aproximadamente isómeros 3:1 E:Z, como un sólido blanco: 129 mg (65%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 2 - 20% en agua (10 mM acetato de amonio) sobre 2.5 minutos; gasto que flujo = 3.5 ml/min; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.53 minutos (287.1 (M+l)) . XH RMN (DMSO-d6) d 2.2 (singletes, 3H) , 2.5 (singletes, 3H bajo DIVISO) , 3.4 - 3.7 (m, 4H) , 4.3 (br, 2H) , 4.6-5.0 (br, 4H) , 7.0 (br, 1H) , 10.30 y 10.37 (singletes, 1H) . 6.9 Síntesis de (E) -4-metilo- ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1,2,3,4- te rahidroxibu il) -lH-imidazol-2- il) etiliden) bencensulfonohidrazida 1- [4- ( (1R, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (153 mg, 0.67 mmol) se suspende en metanol (3 mi) y agua (1 mi) . P-toluensulfonilo de hidrazida (140 mg, 0.75 mmol, 1.2 eq.) y ácido clorhídrico (una gota, 12 N) se agregan y la suspensión se agita a 50 grados C por 24 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y carga en seco en gel de sílice. Cromatografía instantánea en gel de sílice (10 g SÍO2, 4:1 etil acetato : metanol ) para dar por resultado el producto, una mezcla de aproximadamente 85:15 isómeros E:Z, como un sólido blanco: 142 mg (53%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50mm; 10-90% en agua (10 mM acetato de amonio) sobre 2.5 minutos; gasto de flujo = 3.5 ml/min; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.50 minutos (399.2 ( +l)) y 0.66 minutos (399.3 (M+l)) . 1H RMN (Metanol-d4) S 2.2 (singletes, 3H) , 2.41 y 2.45 (singletes, 3H) , 3.6 - 3.85 (m, 4H) , 4.99 y 5.05 (singletes, 1H) , 7.09 (br s, 1H) , 7.39 (d, 2H, j =8 Hz), 7.77 y 7.87 (d, 2H, j =8 Hz) . 6.10 Síntesis de ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- il) etiliden) benzohidrazida l-[4-( (lR,2S,3R)-l,2,3, 4-Tetrahidroxi-butil) -1H-imidazol-2-il ] -etanono (150 mg, 0.65 mmol) se suspende en metanol (3 mi) y agua (1 mi) . Hidrazida de ácido benzoico (102 mg, 0.75 mmol, 1.2 eq.) y ácido clorhídrico (una gota, 12 N) se agregan y la suspensión se agitó por 50 grados C por 18 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto en la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción homogénea se enfría a temperatura ambiente y concentra al vacío. SPE de fase inversa C-18 (lOg Alltech Hi-load C18, gradiente de agua a 20% metanol/agua ) para dar el producto como una mezcla de aproximadamente 1:1 de isómeros E:Z, como un sólido incoloro: 193 mg (85%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 10-90% en agua (acetato de amonio a 10 mM) sobre 2.5 min; gasto de flujo = 3.5 mi /min; Detección 220 nm; Tipo de retención: 0.49 minutos (349.2 (M+l)) . 1ti RMN (Metanol-d4) d 2.2 (singletes, 3H), 2.42 y 2.45 (singletes, 3H) , 3.6 - 3.85 (m, 4H) , 5.11 y 5.14 (singletes, 1H) , 7.30 (br s, 1H) , 7.40-7.7 (m, 4H) , 7.80 y 7.95 (m, 2H) , 8.1 (br s, 1H) . 6.11 Síntesis de (E) -etil 2- (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibu i1)-lH-imidazol-2- il) etiliden) hidrazinacarboxilato 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil) -1H- imidazol-2-il ] -etanono (150 mg, 0.65 mmol) se suspende en metanol (3 mi) y agua (1 mi) . Etil carbazato (78 mg, 0.75 mmol, 1.2 eq. ) y ácido clorhídrico (una gota, 12 N) se agregan y la suspensión se agita a 50 grados C por 18 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, concentra al vacío y diluye con acetona. El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con acetona para dar el producto, un isómeros aparente como un sólido blanco: 96 mg (47%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 2 - 20% en agua (10 mM acetato de amonio) durante 2.5 minutos; gasto que flujo = 3.5 ml/min; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.25 minutos (317.35 (M+l)) . 1H RMN (Metanol-d4 ) d 1.36 (t, 3H, j =8 Hz), 2.28 (s, 3H) , 2.42 y 2.45 (singletes, 3H) , 3.60 - 3.85 (m, 4H) , 4.34 (dd, 2H, j =8 Hz) , 5.08 (s, 1H) , 7.27 (s, 1H) . 6.12 Síntesis de (E) - ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1,2,3,4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- il) etiliden) nicotinohidrazida 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il] -etanona (215 mg, 0.93 mmol) se suspende en metanol (3 mi) y agua (1 mi) . Hidrazida de ácido nicotínico (137 mg, 1.0 mmol, 1.1 eq.) y ácido clorhídrico (una gota, 12 N) se agregaron y la suspensión se agita por 50 grados C por 48 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfria a temperatura ambiente y concentra parcialmente al vacio. El precipitado blanco resultante se enfria y lava con agua para dar el producto, un isómeros aparente como un sólido blanco: 311 mg (95%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 10 - 90% en agua (acetato de amonio 10 mM) sobre 2.5 min; gasto que flujo = 3.5 mi /min; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.22 minutos (350.27 (M+l)) . H RMN (DMS0-d6) d 2.37 (s, 3H) , 3.60 - 3.85 (m, 4H) , 4.40 (m, 2H) , 4.71 (m, 1H) , 5.01 (m, 2H), 5.16 (m, 1H) , 7.25 (br, 1H) , 7.64 (br, 1H) . 8.35 (br, 1H) . 8.80 (br, 1H) . 9.14 (br, 1H) . 6.13 Síntesis de 3-cloro- ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- il) etiliden) benzohidrazida 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (194 mg, 0.84 mmol) se suspende en etanol (4 mi) y agua (1 mi) . Hidrazida de ácido 3 clorobenzóico (170 mg, 1.0 mmol, 1.2 eq. ) y ácido clorhídrico (una gota, 12 ) se agregan y la suspensión se agita a 50 grados C por 48 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida.

