MX2008007379A - Nucleosidos antivirales - Google Patents

Abstract

Los compuestos que tienen la fórmula 1 en donde W es, como se define en el presente documento, inhibidor de polimerasa NS5b del virus de Hepatitis C. También se describen composiciones y métodos para inhibir la réplica de hepatitis, y los procesos para la elaboración de los compuestos de fórmula 1.

Description

UCLEÓSIDOS ANTIVIRALES CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona nucleósidos acilados los cuales son profármacos de un inhibidor del Virus de Hepatitis C (HCV, por sus siglas en inglés) de polimerasa viral RNA dependiente de RNA. Estos compuestos, cuando son administrados vía oral, son absorbidos con facilidad desde el tracto GI y revierte, de manera eficaz, el nucleósido generador en la sangre. Estos profármacos son inhibidores de la replicación viral RNA dependiente de RNA y son útiles como inhibidores de polimerasa NS5B del HCV, como inhibidores de replicación del HCV, y para el tratamiento de la infección de Hepatitis C en mamíferos. La invención se relaciona con los profármacos de nucleósidos los cuales son inhibidores de la replicación del HCV. En particular, la invención tiene que ver con el uso de compuestos de nucleósidos de pirimidina acilada los cuales proporcionan la absorción mejorada de fármacos cuando el nucleósido es administrado de manera oral.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El virus de Hepatitis C es un problema de salud importante y la causa que conduce a la enfermedad crónica del hígado en todo el mundo. (Boyer, N. et al. J. Hepatol. 2000 32:98-112). Los pacientes infectados con el HCV están en riesgo de desarrollar cirrosis hepática y carcinoma hepatocelular subsecuente y, por lo tanto, el HCV es la indicación más importante para el trasplante de hígado. De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud, existen más de 200 millones de individuos infectados en todo el mundo con, por lo menos, tres o cuatro millones de personas que están siendo infectadas cada año. Una vez infectados, aproximadamente el 20% borran el virus; sin embargo, el resto puede lidiar con el HCV toda su vida. El diez o veinte por ciento de los individuos infectados de, manera crónica finalmente desarrollan cirrosis que destruye el hígado o cáncer. La enfermedad viral es transmitida de manera parental mediante sangre contaminada y productos sanguíneos, agujas contaminadas, o de forma sexual y verticalmente de madres infectadas o madres portadoras a sus hijos. Los tratamientos actuales para la infección de HCV, los cuales se restringen a inmunoterapia con interferón- a recombinante solo o en combinación con la ribavirina análoga de nucleósido, son de beneficio clínico limitado al tiempo que la resistencia se desarrolla con rapidez. Existe una urgente necesidad de agentes terapéuticos mejorados que combatan, de manera eficaz, la infección crónica del HCV. El HCV ha sido clasificado como un elemento de la familia del virus Flaviviridae que incluye los géneros flaviviruses, pestiviruses y hepaciviruses los cuales incluyen los virases de hepatitis C (Rice, C.M., Flaviviridae : The virases and their replication, en: Fields Virology, Editores: Fields, B.N., Knipe, D.M., y Howley, P.M., Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia , Pa . , Capítulos 30, 931-959, 1996) . El HCV es un virus envuelto que contiene un genoma RNA de una sola fila y de sentido positivo de aproximadamente 9.4 k . El genoma viral consiste de una región no convertida de 5' (UTR, por sus siglas en inglés) , un marco de lectura abierta largo (ORF, por sus siglas en inglés) que codifica un precursor de poli proteína de aproximadamente 3011 aminoácidos, y una UTR corta de 3'. La UTR de 5' es la parte más altamente conservada del genoma del HCV y es importante para la iniciación y control de la conversión de poli proteínas. El análisis genético del HCV ha identificado seis genotipos principales que muestran un >30% de divergencia en su secuencia de DNA. Cada genotipo contiene una serie de subtipos relacionados de forma más cercana los cuales muestran un 20-25% de divergencia en secuencias de nucleótidos (Simmonds, P. 2004 J. Gen . Virol .85 : 3173-88 ) . Se han distinguido más de 30 subtipos. En los Estados Unidos aproximadamente el 70% de los individuos infectados tienen la infección Tipo la y Ib. El Tipo Ib es el subtipo más prevalente en Asia. (X. Forns y J.Bukh, Clinics in Liver Disease 1999 3:693-716; J. Bukh et al., Semin. Liv. Dis. 1995 15:41-63). Desafortunadamente, las infecciones Tipo 1 son más resistentes a la terapia que los genotipos ya sean 2 o 3 (N.N.Zein, Clin. Microbiol. Rev. , 2000 13:223-235). La organización genética y procesamiento de poli proteina de la porción de proteina no estructural del ORF de pestivirus y hepaci-virus es muy similar. Estos virus de RNA de una sola fila positivos poseen un ORF grande sencillo que codifica todas las proteínas virales necesarias para la replicacion del virus. Estas proteínas son expresadas como una poli proteína que es procesada co y post conversión por proteinasas codificadas de virus y celulares para producir las proteínas virales maduras. Las proteínas virales responsables de la replicacion del genoma RNA viral están ubicadas aproximadamente dentro del carboxi-terminal . Dos tercios del ORF son considerados proteínas no estructurales (NS) . Para los pestivirus y hepaci-virus, las proteínas no estructurales maduras (NS) , en orden secuencial a partir de los términos amino de la región de codificación de proteínas no estructurales al carboxi-término del ORF, consisten de p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A y NS5B. Las proteínas NS de pestivirus y hepaci-virus comparten los dominios de secuencia que son característicos de las funciones de proteina específicos. Por ejemplo, las proteínas NS3 de virus en ambos grupos poseen características de motivos de secuencia de aminoácidos de proteinasas de serina y de helicasas (Gorbalenya et al. Nature 1988 333:22; Bazan y Fletterick Virology 1989 171:637-639; Gorbalenya et al. Nucleic Acid Res. 1989 17.3889-3897). De manera similar, las proteínas NS5B de pestivirus y hepaci-virus tienen las características de motivos de polimerasas RNA dirigidas de RNA (Koonin, E.V. y Dolja, V.V. Crit. Rev. Biochem. Molec. Biol. 1993 28:375-430) . Los papeles y funciones reales de las proteínas NS de pestivirus y hepaci-virus en el ciclo de vida de los virus son directamente análogos. En ambos casos, la proteinasa de serina NS3 es responsable de todo el procesamiento proteolítico de la línea de salida de los precursores de poli proteínas de su posición en el ORF (Wiskerchen y Collett Virology 1991 184:341-350; Bartenschlager et al. J. Virol. 1993 67:3835-3844; Eckart et al. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1993 192:399-406; Grakoui et al. J. Virol. 1993 67:2832-2843; Grakoui et al. Proc. Nati. Acad. Sci. USA 1993 90:10583-10587; Ilijikata et al. J. Virol. 1993 67:4665-4675; Tome et al. J. Virol. 1993 67:4017-4026). La proteína NS4A, en ambos casos, actúa como un co-factor con la proteasa de serina NS3 (Bartenschlager et al. J. Virol. 1994 68:5045-5055; Failla et al. J. Virol. 1994 68:3753-3760; Xu et al. J. Virol. 1997 71:53 12-5322). La proteína NS3 de ambos virus también funciona como una helicasa (Kim et al. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1995 215:160-166; Jin y Peterson Arch. Biochem. Biophys. 1995, 323:47-53; Warrener y Collett J. Virol. 1995 69:1720-1726). Finalmente, las proteínas NS5B de pestivirus y hepaci-virus tienen la actividad de polimerasas de RNA dirigidas de RNA predichas (Behrens et al. E BO 1996 15:12-22; Lechmann et al. J. Virol. 1997 71:8416-8428; Yuan et al. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1997 232:231-235; Hagedorn, PCT O 97/12033; Zhong et al. J. Virol. 1998 72 : 9365-9369) . En la actualidad, existe un número limitado de terapias aprobadas disponibles hoy en día para el tratamiento de la infección del HCV. Se han revisado los enfoques terapéuticos nuevos y existentes para tratar el HCV y la inhibición de polimerasa NS5B del HCV: R.G. Gish, Sem. Liver. Dis . , 1999 19:5; Di Besceglie, A.M. y Bacon, B.R., Scientific American, octubre: 1999 80-85; G. Lake-Bakaar, Terapia Actual y Futura para la Enfermedad de Hígado por Virus de Hepatitis C Crónica, Curr. Drug Targ. Infect Dis. 2003 3 (3) : 247-253; P. Hoffmann et al., Patentes recientes sobre terapia experimental para la infección del virus de hepatitis C (1999-2002), Exp. Opin. Ther. Patents 2003 13 (11) : 1707-1723; F.F.Poordad et al. Desarrollos en la terapia de Hepatitis C durante 2000-2002, Exp. Opin. Emerging Drugs 2003 8(l):9-25; M.P.Walker et al., Candidatos Prometedores para el tratamiento de hepatitis C crónica, Exp. Opin. Investig. Drugs 2003 12 ( 8 ) : 1269-1280 ; S.-L.Tan et al., Terapéuticos de Hepatitis C: Condición Actual y Estrategias Emergentes, Nature Rev. Drug Discov. 2002 1:867-881; R. De Francesco et al. Enfoque de una nueva era para la terapia del virus de hepatitis C; inhibidores de la proteasa de serina NS3-4A y la polimerasa RNA dependiente de RNA NS5B, Antiviral Res. 2003 58:1-16; Q.M.Wang et al. Proteínas codificadas del virus de Hepatitis C: objetivos para la terapia antiviral, Drugs of the Future 2000 25 ( 9) : 933-8-94 ; J.A.Wu y Z.Hong, Polimerasa RNA Dependiente de NS5B Objetivo para la Quimioterapia Anti HCV Cur. Drug Targ. -Inf. Dis . 2003 3:207-219. Las revisiones se refieren a compuestos en la actualidad en diversas etapas del proceso de desarrollo. La terapia en combinación con dos o tres agentes dirigidos al mismo o a diferentes objetivos se ha convertido en una terapia estándar para evitar o retardar el desarrollo de deformaciones resistentes de un virus, y los compuestos descritos en las revisiones anteriores podrían ser utilizados en terapia en combinación con compuestos de la presente invención y estas revisiones son, por incorporadas como referencia en su totalidad. la: = C(=0)N1I2 La ribavirina (la; 1- ( ( 2R, 3R, 4S , 5R) -3 , 4- Dihidroxi-5-hidroximetilo-tetrahidro-furano-2-ilo) -1H-[ 1, 2 , 4 ] triazole-3-amida de ácido carboxilico; VIRAZOLE®) es un análogo nucleósido antivirál de espectro amplio de inducción de no interferona, sintético. La ribavirina tiene actividad in vitro contra diversos virus de DNA y RNA que incluyen Fiaviviridae (Gary L. Davis, Gastroenterology 2000 118 : S104-S114 ) . En monoterapia la ribavirina reduce los niveles de aminotransferasa en suero a lo normal en el 40% de los pacientes; sin embargo, no disminuye los niveles de suero de HCV-RNA. La ribavirina también exhibe una toxicidad significativa y se conoce que induce a la anemia. La ribavirina es un inhibidor de inosina monofosfato hidrogenasa. La ribavirina no es aprobada en monoterapia contra el HCV; sin embargo, el compuesto es aprobado en terapia en combinación con interferona a-2a e interferona a -2b. La viramidina es un profármaco convertido a la en hepatocitos . Las interferonas (IFNs) han estado disponibles para el tratamiento de hepatitis crónica durante aproximadamente una década. Las IFNs son glicoproteinas producidas por células inmunes en respuesta a la infección viral. Se reconocen dos tipos distintos de interferonas: El Tipo 1 incluye diversas alfas interferonas y un interferón ß , tipo 2 incluye el interferón ? . El interferón tipo 1 es producido principalmente por células infectadas y protege las células vecinas de la infección de novo. Las IFNs inhiben la replicación viral de muchos virus, que incluyen HCV, y cuando son utilizadas como el tratamiento único para la infección de hepatitis C, la IFN suprime el HCV-RNA en suero para niveles no detectables. De manera adicional, la IFN normaliza los niveles de aminotransferasa en suero. Desafortunadamente, los efectos de la IFN son temporales. La cesación de la terapia resulta en un 70% de tasa de reincidencia y sólo el 10-15% exhibe una respuesta virológica sostenida con niveles de alanina transferasa en suero. (L . -B . Davis , supra ) . Una limitación de la terapia IFN temprana fue la evacuación rápida de la proteina de la sangre. La derivatización química de IFN con polietilenglicol (PEG) ha resultado en proteínas con propiedades farmacoquinéticas mejoradas de manera substancial. PEGASYS® es una interferona conjugada a -2a y un PEG mono-metoxi ramificado 40 kD y PEG-INTRON® es un conjugado de interferona a -2b y un PEG mono-metoxi 12 kD. (B.A.Luxon et al., Clin. Therap.2000 24 ( 9 ) : 13631383 ; A.Kozlowski y J. .Harris, J. Control. Reléase, 2001 72:217-224). La interferona -2a y la interferona «-2b son aprobadas en la actualidad como monoterapia para el tratamiento del HCV . ROFERON-A® (Roche) es la forma recombinante de la interferona a-2a. PEGASYS® (Roche) es la forma pegilada (es decir, glicol de polietileno modificado) de interferona a-2a. INTRON-A® (Schering Corporation) es la forma recombinante de Interferona a-2b, y PEG-INTRON® (Schering Corporation) es la forma pegilada de interferona a-2b. Otras formas de interferona a , asi como de interferona ß , ?, t , y ? están, en la actualidad, en desarrollo clínico para el tratamiento del HCV. Por ejemplo, están en desarrollo INFERGEN® (interferona alfacona-1) por Inter une, OMNIFERON® (interferona natural) por Viragen, ALBUFERON® por Human Genoma Sciences (Ciencias de Genoma Humano) , REBIF® (interferona ß-la) por Ares-Serono, Omega Inferieron por Biomedicina, Oral Inferieron Alpha por Amarillo Biosciences, e interferona y, interferona t e interferona ?-lb por InterMune.