La mezcla de reacción se enfria a temperatura ambiente y concentra parcialmente al vacio. El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con etanol para dar el producto, como una mezcla -3:1 E:Z, como un sólido blanco: 108 mg (33%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 10 - 90% en agua (acetato de amonio 10 mM) sobre 2.5 minutos; gasto de flujo = 3.5 ml/minutos; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.63 minutos (383.23 (M+l)) . JH RMN (Metanol-d ) d 2.44 (s, 3H) , 3.60 - 3.90 (m, 4H) , 5.12 (s, 1H) , 7.29 (s, 1H), 7.65 (m, 2H) , 8.04 (ra, 2H) . 6.14 Síntesis de (E) -4-fluoro-N ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- il) etiliden) benzohidrazida 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4 -Tetrahidroxi-but il ) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (172 mg, 0.74 mmol) se suspende en etanol (4 mi) y agua (1 mi) . Hidrazida de ácido 4-fluorobenzóico 131 mg, 0.85 mmol, 1.1 eq.) y ácido clorhídrico (una gota, 12 ) se agregan y la suspensión se agita a 55 grados C por 48 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y concentra parcialmente al vacío. El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con etanol para dar el producto, un isómeros aparente como un sólido blanco: 97 mg (35%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 10 - 90% en agua (acetato de amonio 10 mM) sobre 2.5 minutos; gasto de flujo = 3.5 ml/minutos; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.55 minutos (367.24 (M+l)). 1H RMN (Metanol-d4 , urna gota DC1) d 2.55 (s, 3H) , 3.60 - 3.90 (m, 4H) , 5.22 (s, 1H) , 7.30 (m, 2H) , 7.54 (s, 1H) , 8.08 (m, 2H) . 6.15 Síntesis de (E) -6-amino-N 1 - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- il) etiliden) nicotinohidrazida l-[4-((lR,2S,3R)-l,2,3, 4-Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (115 mg, 0.50 mmol) se suspende en etanol (4 mi) y agua (1 mi). Hidrazida sustituida (91 mg, 0.6 mmol, 1.2eq.) y ácido clorhídrico (una gota, 12 N) se agregan y la suspensión se agita a 55 grados C por 48 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y parcialmente concentra al vacío. El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con etanol para dar el producto, como un isómero aparente como un sólido blanco: 136 mg (75%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 10 - 90% en agua (acetato de amonio 10 mM) sobre 2.5 minutos; gasto de flujo = 3.5 ml/minutos ; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 0.15 minutos (365.32 (M+l) ) . 1H RMN (Metanol-d4, una gota DC1) d 2.58 (s, 3H) , 3.60 - 3.90 (m, 4H) , 5.22 (s, 1H) , 7.17 (m, 1H), 7.54 (m, 1H) , 8.44 (m, 1H) , 8.68 (m, 1H) . 6.16 Síntesis de (E) - ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2- 11) etiliden) isonicotinohidrazida 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (168 mg, 0.73 mmol) se suspende en etanol (4 mi) y agua (1 mi) . Hidrazida isonicot inica (110 nig, 0.80 mmol, l.leq.) y ácido clorhídrico (una gota, 12 N) se agregan en la suspensión se agita por 55 grados C por 24 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y concentra parcialmente al vacío. El precipitado blanco resultante se recolecta y lava con etanol para dar el producto, como un isómeros aparente como un sólido blanco: 136 mg (75%) . LCMS: Columna Sunfire C-18, 4.6 x 50 mm; 10 - 90% en agua (acetato de amonio 10 mM) sobre 2.5 minutos; gasto de flujo = 3.5 ml/minutos; Detección 220nm; Tiempo de retención: 0.15 minutos (365.32 (M+l)) . 1H RMN (Metanol-d4, una gota DC1) d 2.63 (s, 3H), 3.60 - 3.90 (m, 4H) , 5.12 (s, 1H) , 7.58 (s, 1H), 8.63 (d, 2H, j = 8 Hz), 9.14 (d, 2H, j = 8 Hz) 6.17 Síntesis de (E) -N ' - (1- (4-( (1R,2S,3R) -1,2,3,4- tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il) etiliden) bifenil-3- carbohidrazida 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, -Tetrahidroxi-but il ) -1H-imidazol-2-il ] -etanono (315 mg, 1.36 inmoles) y bifenil-3-carbohidrazida (360 mg, 1.81 mmoles) se suspende en DMSO (2 mi) . Ácido clorhídrico concentrado (dos gotas) se agrega si la suspensión se agita a 40 grados C por 5 horas. Análisis LCMS indica la formación del producto y la ausencia del material de partida. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, diluye con metanol y purifica por HPLC de fase inversa (NH4OAC 10 m /acetonitrilo) . Dos fracciones (E y Z isómeros) de la masa deseada se recolectan por separado y liofilizan. La fracción uno produce un sólido blanco, 95 mg (16%) . La fracción dos fue un sólido blanco, 82 mg (14%) . Fracción uno: Columna analítica HPLC Zorbax C-8, 4.6 x 150 mm; Solvente A = 10 mM acetato de amonio; Solvente B = MeCN; 5% B a 0 minutos, 5% B a 1 minutos, 90% B a 3 minutos, 4 minutos parada; gasto de flujo = 3 ml/minutos; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 2.9 minutos (nota: contiene -5% del otro isómero) . M+H = 425.28. 1H RMN (DMS0-d6 con 2 gotas D20) d 2.3 (singlete, 3H) , 3.3 - 3.7 (m, 4H) , 4.9 (m, 1H) , 7.19 (s, 1H) , 7.37 (m, 1H) 7.47 (m, 2H) , 7.67 (m, 3H), 7.85-7.92 (m, 2H) y 8.15 (s, 1H) . HSQC de la misma muestra se correlaciona a la señal de protón a 2.3 (CH3) con una señal de carbono a 20 ppm. Fracción dos: Columna analítica HPLC Zorbax C-8, 4.6 x 150 mm; Solvente A = 10 mM acetato de amonio; Solvente B = MeCN; 5% B a 0 minutos, 5% B a 1 minuto, 90% B a 3 minutos, 4 minutos parada; gasto de flujo = 3 ml/minutos; Detección 220 nm; Tiempo de retención: 2.963 minutos (nota: contiene -6% del otro isómero) . M+H = 425.28. 1H RMN (DMSO-d6 con 2 gotas D20) d 2.4 (singlete, 3H) , 3.4 - 3.6 (m, 4H) , 4.77 y 4.86 (singletes amplios, combinados = 1H) , 6.9 y 7.1 (singletes amplios, combinados = 1H) , 7.40 (m, 1H) 7.50 (m, 2H) , 7.61 (m, 1H) , 7.73 (m, 2H) , 7.87 (m, 2H) y 8.10 (s, 1H) . HSQC de la misma muestra correlaciona la señal de protones a 2.4 (CH3) con una señal de carbono a 13 ppm. 6.18 Síntesis de N-hidroxi-4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , - tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-carboxamida 1- [4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-Tetrahidroxi-butil ) -1H-imidazol-2-il ] -etanona (18 g, 78.3 mmoles) se suspende en dicloroetano (160 mi) y 2,2-dimetoxi propano (160 mi) , ácido 4 -toluensulfónico (3 g) se agrega y la mezcla se agita a 70 grados C por 18 horas. La reacción se diluye con diclorometano y lava con agua, 5% de bicarbonato, salmuera y después se carga en seco en Si02. Purificación por cromatografía instantánea (hexano/etil acetato) dió por resultado l-(4-((4S,4'R,5R)-2,2,2',2' -tetrametil-4 , ' -bi (1,3-dioxolan) -5-il) -lH-imidazol-2-il) etanona como aceite incoloro (18.8 g, 60.6 mmol, 77%; M+H cale: 311.4, obs : 311.3) . El producto obtenido anteriormente (20 g, 64.5 mmoles) se disuelve en DMF. K2C03 se agrega (12.5 g, 90.3 mmoles) seguido por bromuro de bencilo (10.7 mi, 90.3 mmoles) . La reacción se calienta a 50 grados C por 18 horas. Análisis LCMS indica que permaneció material de partida. Una porción adicional de bromuro de bencilo (5 mi, 42 mmoles) se agrega y la temperatura aumenta a 60 grados C. Después de 3 horas, la reacción se neutraliza con agua fría y extrae con etil acetato. Los extractos orgánicos se lavan con agua, después salmuera, secan sobre sulfato de sodio, y cargan en gel de sílice. Cromatografía instantánea (20 a 40% acetato de etilo en hexano) dió por resultado 1- ( l-bencilo-4-( (4S, 4 ' R, 5R) -2, 2, 2 ' , 2 ' -tetrametil-4 , 4 ' -bi (1, 3-dioxolan) -5-il) -lH-imidazol-2-il) etanona (16.1 g, 62%) . El intermediario obtenido (13 g, 32.5 mmoles) se disuelve en dioxano (120 mi) y trata con NaOH (13.2 g) disuelto en blanqueador comercial (200 mi, 6% NaOCl) . Después de 2 horas de agitación vigorosa, la reacción se extrae con etil acetato. Extractos orgánicos se lavaron con salmuera después secaron sobre celite. Filtración y evaporación dieron por resultado un sólido que se secó adicionalmente al vacío para dar por resultado ácido l-bencil-4- ( (4S, 4 ' R, 5R) -2 , 2 , 2 ' , 2 ' -tetrametil-4 , 4 ' -bi ( 1 , 3-dioxolan) -5-il ) -lH-imidazol-2-carboxí lico (13 g, rendimiento cuantitativo, M+H cale: 403.2, obs: 403.2) . El producto obtenido anteriormente, (600 mg, 1.49 mmoles), O-tritilhidroxilamina (820 mg, 2.98 mmoles), EDAC (430 mg, 2.24 mmoles) y HOBt (305 mg, 2.24 mmoles), se obtuvieron con DMF (8 mi) y trietilamina (622 µ?, 4.47 mmoles) . La reacción se agitó a temperatura ambiente por 22 horas, concentró y después cargó en sílice utilizando DCM/MeOH. Cromatografía instantánea (MeOH/DCM) dió por resultado l-bencilo-4- ( ( 4S , 4 ' R, 5R) -2 , 2 , 2 ' , 2 ' -tetrametil-4, 4 ' -bi (1, 3-dioxolan) -5-il) -N- (tritiloxi) -lH-imidazol-2-carboxamida (480 mg, 0.73 mmol, 49%, M+H cale: 660.3, obs: 660.4) . El producto obtenido anteriormente (480 g, 0.73 mmol) se disuelve en etanol (50 mi) . Pd(OH)2 (500 mg, 20% en carbón húmedo) se