La terapia de combinación del HCV con ribavirina e interferona a en realidad representan la terapia óptima. La combinación de ribavirina y PEG-IFN (infra) resulta en una respuesta viral sostenida en el 54-56% de los pacientes. El SVR se aproxima al 80% para el tipo del HCV 2 y 3. (Walter, supra) . Desafortunadamente, la combinación también produce efectos secundarios los cuales poseen retos clínicos. La depresión, los síntomas de gripe y las reacciones de piel están relacionados con la IFN-a subcutánea, y la anemia hemolítica está relacionada con el tratamiento sustentado con ribavirina. Otros compuestos macromoleculares actualmente en desarrollo pre-clínico o clínico para el tratamiento de la infección del virus de hepatitis C incluyen: Interleukin-10 por Schering-Plough, IP-SOl por Intemeuron, Merimebodib (VX-497) por Vértex, HEPTAZYME® por RPI, IDN-6556 por Idun Pharma., XTL-002 por XTL . , HCV/MFS9 por Chiron, CIVACIR® (Globulina Inmune de Hepatitis C) por NABI, ZADAXIN® (timosina a-1) por SciClone, timosina más interferona pegilada por SciClone, CEPLENE®; una vacuna terapéutica dirigida a E2 por Innogenetics , vacuna terapéutica por Intercell, vacuna terapéutica por Epimmune/Genencor, una vacuna terapéutica por Merix, una vacuna terapéutica, Chron-VacC, por Tripep. Otros enfoques macromoleculares incluyen ribozimas dirigidas al RNA del HCV . Las ribozimas son moléculas cortas que ocurren de manera natural con actividad endonucleasa que cataliza el desdoblamiento especifico de la secuencia de RNA. Un enfoque alterno es el uso de la unión de oligonucleótidos antisensibles al RNA y estimulan el desdoblamiento mediado de RNaseH. En la actualidad, se ha identificado un número de objetivos moleculares potenciales para el desarrollo de fármacos como terapéuticos anti-HCV que incluyen, mas no están limitados a, la autoproteasa NS2-NS3, la proteasa N3, la helicasa N3 y la polimerasa NS5B. La polimerasa RNA dependiente de RNA es absolutamente esencial para la replicación del genoma RNA de sentido positivo y de una sola fila, y esta enzima ha despertado un interés significativo entre los químicos medicinales. Los inhibidores de nucleósidos de polimerasa NS5B pueden actuar, ya sea, como un substrato no natural que resulta en la terminación de cadena o como un inhibidor comparativo el cual compite con la unión de nucleótidos a la polimerasa. Para funcionar como un terminador de cadena, el análogo nucleósido debe empezar a ser la célula y ser convertida in vivo a un trifosfato para competir por el sitio de unión de nucleótido de polimerasa. Esta conversión al trifosfato es mediada, por lo común, por quinasas celulares las cuales imparten requisitos estructurales adicionales en un inhibidor de polimerasa de nucleósido potencial. Desafortunadamente, esto limita la dirección de la evaluación de nucleósidos como inhibidores de la replicación del HCV a las pruebas basadas en células capaces de la fosforilación in situ.

B= adenina, timidina, uracil, citidina, guanina e hipoxantina En WO 01 90121 publicada el 29 de noviembre, 2001, J.-P. Sommadossi y P.Lacolla describen y ejemplifica la actividad de polimerasa anti-HCV de 1' -alquilo- y 2'-nucleósidos alquilo de las fórmulas 2 y 3. En WO 01/92282, publicada el 6 de diciembre, 2001, J.-P. Sommadossi y P.Lacolla describen y ejemplifican el tratamiento de Flaviviruses y Pestiviruses con 1' -alquilo- y 2'-nucleósidos alquilo de las fórmulas 2 y 3. En WO 03/026675 publicada el 3 de abril, 2003, G.Gosselin describe 4'-nucleósidos alquilo 4 para tratar Flaviviruses y Pestiviruses . En WO 2004003000 publicada el 8 de enero, 2004, J.-P. Sommadossi et al. describe profármacos 2'- y 3' de 1'-,2'-,3'- y 4'- que sustituyen los nucleósidos ß -D y ß-L. En WO 2004/002422 publicada el 8 de enero, 2004, 2'-C-metilo-3 ' -O-citidina ribofuransilo de éster de valina para el tratamiento de infecciones de Flaviviridae . Idenix ha reportado experimentos clínicos para un compuesto NM283 relacionado, el cual se cree que es éster de valina 5 del análogo de citidina 2 (B=citosina) . En WO 2004/002999 publicada el 8 de enero, 2004, J.-P. Sommadossi et al. describe una serie de profármacos 2? 3' de nucleósidos ramificados l',2',3', o 4' para el tratamiento de infecciones de flavivirus que incluyen infecciones del HCV. En WO2004/046331 publicada el 3 de junio, 2004, J . -P . Sommadossi et al. describe nucleósidos ramificados 2' y la mutación de Flaviviridae . En WO03/026589 publicada el 3 de abril, 2003 G.Gosselin et al. describe métodos para el tratamiento del virus de hepatitis C utilizando nucleósidos modificados 4'. En WO2005009418 publicada el 3 de febrero, 2005, R.Storer et al. describe los análogos de nucleósidos purina para el tratamiento de enfermedades causadas por Flaviviridae que incluyen HCV. Otras solicitudes de patente describen el uso de ciertos análogos de nucleósidos para tratar la infección del virus de hepatitis C. En WO 01/32153 publicada el 10 de mayo, 2001, R.Storer describe los derivados de nucleósidos para tratar enfermedades virales. En WO 01/60315 publicada el 23 de agosto, 2001, H.Ismaili et al., describe los métodos de tratamiento o prevención de infecciones de Flavivirus con compuestos de nucleósidos. En WO 02/18404 publicada el 7 de marzo, 2002, R.Devos et al. describe nucleótidos sustituidos 4' para tratar el virus del HCV. En WO 01/79246 publicada el 25 de octubre, 2001, K.A.Watanabe describe compuestos de nucleósidos de hidroximetilo 2'- o 3'- para el tratamiento de enfermedades virales. En WO 02/32920 publicada el 25 de abril, 2002 y en WO 02/48 165 publicado el 20 de junio, 2002 L.Stuyver et al. describe los compuestos de nucleósidos para el tratamiento de enfermedades virales. 6a Wn WO 03/105770 publicada el 24 de diciembre, 2003, B.Bhat et al. describe una serie de derivados de nucleósidos carbociclicos que son útiles para el tratamiento de infecciones del HCV. En WO 2004/007512 publicada el 22 de enero, 2003 B.Bhat et al. describe compuestos de nucleósidos que inhiben la polimerasa viral de RNA dependiente de RNA. Los nucleósidos descritos en esta publicación son principalmente nucleósidos sustituidos 2'-metilo-2'-hidroxi. En WO 2002/057425 publicada el 25 de julio, 2002 S.S.Carroll et al. describe los derivados de nucleósidos los cuales son inhibidores de polimerasa viral ' dependiente de RNA y métodos para tratar la infección del HCV. En WO02/057287 publicada el 25 de julio de 2002, S.S.Carroll et al. describe los derivados relacionados 2a- metilo y 2 ß -metilriboso en donde la base es un radical 6 de 7H-pirrolo [ 2 , 3-d] pirimidina opcionalmente sustituida. La misma solicitud describe un ejemplo de un nucleósido 2>ß- metilo. S.S.Carroll et al . (J. Biol . Chem .2003 278 ( 14 ): 11979- 11984) describe la inhibición de la polimerasa del HCV por 2 '-O-metilcitidina (6a) . En WO2004/009020 publicada el 29 de enero, 2004, D.B.Olsen et al. describe una serie de derivados de tionucleósidos como inhibidores de polimerasa viral de RNA dependiente de RNA. La Publicación PCT Número W099/43691 para Emory University, titulada "2'- Fluoronucleosides" describe el uso de ciertos 2 ' -fluoronucleósidos para tratar el HCV. La Patente estadounidense Número 6,348,587 para Emory University titulada "2'- fluoronucleosides" describe una familia de 2'- Fluoronucleosidos útiles para el tratamiento de hepatitis B, HCV, VIH y proliferación celular anormal. Ambas configuraciones del sustituyente del 2'-fluoro están descritas.

Eldrup et al. (Sesión Oral V, Virus de Hepatitis C, Flaviviridae ; Décimo sexta Conferencia Internacional sobre Investigación Antiviral (27 de abril, 2003, Savannah, Ga . ) ) describió la relación de la actividad estructural de 2 ' -nucleósidos modificados para la inhibición del HCV. Bath et al. (Sesión Oral V, Virus de Hepatitis C, Flaviviridae; Décimo sexta Conferencia Internacional sobre Investigación Antiviral (27 de abril, 2003, Savannah, Ga . ) ; p A75) describe las síntesis y las propiedades farmacoquinéticas de los análogos de nucleósidos como posibles inhibidores de la replicación de HCV RNA. Los autores reportan que los 2 ' -nucleósidos modificados demuestran actividad inhibidora potente en pruebas de réplicas basadas en células. Olsen et al. (Sesión Oral V, Virus de Hepatitis C, Flaviviridae; Décimo sexta Conferencia Internacional sobre Investigación Antiviral (27 de abril, 2003, Savannah, Ga . ) p A76) también describió los efectos de los 2'-nucleósidos modificados sobre la replicación de HCV RNA. Los inhibidores alostéricos sin nucleósidos de transcriptasa inversa de VIH han probado terapéuticos efectivos solos y en combinación con inhibidores de nucleósidos y con los inhibidores de proteasa. Diversas clases de inhibidores NS5B del HCV sin nucleósidos han sido descritos y están, en la actualidad, en diversas etapas de desarrollo que incluyen: benzimidazoles , (H . Hashimoto et al. WO 01/47833, H . Hashimoto et al. WO 03/000254, P.L.Beaulieu et al. WO 03/020240 A2; P.L.Beaulieu et al. US6,448,281 Bl; P.L.Beaulieu et al. WO 03/007945 Al); índoles, (P.L. Beaulieu et al. WO 03/0010141 A2 ) ; benzotiadiazinas , por ejemplo, 7, (D.Dhanak et al. WO 01/85172 Al; D.Dhanak et al. WO 03/037262 A2 ; K.J.Duffy et al. WO03/099801 Al, D. Chai et al. WO 2004052312, D.Chai et al. WO2004052313, D.Chai et al. WO02/098424, J.K.Pratt et al. WO 2004/041818 Al; J.K.Pratt et al. WO 2004/087577 Al), tiofenos, por ejemplo, 8,(C.K.Chan et al. WO 02/100851); X benzotiofenos (D.C.Young y T.R.Bailey WO 00/18231); ß-ketopiruvates (S.Attamura et al. US6,492,423 Bl, A.Attamura et al. WO 00/06529); pirimidinas (C.Gardelli et al. WO 02/06246 Al); pirimidinedionas (T.R.Bailey y D.C.Young WO 00/13708); triazinas (K.-H.Chung et al. WO 02/079187 Al); derivados de rodanina (T.R.Bailey y D.C.Young WO 00/10573, J.C.Jean et al. WO 01/77091 A2 ) ; 2 , 4-dioxipiranas (R.A.Love et al. EP 256628 A2 ) ; derivados de fenilalanina (M.Wang et al.J.Biol.Chem. 2003 278:2489-2495). La proteasa NS3 ha surgido como un objetivo principal para el descubrimiento de una nueva terapia anti-HCV. En WO 98/22496 publicada el 28 de mayo, 1998. M.R.Attwood et al. ha descrito los inhibidores en sitio activo con base en mecanismos de la proteasa (M.R.Attwood et al., Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999 10:259-273; M.R.Attwood et al., Preparación y uso de derivados de aminoácidos como agentes anti-virales , Publicación de Patente alemana DE 19914474) . En W098/17679 publicada el 30 de abril, 1998, R.D.Tung et al. describió los inhibidores de péptidos basados en mecanismos sobre la proteasa NS3. En WO99/07734 publicada el 18 de febrero, 1999 y en WO00/09543 publicada el 9 de agosto, 1999, M Llinas-Brunet et al. describe los inhibidores de péptidos de la proteasa. En WO00/59929 publicada el 12 de octubre, 2000, Y . S . Tsantrizos et al. describe los tripéptidos macrociclicos los cuales son inhibidores potentes de la proteasa NS3 del HCV. Una serie de patentes relacionadas con Boehringer-Ingleheim describen los inhibidores de proteasa relacionada y han conducido a la identificación de los derivados de tripéptidos BILN 2061 (M . Llinas-Brunet et al. Biorg.Med.Chem.Lett.2000 10 (20 ) : 2267-70 ; J.Med Chem.2004 47 ( 26) : 6584-94 ; J.Med. Chem.2004 47 ( 7 ): 1605-1608 ; Angew.Chem. Int. Ed. Eng.2003 42 ( 12 ): 1356-60 ) .

Otros inhibidores de tripéptidos identificados por Bristol-Myers Squibb han sido descritos, ínter alia, en WO03/099274 publicada el 4 de diciembre, 2003, en WO2004/032827 publicada el 22 de abril, 2004, en WO03/053349 publicada el 3 de julio, 2003, en WO2005/046712 publicada el 26 de mayo, 2005 y en WO2005/051410 publicada el 9 de junio, 2005. En O2004/072234 publicada el 26 de agosto, 2004 y en WO2004/093798 publicada el 4 de noviembre, 2004 los inhibidores de proteasa de tripéptidos adicionales fueron descritos por Enanta Pharmaceuticals . En WO2005/037214 publicada el 28 de abril, 2005 L.M.Blatt et al. describe todavía otros derivados de péptidos que inhiben la proteasa NS3 del HCV. En WO2005/030796 publicada el 7 de abril, 2005, S . Venkatraman et al. describe los inhibidores macrocíclicos de la proteasa de serina NS3 del HCV. En O 2005/058821 publicada el 30 de junio, 2005, F.Velazquez et al. describe los inhibidores de la proteasa de serina NS3/NS4a del HCV. En WO02/48172 publicada el 20 de junio, 2002, Z . Zhu describe los péptidos de diaril como inhibidores de proteasa NS3. En WO02/08187 y en WO02/08256 ambas publicadas el 31 de enero de 2002, A.Saksena et al. describe los inhibidores de péptidos de la proteasa NS3 del HCV. En WO02/08251 publicada el 31 de enero, 2002 M.Lim-Wilby et al. describe los inhibidores de péptidos de la proteasa NS3. En US 6,004,933 publicada el 21 de diciembre, 1999, L.W.Spruce et al. describe los derivados de péptidos heterociclicos los cuales inhiben las proteasas cisteinas que incluyen la endopeptidasa del HCV. Los inhibidores de proteasa NS3 basadas en no sustratos tales como los derivados 2 , 4 , 6-trihidroxi-3-nitro-benzamida (Sudo K. et al., BBRC 1997 238:643-647; Sudo K. et al. Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1998 9:186), que incluyen RD3-4082 y RD3-4078, el anterior sustituido en la amida con una cadena de carbono 14 y el último procesamiento un grupo de para-fenoxifenilo también se está investigando. El SCH 68631, un fenantrenequinona , es un inhibidor de proteasa del HCV (Chu M. et al. Tetrahedron Lett. 1996 37:7229-7232) . En otro ejemplo por los mismos autores, el SCH 351633, aislado de los hongos Penicillium gríseofulvum, fue identificado como un inhibidor de proteasa (Chu M. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999 9:1949-1952). La potencia nanomolar contra la encima de proteasa NS3 HCV ha sido lograda mediante el diseño de inhibidores selectivos con base en la macromolécula eglin c. Eglin c, aislada de sanguijuelas, es un inhibidor potente de diversas proteasas de serina tales como las proteasas S.griseus A y B, a -quimotripsina, quimasa, subtisilina (Qasim .A. et al., Biochemestry 1997 36:1598-1607) .

Los derivados de tiazolidina, los cuales muestran inhibición relevante en una prueba HPLC de fase-inversa con una proteina de fusión NS3/4A y substrato NS5A/5B (Sudo K. et al. Antiviral Research 1996 32:9-18), compuestos en particular de RD-1-6250, que poseen una porción de cinamoil fusionada sustituida con una cadena larga de alquil, RD4 6205 y RD4 6193. Las tiazolidinas y benzanilidas fueron identificadas por N.Kakiuchi et al. en FEBS Let. 1998 421:217-220 y N.Takeshita et al . Anal . Biochem . 1997 247:242-246. Las imidazolidinonas como inhibidores de proteasa de serina NS3 de HCV se describen en WO 02/08198 para Schering Corporation publicada el 31 de enero, 2002 y en WO 02/48157 para Bristol ayers Squibb publicada el 20 de junio, 2002. En WO02/48116 publicada el 20 de junio, 2002 P.Glunz et al. describe los inhibidores de pirimidinona de proteasa NS3. Otros objetivos enzimáticos para el anti-HCV incluyen el sitio IRES de HCV (Sitio de Entrada del Ribosoma Interno) y la helicasa de HCV. Los inhibidores IRES han sido registrados por Immusol, Rigel Pharmaceuticals (R803) y por Anadys (ANA245 y ANA246) . Vértex ha descrito un inhibidor de helicasa del HCV. La terapia de combinación, la cual puede suprimir las deformaciones mutantes resistentes, se ha convertido en un enfoque bien establecido para la quimioterapia antiviral. Los inhibidores de nucleósidos aqui descritos pueden ser combinados con otros inhibidores de polimerasa del HCV de nucleósidos, inhibidores de polimerasa del HCV sin nucleósidos, e inhibidores de proteasa del HCV. Como otras clases de fármacos del HCV, por ejemplo, inhibidores de entrada viral, inhibidores de helicasa, inhibidores IRES, ribozimas y oligonucleótidos antisensibles que surgen y son desarrollados también serán excelentes candidatos para la terapia de combinación. Los derivados de interferón ya han sido exitosamente combinados con ribavirina e interferonas, y las interferonas modificadas químicamente serán útiles en combinación con los nucleósidos aquí descritos. Los derivados de nucleósidos con frecuencia son anti-virales potentes (por ejemplo, VIH, HCV, Herpes simplex, CMV) y agentes quimioterapéuticos anti-cáncer. Desafortunadamente, su utilidad práctica es, por lo regular, limitada por dos factores. En primer lugar, las propiedades farmacoquinéticas deficientes limitan la absorción del nucleósido del aparato digestivo y la concentración intracelular de los derivados de nucleósidos y, en segundo lugar, las propiedades físicas sub-óptimas restringen las opciones de formulación las cuales pueden ser utilizadas para facilitar la liberación del ingrediente activo.