agrega y la reacción se agita bajo H2 4.57 kg/cm2 (65 psi) por 18 horas y filtra. Se retira etanol al vacío. El residuo se disuelve en DCM y purifica por cromatografía instantánea (MeOH/DCM) para dar por resultado N-hidroxi-4- ( ( S , 4 ' R, 5R) -2 , 2 , 2 ' , 2 ' -tetrametil-4, ' -bi (1,3-dioxolan) -5-il ) -lH-imidazol-2-carboxamida (150 mg, 0.46 mmol, 63%, M+H cale: 328.1, obs : 328.3) . El producto obtenido anteriormente (150 g, 0.46 mmol) se disuelve en acetona (8 mi) y agua (8 mi) . La reacción se enfria a una temperatura interna a -15 grados C utilizando un baño de hielo seco/acetona. HC1 concentrado (3 mi) se agrega a una velocidad tal que la temperatura interna permanece inferior a -10 grados C. El baño frío se retira y la reacción se agita a temperatura ambiente por 3 horas, a 4 grados C por 18 h y de nuevo a temperatura ambiente por 7 horas. Después de retirar la acetona y algo de agua in vacuo, se forma un precipitado. Dioxano (20 mi) se agrega seguido por THF (10 mi) . El sólido se aisla por filtración, lava con THF/dioxano y seca al vacio para dar N-hidroxi-4 - ( ( IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , -tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-carboxamida como sal hidrocloruro (98 mg, 0.40 mmol, 87%) . Espectro de masas: M+H cale: 248.1, obs: 248.2. HPLC analítico: Luna Pheny-Hexyl, 5um, 4.6x50 mm, acetato de amonio 10 mM isocrático con acetonitrilo 1%, gasto de flujo = 3 ml/min, 220 nm detección, Tiempo de retención = 0.245 minutos. 1H RMN (DMSO-d6) d 3.37-3.64 (m, 4H) , 4.96 (singlete amplio 1H) , 7.47 (s, 1H) , 11.9 (singlete amplio, 1H) . 6.19 Medir Efectos en Linfocitos en Ratones Se administraron los compuestos en forma oral o en agua para beber. Para experimentos de dosis oral, los compuestos se resuspendieron de cristales a 10 mg/ml en vehículo (por ejemplo agua) . Ratones (híbridos Fl de cepa 129/B6) se les proporcionó una sola dosis de 100 mg/kg del compuesto (equivalente a 100 mpk de la base libre para cada compuesto) , o un control de un solo vehículo y regresaron a sus jaulas. Los ratones anestesiaron utilizando isofluorano, dieciocho horas después de dosis y se recolectaron los tejidos para análisis como se describe continuación. Para estudios de agua para beber, los compuestos se disolvieron en 50 mg/L en agua acidificada (pH = 2.8) que contiene 10 g/L de glucosa. A los ratones se les permitió acceso libre al agua que contiene compuesto (o solución de glucosa como un control) por 72 horas. ?1· final de la 72 horas, se recolectaron tejidos para análisis. Mediciones CBC se obtuvieron como sigue. Los ratones se anestesiaron con isofluorano y se recolectó sangre del plexo retroorbital en tubos de recolección de sangre EDTA (Capiject-MQK, Terumo Medical Corp., Elkton, MD) . Análisis CBC automatizado se realiza utilizando Cell-Dyn 3500 (Abbott Diagnostics, Abbott Park, IL) o un instrumento HemaVet 850 (Drew Scientific, Inc., Oxford, CT) . Se obtuvieron mediciones de citometría de flujo (FACS) como sigue. Veinticinco µ 1 de sangre entera se lisan por choque hipotonotico, lavan una vez en 2 mi amortiguadores de lavado FACS (F B: PBS/0.1% BSA/0.1% NaN3/2mM EDTA) y tiñen por 30 minutos a 4 grados C en la obscuridad con una combinación de anticuerpos conjugados con fluorócromo diluidos en 50 µ 1 FWB. Después de teñir, las células se lavaron una vez con 2 mi de FWB y resuspenden en 300 µ? de FWB para adquisición. Procedimientos estándar para remoción no estéril de bazo y timo se siguieron. Se dispersaron órganos en suspensiones de células sencillas al forzar el tejido a través de un colador celular de 70 m (Falcon, Becton Dickinson Labware, Bedford, MA) . Para análisis FACS RBCs se lisaron por lisis hipotónica, lavaron, y lxlO6 células se incubaron con 10 µ 1 de ant i-CDl 6/CD32 (Fe Block™, BD-PharMingen, San Diego, CA) (dilución 1/10 en FWB) por 15 minutos a 4 grados C. Las células se tiñeron con una combinación de anticuerpos conjugados con fluorócromo diluidos en 50-100 µ 1 de FWB, agregaron directamente las células en Fe Block, por 30 minutos a 4 grados C en la obscuridad. Después de teñir las células se lavaron una vez con 1 mi de FWB y resuspenden en 300 µ 1 de FWB para adquisición. Todos los anticuerpos se adquirieron de BD-PharMingen, San Diego, CA a menos que se especifique de otra forma. Muestras se analizaron utilizando un citómetro de flujo FACSCalibur y programa CellQuest Pro (Becton Dickinson Immunocytometry Systems, San José, CA) . Mezclas de anticuerpos usados para el timo fueron: TCRb APC Cy7; CD4 APC; CD8 PerCP; CD69 FITC; y CD62L PEI. Mezclas de anticuerpos utilizadas para bazo y sangre fueron: B220 PerCP; TCRb APC; CD4 APC Cy7 ; CD8 PE Cy7 ; CD69 FITC; y CD62L PE. 6.20 Medición de Efectos en Niveles SIP en Ratones Niveles de SIP en bazos de ratones (híbridos Fl de cepa 129/B6) se midieron utilizando una adaptación del ensayo de enlace radio-receptor descrito por Murata, N., et al., Anal. Biochem. 282:115-120 (2000). Este método utiliza células HEK293F que sobre expresan Edg-1, uno de los subtipos de receptor SIP y se basa en la competencia de SIP etiquetado con SIP sin etiquetar, en una muestra determinada. Células HEK293F se transfectaron con un vector de expresión de receptor pEFneo SIP (Edg-1) y se seleccionó un clon de células resistentes a G418. Las células HEK293F que expresan Edg-1, se cultivaron en 12 multi placas en DMEM que contienen 5% (v/v) FBS en una atmósfera de aire humidificado : CO2 (19:1). Veinticuatro horas antes del experimento, el medio se cambió a DMEM fresco (sin suero) que contiene 0.1% (p/v) BSA. Dieciocho horas después de que el compuesto de prueba se administra, se sacrificaron ratones y sus vasos se retiraron y congelaron S1P se obtiene del tejido congelado utilizando métodos conocidos. Ver, e . g. , Yatomi , Y., et al., FEBS Lett. 404:173-174 (1997). En particular, 10 vasos de ratones en 1 mi de amortiguador fosfato 50 mM enfriado por hielo (pH 7.5) que contiene EGTA 1 mM, DTT lmM e inhibidores proteasa completa Roche se homogenizaron tres veces a intervalos de un minuto en hielo. El resultado se centrifuga a 2500 rpm y 4 grados C por 10 minutos para retirar desechos celulares. El sobrenadante después se ultracentifuga a 45000 rpm y 4 grados C en un rotor a 70Ti por 1 hora para desprender las proteínas asociadas a membrana. El sobrenadante se descarta, y el precipitado se resuspende en volumen mínimo (~1 mi) de amortiguador fosfato 50 mM enfriado por hielo (pH 7. 5) que contiene EGTA 1 mM, DTT 1 mM y glicerol al 33% con inhibidores de proteasa completa de Roche presentes. La concentración total de proteína se mide utilizando el ensayo Bradford. S1P se extrae en cloroformo/KCl/NH4OH (pH - 12), y que la fase acuosa superior se mantiene. Después se extrae el cloroformo/metanol/ HC1 (pH < 1), y la fase orgánica inferior se mantiene y evapora para proporcionar S1P que se almacena en un congelador hasta que se utiliza. Justo antes del ensayo, la muestra seca se disuelve por sonicación en un amortiguador aglutinante que consiste de 20 mM Tris-HCl (pH 7. 5), 100 mM NaCl, 15 mM NaF, and 0. 4 % (p/v) BSA. El contenido de S1P de una muestra se mide por ensayo de enlace radio receptor con base en enlace competitivo de [33P] S1P con S1P en la muestra en células que expresan Edg-1. Células HEK293F que expresan Edg-1 en 12 multiplacas confluentes se lavaron dos veces con amortiguador de enlace enfriado por hielo y después incuban con el mismo amortiguador que contiene [33P]S1P 1 nM (aproximadamente 18,00 dpm por pozo) y dosis crecientes de S1P auténtico o muestra de prueba en un volumen final de 0.4 mi. Las placas se mantuvieron en hielo por 30 minutos, y las células se lavaron dos veces con el mismo amortiguador de enlace enfriado por hielo para retirar ligando no enlazado. Las células se solubilizan con una solución compuesta por SDS 0.1%, NaOH 0. 4%, y Na2C03 2%, y que se contó la radiactividad por un contador de destellos de liquido. El contenido S1P del pozo del ensayo se estimó por extrapolación a partir de la curva de desplazamiento estándar. El contenido de S1P en la o las muestras de prueba iniciales, se calcula al multiplicar el valor obtenido de la curva estándar por eficiencia recuperación de extracción S1P y el factor de dilución. 6.21 Efectos de Compuestos en Linfocitos en Ratones Utilizando los métodos descritos anteriormente, los efectos in vivo de diversos compuestos, se determinaron. Como se muestra en las Figuras 1-3, cuando se administran a ratones (híbridos Fl de cepa 129/B6) en agua de deber, tanto THI como un compuesto representativo de la invención (Compuesto 1) disminuyen el egreso de linfocitos del timo. La Figura 4 muestra los efectos de control del vehículo (agua para beber), THI, compuesto 2 en conteos de sangre entera. De manera interesante, los efectos in vivo reportados por Pyne (WO 97/46543) para el Compuesto 2 no se observan . 