Albert introdujo el término profármaco para describir un compuesto que carece de actividad biológica intrínseca; sin embargo, es capaz de la transformación metabólica a la substancia del fármaco activo (A. Albert, Selective Toxicity, Chapman y Hall, Londres, 1951) . Los profármacos han sido recientemente revisados (P.Ettmayer et al. J.Med.Chem.2004 47 ( 10 ): 2393-2 04 ; K.Beaumont et al., Curr. Drug Metab. 2003 4:461-485; H.Bundgaard, Design of Prodrugs : Bioreversible derivatives for various functional groups and che ícal entities en Design of Prodrugs, H.Bundgaard (ed) Elsevier Science Publishers, Amsterdam 1985; G.M.Pauletti et al. Adv. DrugDeliv. Rev. 1997 27:235-256; R.J. Jones y N . Bischofberger, Antiviral Res. 1995 27;1-15 y C.R. agner et al . , Med.Res .Rev. 2000 20:417-45). Mientras que la transformación metabólica puede ser catalizada por enzimas específicas, por lo regular hidrolasas, el compuesto activo puede también ser regenerado por procesos químicos no específicos. Los profármacos aceptables farmacéuticamente se refieren a un compuesto que es metabolizado, por ejemplo, hidrolizado u oxidizado, en el huésped para formar el compuesto de la presente invención. La bio-conversión debería evitar los fragmentos de formación con riesgos toxicológicos . Los ejemplos comunes de profármacos incluyen compuestos que han sido biológicamente lábiles que protegen grupos unidos a una porción funcional del compuesto activo. La alquilación, acilación u otra modificación lipofilica del grupo (s) hidroxi en la porción de azúcar ha sido utilizada en el diseño de pronucleótidos . Los pronucleótidos pueden ser hidrolizados o dealquilados in vivo para generar el compuesto activo. Los factores que limitan la bio-disponibilidad oral, con frecuencia, son absorbidos del tracto gastrointestinal y la excreción de primer paso por la pared del aparato digestivo y el hígado. La optimización de la absorción transcelular a través del tracto GI requiere un D(7.4) mayor que cero. La optimización del coeficiente de distribución; sin embargo, no asegura el éxito. El profármaco puede tener que evitar los transportadores de descarga activa en el enterocito. El metabolismo intracelular en el enterocito puede resultar en el transporte pasivo o transporte activo del metabolito mediante las bombas de descarga en el paso del aparato digestivo. El profármaco debe también poder resistir bio-transformaciones no deseables en la sangre antes de alcanzar las células objetivo o receptores. Mientras que los profármacos putativos algunas veces pueden, de manera racional, ser diseñados con base en la funcionalidad química presente en la molécula, la modificación química de un compuesto activo produce una entidad molecular nueva por completo la cual puede exhibir propiedades físicas, químicas y biológicas indeseables ausentes en el compuesto generador. Los requisitos regulatorios para la identificación de metabolitos pueden poseer retos en caso de que múltiples trayectorias conduzcan a una pluralidad de metabolitos. De esta manera, la identificación de profármacos permanece en un ejercicio retador e incierto. Además, la evaluación de las propiedades farmacoquinéticas de profármacos potenciales es un esfuerzo costoso y de reto. Los resultados farmacoquinéticos de modelos animales pueden ser difíciles de extrapolarizar a humanos.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN El objeto de la presente invención es proporcionar nuevos compuestos, métodos y composiciones para el tratamiento de un huésped infectado con el virus de hepatitis C. La presente invención está dirigida a los derivados di-acilo novedosos de 4-amino-l- ( ( 2R, 3R, 4R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetilo-3-metil-tetrahidro-furan-2-ilo) -lH-pirimidina-2-uno (también referido como (2R)2'-deoxi-2-metilo-2-fluoro-citidina) . Los compuestos de la presente invención poseen una estructura de acuerdo con la fórmula I. en donde : R1 es seleccionado a partir del grupo que consiste de alquilo ramificado o sin ramificar C2-5, alquenilo ramificado o sin ramificar C2-5, alquinilo ramificado o sin ramificar C2-5, haloalquilo más bajo C2-5, cicloalquilo C3-6, y alcoxi C2-4; e, hidratos, solvatos y sales de adición de ácidos de éstos. Los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de un trastorno mediado por el HCV. La invención además comprende métodos para el tratamiento del HCV con compuestos de la presente invención y composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos . En una modalidad de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I en donde R1 es como se definió aquí anteriormente. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I en donde R1 es etilo, r¡-propilo, iso-propilo, n-butilo o iso- butilo . En todavía otra modalidad de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I en donde R1 es etilo o iso-propilo. En todavía otra modalidad de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I en donde R1 es iso-propilo y el compuesto es un hidrocloruro o sal de sulfato. En una modalidad adicional de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I en donde R1 es iso-propilo y el compuesto es una sal de hidrocloruro. En todavía otra modalidad de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I en donde R1 es etoxi, n-propoxi o iso-propoxi. En todavía una modalidad adicional de la presente invención, se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I para uso en terapia, en particular, para el uso en la terapia de una enfermedad mediada por el virus HCV. En todavía otra modalidad de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de acuerdo con la fórmula I para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad mediada por el virus HCV.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Un compuesto de acuerdo con la fórmula I puede, de manera particular, ser utilizado para la preparación de un medicamento para la administración a un paciente necesitado de éste en una dosis efectiva de forma terapéutica, de preferencia en una dosis de 0.1 a lOg por día, con mayor preferencia en una dosis de 0.5 a 7g por día y, aun con mayor preferencia, en una dosis de l.Og a 6.0g por día. Un compuesto de acuerdo con la fórmula I puede además ser utilizado para la preparación de un medicamento el cual puede además comprender una cantidad efectiva de manera terapéutica o por lo menos un modulador del sistema inmune tal como una interferona, una interferona derivatizada químicamente, un interleuquina, un factor de necrosis de tumor o un factor de estimulación de colonia y/o por lo menos un agente antiviral que inhibe la replicación del HCV, tal como un inhibidor de proteasa del HCV, otro inhibidor de polimerasa del HCV de nucleósido, un inhibidor de polimerasa de HCV sin nucleósido, un inhibidor de helicasa del HCV, un inhibidor de primasa del HCV o un inhibidor de fusión del HCV. En todavía otra modalidad de la presente invención, se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el virus HCV que comprende la administración a un paciente necesitado de éste, una dosis efectiva, de forma terapéutica, de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente. En todavía otra modalidad de la presente invención, se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el virus HCV que comprende la administración a un paciente necesitado de éste una dosis de 0.1 a lOg por día de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente. En todavía otra modalidad, la dosis entre 0.5 y 7g por día y en una modalidad adicional la dosis es entre 1.0 y 6.0g por día. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el virus HCV que comprende la co-administración a un paciente necesitado de éste, una dosis efectiva, de forma terapéutica, de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente y una cantidad efectiva de forma terapéutica de por lo menos un modulador del sistema inmune y/o por lo menos un agente antiviral que inhibe la replicación del HCV. En otra modalidad de la presente invención se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el HCV que comprende la co-administración a un paciente necesitado de éste, una dosis efectiva, de forma terapéutica, de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente y una cantidad efectiva de forma terapéutica por lo menos de un modulador del sistema inmune el cual es una interferona, interleuquina , factor de necrosis de tumor o factor de estimulación de colonia. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el HCV que comprende la co-administración a un paciente necesitado de éste, una dosis efectiva, de forma terapéutica, de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente y una cantidad efectiva de forma terapéutica por lo menos de un modulador del sistema inmune el cual es un interferón o un interferón derivatizado químicamente. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el HCV que comprende la co-administración a un paciente necesitado de éste, una dosis efectiva, de forma terapéutica, de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente y una cantidad efectiva de forma terapéutica por lo menos de otro compuesto antiviral. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona un método para tratar una enfermedad mediada por el HCV que comprende la co-administración a un paciente necesitado de éste, una dosis efectiva, de forma terapéutica, de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente y una cantidad efectiva, de manera terapéutica, por lo menos de otro compuesto antiviral el cual es un inhibidor de proteasa del HCV, otro inhibidor de polimerasa del HCV de nucleósido, un inhibidor de polimerasa del HCV sin nucleósido, un inhibidor de helicasa del HCV, un inhibidor de primasa del HCV o un inhibidor de fusión del HCV. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente mezclado por lo menos con un portador aceptable farmacéuticamente, diluente o excipiente. En otra modalidad de la presente invención, se proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de acuerdo con la fórmula I como se definió anteriormente, el proceso comprende los pasos (i)-(v) enumerados en la reivindicación 15 y representados en los ejemplos. El proceso comprende el tratamiento I en un medio orgánico acuoso básico el cual puede ser homogéneo o bifásico con un agente acilado como se define en el presente documento en la presencia de D AP y base suficiente para conservar la solución en un pH por lo menos aproximadamente de 7.5. El proceso presente permite la acilación sin la reacción concomitante de la base heterociclica .