6.22 Modelo da Artritis Inducida por Colágeno Artritis inducida por colágeno (CIA = collagen-induced arthritis) es un modelo ampliamente empleado de artritis reumatoide (RA = rheumatoid arthritis), una enfermedad de las articulaciones provocada por procesos autoinmunes e inflamatorios. Ver en general, Wooley P.H. et al., J. Immunol. 135 (4 ): 2443-2451; A. Persidis, Nature Biotechnology 17:726-728; Current Protocols in Immunology (John Wiley & Son, Inc. 1996). Los primeros estudios establecieron una jerarquía de respuesta para CIA enlazada a ciertos haplotipos H-2. Más recientemente, Campbell y colaboradores volvieron a evaluar CIA en ratones C57BL/129sv (H-2b) y encontraron que ratones derivados del fondo C57B6 pueden desarrollar CIA. Campbell I. K, et al. Eur. J.

Immunol. 30: 1568-1575 (2000). Aquí, colágeno para inyección 2 mg/ml de colágeno de pollo tipo II (CII) (Sigma) se disuelve en ácido acético 10 mM por agitación durante la noche a 4 grados C. Adyuvante completo de Freund (CFA = complete Freund' s adjuvant) se adquirió listo para uso (Sigma). Utilizando una jeringa de vidrio, CII se emulsifica en un volumen igual de CFA justo antes de inmunización. Para inmunizar ratones, se emplearon una jeringa de vidrio y aguja 26G, y los ratones fueron inyectados con emulsión CII/CFA intradérmicamente en la base de la cola. CFA y 100 µ g de pollo CII en un volumen total de 50 µ 1 CFA se utilizan para . cada inyección. Una inmunización de refuerzo de 100 µ g de CII emulsificada en CFA, se suministró mediante la misma ruta 3 semanas después de la inmunización primaria. La inyección del colágeno llevó a hinchado de la articulación y la planta de las patas en ratones. Ratones fueron inspeccionados cada dos a tres días para el inicio de artritis, que se estimó por combinación de mediciones con calibrador del espesor de la planta de la pata posterior y evaluación visual de las articulaciones afectadas de las patas traseras. El avance de CIA fue seguido por diez semanas después del inicio de la enfermedad, después de cuyo tiempo, la enfermedad se estimó por histología de las articulaciones. Ratones se consideraron negativos para artritis si no desarrollan CIA en 150 días de inmunización con colágeno tipo II. La presencia o ausencia de artritis en ratones, se determinó por un sistema de calificación visual establecido. En CIA de ratones, cualquiera o las cuatro patas pueden afectarse. La inflamación en su pico se extiende desde el tobillo hasta el dígito, y se caracteriza por extremo hinchado y eritema. Una vez que aparece la artritis, cada pata se examina 2 a 3 veces a la semana. Para evaluar la severidad de la inflamación, la calificación visual ampliamente empleada de 0 a 4 se utiliza, en donde: 0 = normal, sin evidencia de eritema e hinchado; 1 = eritema y ligero hinchado confinado a la mitad de la pata o la articulación del tobillo o dígitos individuales; 2 = eritema y ligero hinchado que se extienden hacia el tobillo y la mitad de la pata o hinchado en más de un dígito; 3 = eritema e hinchado moderado que se extiende desde el tobillo a las puntas metatársicas ; y 4 = eritema y severo hinchado que abarca el tobillo, pata y dígitos. 6.23 Efecto en Modelo de Artritis Inducida por Colágeno El efecto de un compuesto de la invención en el modelo CIA se determinó utilizando 30 ratones (híbridos Fl de cepa 129/B6) en el modelo descrito anteriormente. Los ratones se dividieron al azar en dos grupos ciegos, que reciben 0 mpk (vehículo de control) o 100 mpk de cada compuesto. El vehículo fue agua destilada, estéril. El control de vehículo se dosificó a 10 1/g de peso corporal. Las dosis se llevan a cabo una vez al día por el suministro oral. Empiezan tres días antes de inicio del experimento CIA y continúan por la duración del experimento. La Figura 5 muestra el efecto del compuesto en CIA con el tiempo, en donde la calificación acumulativa es la suma de las calificaciones de la pata delantera y el tobillo. 