La frase "un" o "una" entidad como se utiliza aquí se refiere a uno o más de dicha entidad; por ejemplo, un compuesto se refiere a uno o más compuestos o por lo menos un compuesto. Como tal, los términos "un" (o "una"), "uno o más", y "por lo menos uno" pueden ser utilizados de manera intercambiable en el presente documento. Los términos "opcional" u "opcionalmente" como se utilizan aquí, significan que un suceso o circunstancia descrito de manera subsecuente; sin embargo, puede necesitar no ocurrir, y que la descripción incluye, ejemplos en donde el suceso o circunstancia ocurre y ejemplos en los que no. Por ejemplo, "enlace opcional" significa que el enlace puede o no estar presente, y que la descripción incluye enlaces sencillos, dobles o triples. El término "de manera independiente" se utiliza aquí para indicar que una variable se aplica en cualquier instancia sin contar con la presencia o ausencia de una variable que tiene la misma o diferente definición dentro del mismo compuesto. De esta manera, en un compuesto en el cual R aparece dos veces y es definido como "carbono o nitrógeno de manera independiente", ambas R's pueden ser carbono, ambas R's pueden ser nitrógeno, o una R' puede ser carbono y la otra R' nitrógeno. El término "alquenilo", como se utiliza en el presente documento, denota un radical de cadena de hidrocarburo no sustituido que tiene de 2 a 10 átomos de carbono que tiene uno o dos enlaces dobles olefinicos [de preferencia un enlace doble olefinico] . El "alquenil C2-10", como se utiliza aquí, se refiere a un alquenilo compuesto de 2 a 10 carbonos. Los ejemplos son vinil, 1-propenilo, 2-propenilo (alilo) o 2-butenilo (crotilo) . El término "alquilo" como se utiliza aquí denota una cadena ramificada o no ramificada, un residuo de hidrocarburo monovalente, saturado, que contiene 1 a 10 átomos de carbono. El término "alquilo más bajo" denota un residuo de hidrocarburo de cadena ramificada o derecha que contiene 1 a 6 átomos de carbono. "C1-10 alquilo" como se utiliza aquí se refiere a un alquilo compuesto de 1 a 10 carbonos. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, mas no están limitados a, grupos alquilo más bajos que incluyen metilo, etilo, propilo, i-propilo, p-butilo, i-butilo, t-butilo o pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo y octilo. El término (ar) alquilo o (heteroarilo) alquilo indican que el grupo alquilo es sustituido, de manera opcional, por un arilo o un grupo heteroarilo respectivamente . El término "alquinilo", como se utiliza aquí, denota un radical de cadena de hidrocarburo ramificado o no ramificado que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, de preferencia 2 a 5 átomos de carbono, y que tiene un enlace triple. "C2-10 alquinilo", como se utiliza aquí, se refiere a un alquinilo compuesto de 2 a 10 carbonos. Los ejemplos son etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 2-butinilo o 3-butinilo. El término "cicloalquilo", como se utiliza en el presente documento, denota un anillo carbociclico saturado que contiene 3 a 8 átomos de carbono, es decir, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo o ciclooctilo. "C3-7 cicloalquilo", como se utiliza aquí, se refiere a un cicloalquilo compuesto por 3 a 7 carbonos en el anillo carbociclico. El término "haloalquilo", como se utiliza aquí, denota un grupo alquilo de cadena ramificada o no ramificada como se definió anteriormente en donde 1,2,3 o más átomos de hidrógeno son sustituidos por un halógeno. "C1-3 haloalquilo" , como se utiliza aquí, se refiere a un haloalquilo compuesto por 1 a 3 carbonos y 1 a 8 sustituyentes halógenos. Los ejemplos son 1- fluorometilo, 1-clorometilo, 1-bromometilo, l'-iodometilo, trifluorometilo, triclorometilo, tribromometilo, triiodometilo, 1-fluoroetilo, 1-cloroetilo, 1-bromoetilo, 1-iodoetilo, 2-fluoroetilo, 2-cloroetilo, 2-bromoetilo, 2-iodoetilo, 2 , 2-dicloroetilo, 3-bromopropilo o 2,2,2-trifluoroetilo . El término "alcoxi", como se utiliza aqui, significa un grupo O-alquilo, en donde el alquilo es como se definió anteriormente. Los ejemplos son metoxi, etoxi, n-propiloxi, i-propiloxi, n-butiloxi, i-butiloxi, t-butiloxi. El "alcoxi más bajo", como se utiliza aquí, denota un grupo alcoxi con un grupo "alquilo más bajo" como se definió previamente. "Ci-io alcoxi" se refiere a un 0-alquilo en donde alquilo es Ci-io . El término derivado de "di-acilo", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un compuesto de nucleósido derivatizado, como aquí se describe, en donde el 3'- y 5'-hidroxi son de un éster-OC (=0) R1 y 0C(=0)R2 en donde R1 y R2 son como se definen en la reivindicación 1. El término "agente acilatado", como se utiliza aquí, se refiere ya sea a un anhídrido, ácido hálido, clorocarbonilalcoxida (por ejemplo, cloroformato de etilo) o un derivado activado de un aminoácido alfa protegido N. El término "anhídrido", como se utiliza en el presente documento, se refiere a los compuestos de la estructura general R1C (0) -0-C (0) R1 en donde R1 es como se definió en la reivindicación 1. El término "ácido hálido", como se utilizó aquí, se refiere a compuestos de la estructura general R1C(0)X en donde X es un halógeno. El término "imidazol acilo" se refiere a un compuesto de estructura general R1C(0)X en donde X es N-imidazolil . El término "derivado activado" de un compuesto, como se utiliza en el presente documento, se refiere a una forma de reactivo transiente del compuesto original, el cual presenta el activo del compuesto en una reacción química deseada, en la cual el compuesto original es sólo, de manera moderada, un reactivo o no reactivo. La activación se logra mediante la formación de un derivado o un químico que se agrupa dentro de la molécula con un contenido de energía libre más alto que el del compuesto original, el cual presenta la forma activada más susceptible a reaccionar con otro reagente. En el contexto de la presente invención, se describe, con mayor detalle más adelante, la activación del grupo carboxi es de particular importancia y corresponde a los agentes de activación o agrupaciones que activan el grupo carboxi. El ácido carboxílico y los cloruros de ácido carboxílico son de particular interés para la presente invención. La frase "mezcla de solvente acuosa heterogénea", como se utiliza aquí, se refiere a una mezcla de agua y un co-solvente orgánico el cual produce una mezcla de fase dos o heterogénea. Esta mezcla de solvente acuosa heterogénea puede resultar de un co-solvente con solubilidad acuosa limitada o la fuerza iónica del componente acuoso puede ser ajustado para limitar la solubilidad del co-solvente en la fase acuosa. El término "hidróxido de metal alquilo" se refiere a un compuesto de fórmula MOH en donde M es sodio de litio, potasio o cesio, "bicarbonato de metal alquilo" se refiere a un grupo HC03 en donde M es sodio o potasio y "carbonato de metal alquilo" se refiere a un grupo M2CO3 en donde M es sodio o potasio. Un experto en la técnica apreciará que se pueden utilizar otras bases para conservar el pH con el rango deseado y otras bases están dentro del alcance de la invención. Las abreviaciones utilizadas en esta aplicación incluyen: acetilo (Ac) , ácido acético (HOAc) , 1-N-hidroxibenzotriazol (HOBt) , atmósferas (Atm) , cromatografía de líquido de presión alta (HPLC) , metilo (Me) , tert-butoxicarbonilo (Boc) , acetonitrilo (MeCN) , pirocarbonato o boc anhídrido di- tert-butilo (BOC2O) , l-(3-dimetilaminopropilo) -3-hidrocloruro de etilcarbodiimida (EDCI), benzil(Bn), butilo (Bu), metanol (MeOH) , benziloxicarbonilo ( cbz o Z) , punto de fundición (mp) , diimidazol carbonilo (CDI ) , MeS02- (mesil o Ms) , 1,4-diazabiciclo [ 2.2.2 ] octano ( DABCO) , espectro de masa (ms) , metilo t-éter butilo (MTBE) , 1, 5-diazabiciclo [4.3.0] non-5-ene(DBN), 1 , 8-diazabiciclo [ 5.4.0 ] undec-7-ene ( DBU ) , N-metilmorfolina (NMM) , N-metilpirolidona (NMP) , 1/2-dicloroetano ( DCE) , N, N ' -diciclohexilcarbodiimida ( DCC) , dicromato de piridinio ( PDC) , diclorometano ( DCM) , propilo(Pr), kg/cm2, diisopropiletilamina (DIPEA, Hunig's Base) , piridina (pyr) , temperatura ambiente, rt o RT, N,N-dimetilo acetamida (DMA) , terfc-butildimetilsililo o t-BuMe2Si, (TBDMS) , 4-N, N-dimetilaminopiridina ( DMAP) , trietilamina (Et3N o TEA), N, N-dimetilformamida (DMF) , sulfoxido dimetilo ( DMSO) , ácido trifluoroacético (TFA) , cromatografía de capa delgada (TLC) , acetato de etilo (EtOAc) , tetrahidrofurano (THF) , éter dietilo (Et20) , trimetilsililo o Me3Si(TMS), etilo (Et), monohidrato de ácido p-toluenesulfónico (TsOH o pTsOH) , 4-Me-C6H4S02- o tosilo(Ts), iso-propilo ( i-Pr) , N-uretano-N-carboxianhídrido (UNCA) , etanol (EtOH) . La nomenclatura convencional que incluye los prefijos normal (n) , iso(i-), secundario (sec-) , terciario (tert-) y neo tienen su significado usual cuando es utilizado con una porción de alquilo. (J. Rigaudy y D.P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.) . Los ejemplos de compuestos representativos abarcados por la presente invención y dentro del alcance de la invención, son proporcionados en la TABLA 1. Estos ejemplos y preparaciones que siguen son proporcionados para permitir a los expertos en la técnica un entendimiento más claro y la práctica de la presente invención. Estos no deben ser considerados como limitantes del alcance de la invención; sin embargo, como meramente ilustrativos y representativos de éstos.

En general, la nomenclatura utilizada en esta Solicitud se basa en AUTONO ™ v.40, un sistema computarizado Beilstein Institute para la generación de la nomenclatura sistemática IUPAC. En caso de que exista discrepancia entre la estructura representada y un nombre dado a la estructura, la estructura representada debe estar de acuerdo con un peso mayor. Además, en caso de que la estereoquímica de una estructura o una porción de una estructura no esté indicada, por ejemplo, con negrillas o líneas punteadas, la estructura o porción de la estructura será interpretada como si abarcara todos los estereoisómeros de ésta. El sistema de numeración para estos sistemas de anillo es de la siguiente manera: COMPUESTOS Y PREPARACIÓN Se ha descrito la actividad inhibidora de polimerasa del HCV de (2R) -2 ' -deoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C- metilcitidina (J.L. Clark et al. J.Med. Chem. 2005 48 ( 17 ) : 5504-8 ; J. Clark Publicación estadounidense Número 2005/0009737 y ambas publicaciones están aquí incorporadas como referencia en su totalidad) . En la práctica clínica, sería conveniente administrar, inicialmente, dosis altas de 1-6 para inhibir de manera rápida la polimerasa del HCV y, por lo tanto, disminuir los niveles virales bajo condiciones que minimicen la oportunidad para que el virus mute y para seleccionar las deformaciones resistentes. Los niveles suficientemente altos pueden ser difíciles de lograr con el nucleósido generador. Los profármacos proporcionan una estrategia para mejorar las propiedades farmacoquinéticas y físicas de un compuesto y; por lo tanto, optimizan la bio-disponibilidad . La Publicación estadounidense 2005/0009737 sugiere los enfoques generales para los profármacos de nucleósidos de 2 ' -deoxi-2 ' -fluoro-2 '-metilo nucleósidos. Mientras que los candidatos de profármacos son simples, de forma de engañosa, para prever, la identificación de compuestos con las propiedades fisicoquímicas y farmacodinámicas adecuadas, transformaciones in vivo y perfil de seguridad es un compromiso multidisciplinario complejo que requiere experimentación significativa. Vencer los obstáculos para la identificación de profármacos para entrega oral incluye conservar la solubilidad acuosa suficiente, estabilidad química y lipofilicidad al mismo tiempo que permite la liberación rápida y eficiente de la administración posterior de la porción activa. De manera adicional, el metabolismo de no esterasa y el paso libre mediado del transportador de los profármacos debe ser minimizado (K.Beaumont et al . Curr. Drug.Metab.2003 4 (6) : 461-485) . También, la inhibición o inducción de encimas del citocroma P450 puede producir interacciones desfavorables fármaco-fármaco que son inconvenientes. Los diésteres de alquilo más bajos de 1-6 representados en la TABLA 1 han sido encontrados, de manera sorprendente, para mejorar de forma significativa la bio-disponibilidad de 1-6. El comportamiento farmacoquinético de profármacos potenciales fue evaluado tanto en ratas como en monos para intentar minimizar la variabilidad de intra-especies y los polimorfismos genéticos los cuales pueden resultar en artefactos de intra-especies. En el grado en que las transformaciones enzimáticas sean responsables de la hidrólisis de las uniones de éster, la afinidad específica para los profármacos puede depender de la estructura específica de la esterasa y/o peptidasa la cual podría catalizar la transformación. Se ha mostrado, con frecuencia, que la actividad de esterasa en ratas es mayor que la del hombre de manera significativa (J.A.Fix et al. Pharm.Res.1990 7 ( 4 ) : 384-387 ; W.Li et al.Antimicrob.AgentsChemotherl998 42 ( 3 ) : 647- 653 ) . Otro parámetro potencialmente importante fue la bioconversión de la base de citidina a uridina por una deaminasa. A pesar de que los trifosfatos de citidina y uridina son inhibidores de polimerasa, la fosforilación in vivo de uridina es ineficiente comparada con la citidina. De esta manera, los niveles de uridina incrementados se consideran inconvenientes. Se ha reportado la falta de eficacia exhibida por el derivado de uridina en el replicón del HCV (J. Clark et al. J.Med.Chem. , supra). 1. -Cmax es la concentración pico del 1-7 en la sangre. 2. -AUC(cyt) es el área bajo la curva para el nucleósido de citidina . AUC(urd) es el área bajo la curva para el nucleósido de uridina. 3. -EC90 en el replicón es 5.40+2.6 µ (J. Clark et al . J.Med. Chem . , supra) De manera sorprendente, se ha encontrado que los diésteres de alquilo C2-5 de 1-6 exhiben excelentes propiedades de profármacos. De forma substancial, los niveles más altos del nucleósido fluorinado son observados en la sangre tanto en la rata como en el mono. Además, la relación de citidina con la uridina en la base fluorinada es mayor en ambas especies cuando el nucleósido fue administrado como el diéster. Además, los diésteres son capaces de formar dos diferentes monoesteres y el nucleósido no esterificado . El análisis farmacoquinético en esta situación puede ser complejo en caso de que todas las especies estén presentes en sangre en concentraciones significativas. La presencia de metabolitos múltiples en la sangre agrega cargas adicionales para establecer que el profármaco está seguro. De manera sorprendente, la hidrólisis de ambos esteres es muy fácil y el único metabolito significativo observado en la sangre además del nucleósido generador es el 3'-monoester el cual es rápidamente convertido a 1-6. Para además evaluar el comportamiento potencial en sujetos humanos, el transporte a través de las células Caco-2 fue evaluado para los profármacos putativos . Las células Caco-2 son, por lo común, utilizadas para evaluar la absorción/permeabilidad del potencial de las moléculas (G.Gaviraghi et al. en Pharmacokinetic optimization in drug research . Bilogícal , Pharmacokinetic and Computational Strategies. B. Testa et al. eds . Wiley Interscience VCH, Zurich 2001 pp 3-14). La permeabilidad Caco-2 se encontró que es aceptable para los diesteros de alquilo C2-5 de 1-6. Además de la biotransformación eficiente in vivo Un profármaco para administración oral también debe exhibir propiedades fisicoquímicas adecuadas para formular el fármaco y asegurar la absorción del aparato digestivo en un compartimiento en donde la biotrans formación deseada puede ocurrir. Son, de manera particular, relevantes la solubilidad en agua, el coeficiente de partición y la estabilidad en fluidos gástricos e intestinales. Los valores para estos parámetros son mostrados en la TABLA 2. 1. - Octanol calculado / coeficiente de partición de agua 2. - Coeficiente de distribución determinado de manera experimental en pH 7.4 3. - Solubilidad en medio acuoso, agua o pH 6.5 de regulador (mg/mL) . 4. - Estabilidad en fluido gástrico simulado (SGF; pH 1.2) . - Estabilidad en fluido intestinal simulado (SIF; pH 7.4) 6.- Solubilidad en SGF es 13.3 mg/mL 7. - no determinado 8. - El medio es SIF, la solubilidad en SGF es 13.6 mg/mL 9. - El medio es SIF, la solubilidad en SGF es 0.16 mg/mL . - Medido en agua y regulador de pH 6 11.- Degradación insignificante observada en un periodo de tiempo 12.- Determinado en pH 5.5 El coeficiente de partición de aceite-agua Po/w (clogP es Po/w calculado) es una propiedad importante para los fármacos de administración oral. La sustancia del fármaco debe tener suficiente solubilidad acuosa para disolver en la formulación y en los fluidos gastrointestinales (GI) para contactar las células endoteliales en el estómago e intestino y la suficiente solubilidad de lipidos para recorrer el camino a ^través de la membrana de bi-capa de lipidos de estas células y finalmente en la sangre. El rango óptimo para el registro P de un compuesto para la bio-disponibilidad oral es entre 1 y 3 el cual es exhibido por compuestos de la presente invención. La expresión Po/w, como se utiliza en el presente documento, se refiere al coeficiente de partición de octanol/agua. La expresión clogP, como se utiliza aquí, se refiere a Po/w calculado. Los programas de computación que calculan Po/w están fácilmente disponibles para el químico farmacéutico y medicinal. El término coeficiente de distribución se refiere al coeficiente de partición determinado de manera experimental entre el octanol y la solución acuosa regulada. El coeficiente de partición y el coeficiente de distribución son, por lo general, similares; sin embargo, el último es una función del pH de la solución acuosa en donde el Po/« es independiente del pH. La solubilidad en agua de un profármaco administrado de manera oral debe ser mayor que por lo menos alrededor de 0.1 mg/mL para la formulación óptima y las medias vidas en el fluido gástrico simulado y el fluido intestinal simulado deberían ser l-2h y 2-4h, de manera respectiva, para permitir el tiempo suficiente para recorrer el estómago y ser absorbido en el intestino. Los compuestos de la presente invención están preparados, de manera conveniente, en un paso mediante la acilación de 1-6 en un solvente orgánico acuoso. El solvente puede ser una solución acuosa homogénea o una solución de dos fases. El pH del solvente orgánico acuoso es conservado sobre 7.5 al agregar la base para neutralizar el ácido producido por la acilación. La base puede ser un hidróxido de metal alcalino o álcali o una amina terciaria. La reacción es llevada a cabo en la presencia de D AP la cual es conocida en la técnica por ser un catalizador para la acilación. Una ventaja del presente proceso en el producto deseado puede ser obtenida sin la acilación de la base heterocíclica . No se requiere el grupo de protección que elimina la necesidad de un paso de protección/desprotección. Se describe el proceso en los ejemplos anexos.