6.24 El Efecto de un Compuesto en Monos El efecto de un compuesto de la invención en 20 monos cinomolgus machos, sin tratamiento previo se investigó por Covance Research Products Inc. (Alice, TX) . Cada animal fue identificado con un tatuaje individualmente numerado. Los animales fueron aclimatados por aproximadamente 11 días antes de administración de la dosis. Al tiempo de administración de dosis, los animales se consideraron con la edad adulto joven/adulto. Durante aclimatado y el período de prueba, los animales se alojaron en jaulas individuales. Los animales no se mezclaron por al menos 48 horas después de administración de la dosis para permitir supervisión de cualesquiera efectos relacionados a vehículo o artículo de prueba. Los animales tuvieron acceso a dieta de primate no certificada ad libitum, excepto como se especifica para administración de la dosis. También se proporcionaron frutas y otros complementos, según sea apropiado durante periodos sin ayuno. Se proporciona agua ad libitum. El compuesto probado se almacenó protegido de la luz en un recipiente sellado en desecante bajo condiciones ambiente (aproximadamente la temperatura ambiente) . Se suministra agua destilada por Covance para administración oral a los animales en el grupo control de débil. Las formulaciones de dosis del artículo de prueba para la prueba se prepararon el día de la administración. Para cada grupo, una cantidad apropiada del artículo de prueba se pesa y un volumen apropiado de cualquiera de agua destilada. Todos los animales se ayunaron durante la noche antes de dosis por aproximadamente cuatro horas posterior a la dosis. Dosis individuales se calcularon con base en pesos corporales tomados el día de administración de la dosis. La dosis oral se administra por intubación nasogástrica . Antes de retirar el tubo de suministro, el tubo se lava por arrastre con aproximadamente 5 mi de agua. Para análisis de hematología, se recolecta sangre (aproximadamente 0.5 mi) de cada predosis de animal (Día-7), predosis (Día-3), y a 8, 16, 24, 32 y 48 horas posteriores a dosis. Las pruebas de hematología de sangre entera se realizaron utilizando las muestras frescas obtenidas el día de la recolección . Como se muestra en la Figura 6, una sola dosis oral El compuesto tuvo un efecto significante en los conteos de linfocitos y glóbulos rojos de los monos cuando se miden 32 hrs. Después de dosis. Todas las publicaciones, patentes y solicitudes de patente citadas aquí se incorporan por referencia en su totalidad.

Claims

REIVI DICACIONES compuesto de la fórmula o su sal farmacéuticamente aceptable, en donde: Z es alquilo opcionalmente substituido; RX es ORiA, NHOH, hidrógeno, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R2 es OR2A, C(0)OR2A, hidrógeno, halógeno, nitrilo, u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alqilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo; R3 es OR3A, N(R3A)2r NHC(0)R3A, NHS02R3A, O hidrógeno; y cada R3A es independientemente hidrógeno u opcionalmente substituido alquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo, heteroalquilo, heterociclo, alquilheterociclo, o heterocicloalquilo.
2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque Z es alquilo opcionalmente substituido con una o más porciones hidroxilo o acetato .
3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque Ri es alquilo inferior opcionalmente substituido.
4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R2 es hidrógeno.
5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R3 es 0R3A.
6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R3 es NHC(0)R3A.
7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R3 es NHSC>2R3A-
8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, 6 ó 7, caracterizado porque R3A es hidrógeno o alquilo inferior opcionalmente substituido.
9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es de la fórmula: en donde: R6 es 0R6A o OC(0)R6A; R7 es 0R7A o OC(0)R7A; R8 es 0R8A o OC(0)R8A; R9 es hidrógeno, CH2OR9A, CH2OC (0) R9A; y cada uno de R6Br 7B, SB y R9B independientemente es hidrógeno o alquilo inferior.
10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque es de la fórmula:
11. El compuesto de conformidad con reivindicación 9, caracterizado porque es de la fórmula:
12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque es de la fórmula:
13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque Ri es alquilo inferior opcionalmente substituido.
14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque R3 es OR3A.
15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R3 es N(R3A)2 o NHC (O) R3A.
16. El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque R3 es NHS02R3A.
17. El compuesto de conformidad con la reivindicación 14, 15 ó 16, caracterizado porque R3A es hidrógeno o alquilo inferior opcionalmente substituido.