DOSIS Y ADMINISTRACIÓN Los compuestos de la presente invención pueden ser formulados en una amplia variedad de portadores y dosis de administración oral. La administración oral puede ser en forma de tabletas, tabletas recubiertas, cápsulas de gelatina dura o suave, soluciones, emulsiones, jarabes o suspensiones. Los compuestos de la presente invención son eficaces cuando son administrados en supositorios, entre otras rutas de administración. La forma más conveniente de administración es, por lo general, oral utilizando un régimen de dosis diaria conveniente el cual puede ser ajustado de acuerdo con la severidad de la enfermedad y la respuesta del paciente a la medicación antiviral. Un compuesto o compuestos de la presente invención, asi como sus sales usables farmacéuticamente, junto con uno o más excipientes convencionales, portadores o diluentes, pueden ser colocados en la forma de composiciones farmacéuticas y dosis de unidad. Las composiciones farmacéuticas y las formas de dosis de unidad pueden comprender ingredientes convencionales en proporciones convencionales, con o sin compuestos activos adicionales y las formas de dosis de unidad pueden contener cualquier cantidad efectiva adecuada del ingrediente activo en proporción con el rango de dosis diaria pretendido que se va a utilizar. Las composiciones farmacéuticas pueden ser utilizadas como sólidos, tales como tabletas o cápsulas llenadas, semisólidos, polvos, formulaciones de liberación mantenida, o líquidos tales como suspensiones, emulsiones, o cápsulas llenadas para uso oral; o en forma de supositorios para administración rectal o vaginal. Una preparación común contendrá aproximadamente de 5% a aproximadamente 95% de compuesto o compuestos activos (w/w) . El término "preparación" o "formas de dosificación" pretende incluir formulaciones tanto sólidas como líquidas del compuesto activo y un experto en la técnica apreciará que un ingrediente activo puede existir en diferentes preparaciones dependiendo de la dosis deseada y los parámetros farmacoquinéticos . El término "excipiente", como se utiliza aquí, se refiere a un compuesto que es utilizado para preparar una composición farmacéutica, y es seguro por lo general, no tóxico y tampoco inconveniente biológicamente e incluye excipientes que son aceptables para uso veterinario así como uso farmacéutico humano. Los compuestos de esta invención pueden ser administrados solos; sin embargo, por lo común serán administrados mezclados con uno o más excipientes farmacéuticos adecuados, diluentes o portadores seleccionados con respecto a la ruta de administración que se pretende y a la práctica farmacéutica estándar. Una forma de "sal aceptable farmacéuticamente" de un ingrediente activo también puede tratar una propiedad farmacoquinética deseable en el ingrediente activo el cual estaba ausente en la forma sin sal, y pueden además afectar, de manera positiva, los farmacodinámicos del ingrediente activo con respecto a su actividad terapéutica en el cuerpo. La frase "sal aceptable farmacéuticamente" de un compuesto, como se utiliza aquí, significa una sal que es farmacéuticamente aceptable y que posee la actividad farmacológica deseada del compuesto generador. Dichas sales incluyen: (1) sales de adición de ácidos formados con ácidos orgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares; o formadas con ácidos orgánicos tales como ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido málico, ácido maléico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, 3- ( -hidroxibenzoil ) ácido benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metanesulfónico, ácido etanesulfónico, 1, 2-etano-ácido disulfónico, 2-ácido hidroxietanesulfónico, ácido benzenesulfónico, 4-ácido clorobenzenesulfónico, 2-ácido naptalenesulfónico, 4-ácido toluenesulfónico, ácido camforsulfónico, ácido sulfúrico lauril, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido salicílico, ácido mucónico y similares. Se debe entender que todas las referencias para sales aceptables de manera farmacéutica incluyen formas de adición de solventes (solvatos) o formas de cristal (polimorfos), como se define aquí, de la misma sal de adición de ácido. Las preparaciones de forma sólida incluyen polvos, tabletas, pildoras, cápsulas, supositorios y gránulos dispersos. Un portador sólido puede ser una o más substancias las cuales también pueden actuar como diluentes, agentes con saborizantes , solubilizadores , lubricantes, agentes de suspensión, aglutinantes, conservadores, agentes de desintegración de tabletas, o un material de encapsulación . En polvos, el portador por lo general es un sólido dividido de manera fina, el cual es una mezcla con el componente activo dividido de manera fina. En tabletas, el componente activo por lo regular es mezclado con el portador que tiene la capacidad de unión necesaria en proporciones adecuadas y compactado en la forma y tamaño deseado. Los portadores adecuados incluyen, mas no están limitados a, carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, celulosa de metilo, celulosa de carboximetilo de sodio, una cera de baja fundición, mantequilla de cocoa, y similares. Las preparaciones de forma sólida pueden contener, además del componente activo, colorantes, saborizantes , estabilizadores, reguladores, endulzantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes de solubilidad y similares. Las formulaciones liquidas también son adecuadas para administración oral e incluyen la formulación liquida que incluyen emulsiones, jarabes, elixires y suspensiones acuosas. Estos incluyen preparaciones de forma sólida los cuales se pretende sean convertidos a preparaciones de forma liquida poco antes de su uso. Las emulsiones pueden ser preparadas en soluciones, por ejemplo, en soluciones de glicol de propileno acuoso o puede contener agentes emulsificantes tales como lecitina, monooleato de sorbitán o acacia. Las suspensiones acuosas pueden ser preparadas al dispersar el componente activo dividido de manera fina en agua con material viscoso, tales como gomas naturales o sintéticas, resinas, celulosa de metilo, celulosa de carboximetilo de sodio y otros agentes de suspensión bien conocidos . Los compuestos de la presente invención pueden ser formulados para administración como supositorios. Una cera de baja fundición, tal como una mezcla o glicéridos de ácidos grasos o mantequilla de cocoa primero se derriten y el componente activo se dispersa de forma homogénea, por ejemplo, por agitación. La mezcla homogénea fundida es entonces vertida en los moldes de tamaño conveniente, se enfrían y se solidifican. Los compuestos de la presente invención pueden ser formulados para administración vaginal. Los pesarios, tapones, cremas, gel, pomadas, espumas o rociadores que contienen además del ingrediente activo dichos portadores conocidos en la técnica como adecuados . Las formulaciones adecuadas junto con los portadores farmacéuticos, diluentes y excipientes son descritos en Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, editado por E . W . artin, Mack Publishing Company, décimo novena edición, Easton, Pennsylvania . Un científico de formulaciones experto puede modificar las formulaciones dentro de las enseñanzas de la especificación para proporcionar numerosas formulaciones para una ruta particular de administración sin ofrecer las composiciones de la presente invención como inestables o comprometidas con su actividad terapéutica. La modificación de los presentes compuestos para presentarlos más solubles en agua u otro vehículo, por ejemplo, pueden ser llevados a cabo de manera fácil mediante modificaciones menores (por ejemplo, formulación de sal) , las cuales son bien conocidas por un experto en la técnica. También es bien sabida por un experto en la técnica la modificación de la ruta de administración y régimen de dosificación de un compuesto particular para manejar los farmacoquinéticos de los compuestos presentes para el efecto de beneficio máximo en pacientes. El término "cantidad efectiva farmacéuticamente", como se utiliza aquí, significa una cantidad requerida para reducir los síntomas de la enfermedad en un individuo. La dosis será ajustada a los requisitos del individuo en cada caso particular. La dosis puede variar dentro de los amplios límites dependiendo de los numerosos factores tales como la severidad de la enfermedad a tratar, la edad y condición de salud general del paciente, otros medicamentos con los cuales el paciente está siendo tratado, la ruta y forma de administración y las preferencias y experiencia del practicante médico involucrado. Para administración oral, una dosis diaria entre aproximadamente 0.1 y aproximadamente lOg por día deben ser adecuados en monoterapia y/o en terapia de combinación. Una dosis diaria preferida está entre aproximadamente 0.5 y aproximadamente 7.5g por día, con mayor preferencia 1.5 y aproximadamente 6.0g por día. Por lo general, el tratamiento se inicia con una "dosis de carga" inicial grande para reducir o eliminar, de manera rápida, el virus siguiendo por una disminución de la dosis a un nivel suficiente para prevenir el resurgimiento de la infección. Un experto en el tratamiento de enfermedades aquí descritas será capaz, con la experimentación debida y con la confianza de su conocimiento y experiencia personal, y las descripciones de esta solicitud, averiguar una cantidad efectiva terapéuticamente de los compuestos de la presente invención para una enfermedad y paciente determinado. La eficacia terapéutica puede ser averiguada a partir de pruebas de la función del hígado que incluyen, mas no se limitan a, los niveles de proteínas tales como proteínas de suero (por ejemplo, albúmina, factores de coagulación, fosfatasa alcalina, aminotrans ferasas (por ejemplo, transaminasa de alanina, transaminasa de aspartato) , 5 ' -nucleosidasa, y -glutaminiltranspeptidasa, etc.), síntesis de bilirrubina, síntesis de colesterol y síntesis de ácidos de bilis; una función metabólica del hígado que incluye, mas no se limita a, metabolismo de carbohidrato, aminoácido y metabolismo de amonio. De manera alternativa, la eficacia terapéutica puede ser monitoreada al medir HCV-RNA. Los resultados de estas pruebas permitirán que se optimice la dosis. En modalidades de la invención, el compuesto activo o una sal puede ser administrada en combinación con otro agente antiviral tal como ribavirina, otro inhibidor de polimerasa del HCV de nucleósido, un inhibidor de polimerasa sin nucleósido del HCV, un inhibidor de proteasa del HCV, un inhibidor de helicasa del HCV o un inhibidor de fusión del HCV. Cuando el compuesto activo o su derivado o sal son administrados en combinación con otro agente antiviral, la actividad puede ser incrementada sobre el compuesto generador. Cuando el tratamiento es combinado con terapia, dicha administración puede ser concurrente o secuencial con respecto a la de los derivados de nucleósidos . "Administración concurrente", como se utiliza aquí incluye, asi, la administración de los agentes al mismo tiempo o en momentos diferentes. La administración de dos o más agentes al mismo tiempo se puede lograr mediante una formulación sencilla que contiene dos o más ingredientes activos o mediante la administración simultánea, de manera sustancial, de dos o más formas de dosificación con un agente activo sencillo. Se entenderá que las referencias del presente documento para el tratamiento se extienden a la profilaxis asi como al tratamiento de las condiciones existentes. Además, el término "tratamiento" de una infección del HCV, como se utiliza aqui, también incluye el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o condición relacionada con o mediada por la infección del HCV, o los síntomas clínicos de ésta. Ejemplo 1 El ácido propiónico ( 2R, 3R, 4R, 5R) -5- ( 4-amino-2-oxo-2H-pirimidina-l-ilo) -4-fluoro-4-metilo-3-propioniloxi-tetrahidro-furano-2-éster ilmetilo (1-3).