18. Un compuesto de la fórmula: o su sal farmacéuticamente aceptable, en donde: Ri es alquilo inferior; R3 es hidrógeno, OR3A, NHC(0)R3A, NHS02R3A; R9 es hidrógeno o CH2OH; y cada R3A es independientemente hidrógeno o alquilo inferior.
19. El compuesto de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque es de la fórmula:
20. El compuesto de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque R3 es OR3A.
21. El compuesto de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque R3A es hidrógeno.
22. Un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque el compuesto es: l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3, -tetrahidroxibutil) -1H-imidazol-2-il ) -etanona oxima; (E)-l-(4-( (lR,2S,3R)-l,2,3, 4-tetrahidroxibutil) -1H-imidazol-2-il ) -etanona oxima; (Z) -1- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il ) -etanona oxima; l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3, 4-tetrahidroxibutil) -1H-imidazol-2-il ) etanona O-metil oxima; (E) -i- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, -tetrahidroxibutil) -1H-imidazol-2-il ) etanona O-metil oxima; (Z) -1- (4 - ( (1R,2S,3R)-1,2,3, 4-tetrahidroxibutil) -1H-imidazol-2-il )) etanona O-metil oxima; 1- ( 5 -metil- 4- ((1R,2S,3R)-1,2,3, 4 -tetrahidroxibut en ilo) -lH-imidazol-2-il ) etanona; (lR,2S,3R)-l-(2- (1-hidrazonoetil) -lH-imidazol-4-il ) butano- 1 , 2,3, 4-tetraol ; N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3, -tetrahidroxibutil) -1H-imidazol-2-il ) etiliden) acetohidrazida; 4-metil- '-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3,4-tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) bencensulfonohidrazida ; (E) -4-metil-N' - (1- (4- ( ( IR, 2S, 3R) -1 , 2 , 3, 4- tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il) etiliden) bencensulfonohidrazida ; (Z) -4-metil-N' - (1- (4- ( ( IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4-tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) bencensulfonohidrazida ; ?' - (1- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroxibutil ) - 1H-imidazol-2-il ) etiliden ) benzohidrazida ; etil 2- (1- (4- ( ( IR, 2S, 3R) -1, 2,3,4-tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) hidrazincarboxilato; (E) -etilo 2- (1- (4- ( ( IR, 2S , 3R) - 1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden ) hidrazincarboxilato; (Z) -etil 2- (1- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) hidrazincarboxilato; N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2, 3 , 4 -tet rahidroxibutil ) -1H-imidazol-2-il ) etiliden) nicotinohidrazida; (E) -N' - (1- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) nicotinohidrazida ; (Z) -?'- (1- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4-tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) nicotinohidrazida ; 3-cloro-N' - (1- (4- ( (1R,2S,3R)-1,2,3,4-tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) benzohidrazida; 4- fluoro-N'- (1- (4- ( ( IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) benzohidrazida; (E) -4-fluoro-N' - (1- (4- ( ( IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden ) benzohidrazida ; (Z) -4-fluoro-N' - (1- (4- ( ( 1R, 2S, 3R) -1 , 2 , 3, 4-tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) benzohidrazida; 6-amino-N' - (1- (4- ( ( IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il) etiliden) nicotinohidrazida ; (E) -6-amino-N' - (1- (4-((lR,2S,3R)-l,2,3,4-tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il) etiliden) nicotinohidrazida; (Z) -6-amino-N' - (1- (4- ( ( IR, 2S , 3R) -1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il) etiliden) nicotinohidrazida ; ?' - (1- (4- ( (IR, 2S, 3R) -1, 2, 3, 4 -tetrahidroxibutil ) -1H-imidazol-2-il ) etiliden) isonicotinohidrazida ; (E)-N'-(l-(4-( (1R,2S,3R)-1,2,3,4-tet rahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il) etiliden) isonicotinohidrazida ; (Z) - ' - (1- (4- ( ( IR, 2S,3R)-1, 2,3,4-tetrahidroxibut il ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) isonicotinohidrazida; N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3, -tetrahidroxibutil ) -1H-imidazol-2-il ) etiliden) bifenilo-3-carbohidrazida ; (E) -N ' - (1- (4- ( (IR, 2S , 3R) -1 , 2, 3, 4 -tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) bifenilo-3-carbohidrazida ; (Z)-N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3,4-tetrahidroxibutil) -lH-imidazol-2-il ) etiliden) bifenilo-3-carbohidrazida; o N-hidroxi-4- ((1R,2S,3R)-1,2,3, 4 -tetrahidroxibutil ) -lH-imidazol-2-carboxamida .
23. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1, 18 ó 22 y un excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
24. El uso de un compuesto de las reivindicaciones 1, 18 ó 22 para la fabricación de un medicamento para supresión de una inmuno respuesta en un paciente.
25. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, 18 ó 22 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de artritis reumatoide, asma, dermatitis atópica, enfermedad de Behcet, enfermedad de injerto-contra-anfitrión, lupus eritematosos , esclerosis múltiple, polinosis, soriasis, rechazo al trasplante o uveitis .