Para una suspensión de 1-6 (30g, 0.116 mol), DMAP (1.4g, 11.57 moles) en THF (300mL) y agua (150mL) se añadió TEA (35. lg, 0.347 mol) para obtener una solución clara (pH alrededor de 11) . La mezcla de reacción se enfrió a 5-10°C y anhídrido propiónico (30. lg, 0.231 mol) fue añadido en gotas a la reacción bifásica agitada. El pH fue monitoreado y conservado a aproximadamente 11-12 por adición de manera simultánea de solución KOH . El progreso de la reacción fue monitoreado por análisis de HPLC y después de que el cloruro de propionilo fue añadido había aproximadamente el 52% del diéster, 30% de monoesteros y 15% del material de comienzo. El anhídrido propiónico adicional (45.2g, 0.347 mol) fue añadido en gotas bajo las condiciones descritas anteriormente. La mezcla de reacción permaneció toda la noche sin agitación. El HPLC de la fase orgánica indicada ca . 96% diester y ca. 2% monoester. Las fases fueron separadas y la fase acuosa fue extractada dos veces con THF (100 mL) . Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera. La fase orgánica es filtrada, evaporada y el residuo disuelto en agua (ca. 500 mL) y después diluidas con IPA (ca. 100 mL) . La mezcla resultante es enfriada de manera lenta a temperatura ambiente con agitación. El precipitado resultante fue filtrado, lavado con agua y heptano, secado a aproximadamente 60°C en vacio durante ca . 60h para soportar 3.45g (80.3%) de 1-3 el cual fue de 98.75% puro por HPLC. Ejemplo 2 El ácido isobutirico (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (4-amino-2-oxo-2H-pirimidina-l-ilo) -4-fluoro-3-isobutiriloxi-4-metilo-tetrahidro-furano-2-éster ilmetilo (1-2) . 1-6 1-2 Para una suspensión enfriada en hielo de 1-6 (970g, 3.74 mol) y DMAP (50g, 0.412 mol) en THF (10L) se añadió TEA (2.3kg, 16.5 mol) y agua (7L) lo cual produjo una solución clara. El cloruro de isobutirilo (3 equivalentes) fue añadido de manera lenta a la mezcla agitada mientras se conservaba la temperatura a ca . 0°C. 1.2 después 0.7 de equivalentes de cloruro de isobutililo adicional fueron añadidos hasta que el HPLC indicó que la reacción había procedido, de manera esencial, a la terminación (un total de ca . 1.95kg) . La mezcla de reacción fue acidificada con con HC1 a un pH de ca . 6.4 y se lavó la fase orgánica con EtOAc (2xlOL) . Los extractos combinados se lavaron con agua (lxl5L) . La fase orgánica es filtrada y concentrada in vacuo. El residuo fue disuelto en IPA (ca. 20kg) y se añadió heptano (14.2 kg) . La solución fue calentada a ca. 74-75°C para producir una solución clara, después el ca . 5L fue removido mediante destilación. La solución resultante fue enfriada lentamente para RT. Se formó un precipitado a ca . 42-43°C. Se continuó con el enfriamiento de manera lenta a 5°C y se agitó durante la noche. El sólido resultante fue filtrado y el filtrado se lavó con IPA/heptano (1:8) mezcla (13.4kg), secado al vacío aproximadamente a 60-70°C para soportar 1.295kg (86.65%) de 1-2 el cual fue 99.45% puro por HPLC. Ejemplo 3 El ácido carbónico (2R, 3R, R, 5R) -5- ( 4-amino-2-oxo-2H-pirimidina-l-ilo) -4-fluoro-2-isobutoxicarbonilosimetilo-4 -metilo-tetrahidro-furano-3-éster isobutilo éster ilo (1-4).

Una suspensión de 1-6 (700mg) , DMAP (33mg) en THF (7mL) , fue diluida con salmuera (7mL) . Se añadió NaOH diluido hasta que el pH fue ca . 11. La mezcla de reacción fue enfriada en un baño de hielo y se añadió cloroformato de isobutilo (l.llg) a gotas a la mezcla de reacción bifásica agitada que conserva el pH aproximadamente en 11 al añadir NaOH como se requiera. El análisis de HPLC indicó la mayor parte del dicarbonato contaminado con ca . 15% de monocarbonatos . Un agregado adicional de 1 eq. De cloroformato de isobutilo fue añadido a gotas a la solución enfriada en hielo. El HPLC indicó casi la conversión completa. La mezcla resultante permaneció toda la noche en RT . Se añadió EtOAc ( ca . 50mL) y el pH de la fase acuosa es ajustado a ca . 7.5 con con HC1. Las fases fueron separadas y se lavó la fase orgánica con agua (3x) y se evaporó a sequedad para soportar un sólido incoloro (ca. 1.22g). El sólido es disuelto en acetona caliente que resulta en una solución clara que fue enfriada de manera lenta para RT el cual produce una masa de sólido. El sólido fue diluido con IPA ( ca . 20mL) que produjo una lechada que fue filtrada y después lavada, de forma secuencia, con IPA y heptano, posteriormente secada para soportar 0.85g (68.5%) de 1-4 el cual fue 97.5% puro por HPLC. Ejemplo 4 El ácido carbónico ( 2R, 3R, 4R, 5R) -5- ( -amino-2-oxo-2H-pirimidina-l-ilo) -4-fluoro-4-metilo-2-propoxicarboniloximetilo-tetrahidro-furano-3-éster propilo éster; sal de hidrocloruro (1-5) . Para una suspensión de 1-6 (700mg, 2.70 mol), DMAP (33mg, 0.27 mol) en THF (7mL) y diluido en salmuera (7mL) se añadió KOH diluido para ajusfar el pH a ca . 11. La reacción fue enfriada a ca . 5°C y se añadió n-propilo cloroformato (l.Og) a gotas a la mezcla de reacción bifásica agitada. El análisis de HPLC indicó la formación del producto deseado junto con ca . 20% de monocarbonatos . Se añadieron dos cantidades adicionales de cloroformato de propilo (equivalente 2x1) a la solución fría hasta que el análisis de HPLC indicó que la reacción había procedido a la terminación. La mezcla de reacción fue diluida con EtOAc (30mL) y el pH de la fase acuosa es ajustado a ca . 6.5 con con HC1. Las fases fueron separadas y se lavó la fase orgánica con agua (3x) y se evaporó a sequedad para obtener un sólido incoloro (ca. l.lg). Una solución IPA caliente fue acidificada con 4N HC1 {ca. lmL) y evaporada a sequedad. El sólido resultante fue re-disuelto en EtOH caliente (ca. 115mL) y agitado durante la noche a RT. Se formó una masa sólida que fue filtrada y se lavó el residuo con MeOH/heptano (1:1) . El sólido restante se secó in vacuo aproximadamente a 60°C para soportar 0.325g (25.8%) de 1-5 el cual 97.5% es puro mediante la prueba de HPLC. Ejemplo 5 Determinación de parámetros farmacoquinéticos en ratas El macho intacto IGS Wistar Han Rats Crl :WI (GLx/BRL/Han) IGS BR. Se utilizaron ratas (Hanover-Wistar) que pesan 200-250 g. Se utilizaron los grupos de tres ratas para cada nivel de dosis de un compuesto experimental. Se les permitió a los animales el acceso normal a alimento y agua durante todo el experimento. Se formuló la sustancia de prueba como una suspensión acuosa que contiene Captex355EP, Capmul MC , EtOH, y glicol de propileno (30:20:20:30) en una dosis equivalente a 10mg/kg del 1-6 y fue administrada oralmente mediante cebadura. Se tomó una muestra de sangre (0.3mL) de las ratas tratadas en 0.25, 0.5, 1, 3, 5 y 8 h de una cánula yugular y en 24 h mediante punción cardiaca. Se añadió oxalato de potasio/NaF a las muestras que fueron almacenadas en hielo durante el procedimiento de muestreo. Las muestras fueron giradas en una centrifuga refrigerada a -4°C tan pronto como las muestras de plasma fueron almacenadas en un congelador de - 80°C hasta el análisis. Las alícuotas de plasma (0.05mL) fueron mezcladas con 0. lmL de acetonitrilo . El estándar interno (0.05mL en agua) y 0.02mL de solvente en blanco fue agregado. Se preparó un conjunto de estándares de calibración al mezclar 0.05-mL de alícuotas de plasma de ratas no tratadas con 0. lmL de acetonitrilo, 0.02-mL de alícuotas de solución estándar en metanol: agua (1:1) y 0.05-mL de alícuotas del estándar interno en agua. Cada muestra de plasma y el estándar de calibración se hicieron como torbellino por completo y después centrifugado a 3000 rpm durante 5 minutos para precipitar la proteína. El supernatante (100 µ L cada uno) de la centrifugación fue transferida en un plato de pozo 96 que contiene 200 µ L de fase móvil acuosa durante el análisis LC/MS/MS. Los profármacos fueron analizados utilizando la cromatografía de líquido de alto rendimiento con espectrometría de masa una tras otra (HPLC/MS/MS) . Un Thermo Aquasil C18 4.6 x 50 mm de columna (5 µ?) fue utilizada para la separación. Se utilizó Electrospray Ionization (ESI) para el proceso de ionización. La fase móvil A contenía 5mM de acetato de amonio en agua con 0.1% de ácido fórmico y la fase móvil B contenía MeOH con 0.1% de ácido fórmico. Se llevó a cabo la elusión con el siguiente gradiente con una tasa de flujo de lmL/min: Ejemplo 6 Determinación de parámetros farmacoquinéticos en monos Se utilizaron tres monos Cynomolgus macho que pesaban 8-10kg. Se permitió a los animales el acceso normal a alimento y agua a lo largo del experimento. Se registraron los pesos de los animales al momento de la administración del fármaco y las reacciones adversas de éstos. La sustancia de prueba se formuló como una formulación de suspensión acuosa que contiene hipromellosa (2910, 50 cps), ÜSP, polisorbato 80, NF, alcohol de benziln NF (5.0, 4.0 y 9.0 mg/mL) y agua estéril (cantidad suficiente para rendir l.OmL) en una dosis equivalente a 10mg/kg de 1-6 y 0.5mL/kg fue administrada de manera oral mediante cebadura. Se tomó una muestra de sangre (0.5- l.OmL) a O, 0.083, 0.25, 0.5, 1, 3, 5, 8 y 24 h. El análisis y el manejo de la muestra se llevaron a cabo como se describió en el experimento de la rata. Se tomó una muestra de 5mL de orina de cada mono antes de la dosis y a 0-8h. Las muestras de orina fueron almacenadas a -80°C y analizadas por LC/MS/MS. Las curvas estándar fueron preparadas en plasma de mono en blanco que contiene NaF y oxalato de potasio. Ejemplo 7 Protocolo Caco Materiales : Los polvos del regulador Krebs-Henseleit, dihidrato de cloruro de calcio y bicarbonato de sodio fueron adquiridos en Sigma (St. Louis, MO) . Las células Caco-2 (Pasaje~100) se obtuvieron de Roche Basel. El DMEM/medio alto, 4- (2-hidroxietilo) -1-piperazinetano-ácido sulfónico (HEPES) , y el suero bovino se obtuvieron en JRH Bioscience (Lenexa, KS) . Los aminoácidos no esenciales E , L-glutamina, penicilina y estreptomicina fueron obtenidos de GIBCO Labs, Life Tech. LLC (Grand Island, NY) . Las inserciones del cultivo de células Snapwell ( 6.5mm de diámetro, 1.12cm2, 0.4 µ?a del tamaño porifero) se obtuvieron en Costar (Cambridge, MA) . Cultivos de células: Las células crecieron en frascos de 75-cm2 y conservadas a 37°C en una atmósfera de 5% CO2 y 95% de aire. El medio de cultivo consistió de DMEM/medio alto complementado con 5% de suero bovino, 25 mM HEPES, 1% de aminoácidos no esenciales MEM, 1% de L-glutamina, 100 U/mL de penicilina y 100 /g/mL de estreptomicina. Los cultivos fueron pasados cada semana por una relación fraccionada de 1-3. Para los estudios de permeabilidad, las células Caco-2 en el número de pasaje 110-120 fueron anodizadas a una densidad de 400,000 células/cm2 en filtros de policarbonato Transwell en inserciones Snapwell y se les permitió su cultivo durante 7 días antes del uso. Regulador Krebs-Henseleit : El regulador de bicarbonato Krebs-Henseleit que contiene 10 mM de glucosa y 2.5 mM de CaCl2 ajustado a un pH de 6.5 y 7.4 fueron preparados por instrucciones de paquete. Las sales en polvo fueron disueltas, de manera cuantitativa, aproximadamente en 90% del volumen requerido con agua Millipore. El dihidrato de cloruro de calcio y el bicarbonato de sodio fueron añadidos antes del ajuste del pH con 1N HC1 o 1N NaOH. El agua Millipore adicional fue añadida para traer la solución al volumen final. La solución fue esterilizada por filtración mediante el uso de una membrana con una porosidad de 0.22 micrones y almacenada en el refrigerador (~20°C) hasta su uso. Preparación de las células: Las células diferenciadas fueron obtenidas del Cell Culture Core Facility y se les permitió equilibrarse a 37°C en una atmósfera de 5% de CO2 y 95% de aire. Las inserciones Snapwell que contienen monocapas caco-2 fueron enjuagadas en un regulador de pH de 7.4 Krebs-Henseleit a 37°C. Método: El inserto de célula fue utilizado como la cámara de difusión. El pH del regulador Krebs-Henseleit en las cámaras apical y basolateral fue de 6.5 y 7.4, de manera respectiva, y la concentración inicial del substrato en el lado apical fue de 100 µ?. Las células con el compuesto probado en la cámara apical fueron incubadas previamente durante aproximadamente 30 minutos a 37°C bajo una atmósfera de 5% de CO2 y 95% de aire. Se iniciaron los experimentos cuando los insertos de las células con compuestos de 100 µ? en el regulador Krebs-Henseleit de pH de 6.5 fueron transferidos en una nueva placa con regulador equilibrado previamente en la cámara basolateral. Las muestras del lado del donante en el minuto 0, y ambos lados donante y receptor en 30 minutos fueron colectadas para anális is . Control Post-Experimento : Se utilizó Lucifer Yellow para evaluar el rendimiento del sistema de difusión. Al seguir el último muestreo para los compuestos de prueba, se añadió Lucifer Yellow a la cámara apical para dar una concentración inicial de 100 µ?. Después de 60 minutos de incubación, se removieron 250 µ L de la cámara basal y fueron probados. Cálculo del Coeficiente de Permeabilidad (Papp) : El Papp se calculó mediante el uso de la siguiente fórmula: V x dC = (cm/sec) A x C0 x dt En donde V es el volumen (cm3) de la solución receptora, A es el área de la superficie (cm2) del inserto Snapwell, Co es la concentración inicial (nM) , y dC/dt es el cambio en la concentración en la cámara receptora con el tiempo, es decir, el declive (nM/min) de la concentración en la cámara receptora contra el tiempo. Las concentraciones en cada punto del tiempo de muestreo fueron corregidas para responder por las alícuotas removidas o la transferencia de insertos del donante a nuevas placas dependiendo del experimento . Ejemplo 8 Las composiciones farmacéuticas de los compuestos sujetos para la administración mediante diversas rutas fueron preparadas como se describe en el Ejemplo 8.

Composición para la formulación granular para administración oral (A) : Los ingredientes son mezclados, granulados y distribuidos en cápsulas de gelatina dura que contienen aproximadamente 500 mg de compuesto activo. Composición para Administración Oral (B) : Los ingredientes son combinados y granulados utilizando un solvente tal como agua. La formulación es entonces secada y formada en tabletas que contienen aproximadamente 500 mg de compuesto activo con una máquina de tableta adecuada. Composición para Administración Oral (C) Los ingredientes son mezclados para formar una suspensión para administración oral. Formulación de supositorio (D) : Los ingredientes se funden juntos y se mezclan en un baño de vapor, después se vierten en moldes que contienen 2.5g de peso total. Las características descritas en la descripción anterior, o las siguientes reivindicaciones, expresadas en sus formas específicas o en términos de un medio para llevar a cabo la función descrita, o un método o proceso para lograr el resultado descrito, como es conveniente, puede, de forma separada, o en cualquier combinación de dichas características, ser utilizado para comprender la invención en diversas formas. La invención anterior ha sido descrita en algún detalle como medio de ilustración y ejemplo para fines de claridad y entendimiento. Será evidente para un experto en la técnica que los cambios y modificaciones pueden ser practicados dentro del alcance de las reivindicaciones anexas. Por lo tanto, se debe entender que la descripción anterior pretende ser ilustrativa y no restrictiva. El alcance de la invención debe, por lo tanto, ser determinado no con referencia a la descripción anterior sino debe ser determinada con referencia a las siguientes reivindicaciones anexas, junto con el alcance completo de los equivalentes para los cuales dichas reivindicaciones son autorizadas. Todas las patentes, solicitudes de patentes y publicaciones citadas en esta solicitud son, por este medio, incorporadas como referencia en su totalidad para todos los fines en el mismo grado como si cada patente individual, solicitud o publicación de patente fueran indicadas de manera individual.

Claims (17)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION
2. Habiendo descrito el presente invento, considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama propiedad lo contenido en las siguientes :
3. REIVINDICACIONES 1.- Un compuesto de fórmula I caracterizado porque: R1 es seleccionado del grupo que consiste del alquilo ramificado o sin ramificar C2-5, alquenilo ramificado o sin ramificar C2-5, alquinilo ramificado o sin ramificar C2-5, haloalquilo más bajo C2-5, cicloalquilo C3-6, y alcoxi C2-4; e, hidratos, solvatos y sales de adición de ácido de éstas. 2. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 es etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo o iso-butilo. 3. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o 2, caracterizado porque R1 es etilo o iso-propilo .
4. 4.- Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque R1 es iso-propilo y el compuesto es el hidrocloruro o sal de sulfato.
5. 5. - Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque R1 es iso-propilo y el compuesto es la sal de hidrocloruro.
6. 6. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R1 es etoxi, n-propiloxi o iso-propiloxi .
7. 7. - Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 6 para uso en terapia.
8. 8. - Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 6 para uso en la terapia de una enfermedad mediada por el virus (HCV) Virus de la Hepatitis C.
9. 9. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de manera terapéutica de un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 6 mezcladas con por lo menos un portador aceptable farmacéuticamente, diluente o excipiente.
10. 10. - El uso de un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 6 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad mediada por el virus (HCV) Virus de la Hepatitis C.
11. 11.- El uso de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el medicamento es administrado a un paciente en necesidad de éste, una dosis efectiva terapéuticamente .
12. 12.- El uso de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el medicamento es administrado a un paciente en necesidad de éste, una dosis entre 0.1 y lOg por día.
13. 13. - El uso de conformidad con las reivindicaciones 10 a 12, caracterizado porque el medicamento es administrado además por lo menos con un modulador del sistema inmune y/o por lo menos un agente antiviral que inhibe la replicación de HCV.
14. 14. - Un método para tratar una enfermedad mediada por el virus (HCV) Virus de la Hepatitis C que comprende administrar a un paciente en necesidad de éste, una dosis efectiva de manera terapéutica de un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 6.
15. 15. - El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque una dosis entre 0.1 y lOg por día es administrada al paciente.
16. 16. - El método de conformidad con las reivindicaciones 14 o 15, que además comprende por lo menos un modulador del sistema inmune ylo por lo menos un agente antiviral que inhibe la replicación del HCV.
17. 17.- Un proceso para la O-acilación selectiva de un nucleósido I para soportar un nucleósido O-acilo II bajo condiciones básicas de reacción (II) caracterizado porque Rl es seleccionado del grupo que consiste de alquilo ramificado o sin ramificar C2-5, alquenilo ramificado o sin ramificar C2-5, alquinilo ramificado o sin ramificar C2-5, haloalquilo más bajo C2-5, cicloalquilo C3-6 y alcoxi C2-4, cuyo proceso comprende los pasos de: (i) disolver II y DMAP en una mezcla de solvente acuoso heterogéneo y añadir la base acuosa para ajustar el pH aproximadamente de 7.5 aproximadamente a 12; (ii) añadir, de manera opcional suficiente NaCl acuoso saturado para producir una mezcla de reacción bifásica; (iii) añadir un agente de acilación y base adicional suficiente para conservar el pH aproximadamente de 7.5 aproximadamente a 12; ( iv) monitorear la reacción y descontinuar la adición de dicho agente de acilación y dicha base cuando la conversión alcance un nivel satisfactorio; (v) contactar, de manera opcional, el nucleósido f O-acilo con un ácido aceptable de manera farmacéutica para formar una sal adicional de ácido del nucleósido O-acilo.