MC937A1

MC937A1 - Procédé de préparations d'inhibiteurs de xanthine-oxydase

Info

Publication number: MC937A1
Application number: MC1005A
Authority: MC
Original assignee: Int Chem & Nuclear Corp
Priority date: 1971-08-16
Filing date: 1972-08-02
Publication date: 1973-08-10
Also published as: ES405663A1; BE786611A; FR2150771B1; SU522800A3; NL7211011A; US3920652A; BG19806A3; FR2150771A1; DD99581A5; IE36629L; GB1359563A; JPS4834899A; RO63871A; DE2236987A1; IE36629B1; IL39988A0; AR193536A1; LU65892A1; ATA677372A; AT330780B

Description

La présente invention concerne un procédé de. préparation de composés qui sont des inhibiteurs efficaces de l'enzyme xanthine oxydase et qui répondent à la formule :

Ri

OR-,

dans laquelle R çst un noyau aromatique substitué ou non substitué, par exemple phényle, est un atome d'hydrogène ou de métal alcalin, ou un groupe ammonium et Rest un atome d'hydrogène ou un groupe OR^ .

Il est à présent bien établi que l'enzyme xanthine-oxydase est impliqué dans la production d'acide urique par le corps, en transformant l'hypoxanthine en xanthine, puis cette dernière en-acide urique. Dans des conditions normales, l'acide urique (2,6,8-trioxypurine) ne se trouve qu'en faibles quantités dans le corps, la concentration dans le sang étant de l'ordre de 1 à environ 3 microgrammes par 100 ml. Toutefois, dans certaines conditions pathologiques, par exemple dans la goutte, la concentration en acide urique augmente notablement.

La goutte est naturellement un trouble métabolique de l'organisme résultant d'une surproduction d'acide urique, d'une hyperuricémie chronique (taux élevé d'acide urique dans le sang) et de l'accumulation progressive d'acide urique dans les tissus. Ii'organisme peut aussi perdre progressivement son aptitude à excréter l'acide, urique et il se trouve donc dans un- état constant de déséquilibre de l'acide urique, et en accumule- un excès croissant. La concentration de l'acide urique dans le sang est élevée et, par suite de sa faible solubilité, cet acide tend à précipiter et à former des dépôts en divers points où. le flux sanguin est le moins actif, notamment au ni-

3

veau des articulations et dans les tissas cartilagineux.

L'un des traitements curatifs de la goutte, couramment utili' se dans le passé, a consisté à prescrire des médicaments tendant à empêcher l'accumulation d'acide urique dans l'organisme et 5 par conséquent à réduire la probabilité de récurrences aiguës. Ces médicaments sont appelés "agents uricosuriques" et activent l'excrétion de l'acide urique dans l'urine. L'acide p-dipropyl-sulfamylbenzoïque et la sulfinepyrazine en sont des exemples. Toutefois, ces médicaments ne peuvent pas être administrés 10 conjointement avec l'aspirine ou tout autre salicylate, qui . pourrait être administré pour calmer la douleur, parce que les agents uricosuriques et les.salicylates s'antagonisent mutuellement, c'est-à-dire que chacun, tend à neutraliser l'action de l'autre.

15 Un second mode de traitement de la goutte, qui s'est généra lisé, consiste à utiliser; le médicament appelé allopurinol de formule :

qui arrête la production d'acide urique par l'organisme en inhibant l'enzyme xanthine-oxydase qui, comme indiqué ci-dessus, 20 est responsable de la.transformation de l'hypoxanthine en xanthine et de cette dernière en-acide urique. Bien que l'allo-. purinol inhibe efficacement l'enzyme xanthine-oxydase, il présente néanmoins des inconvénients qui limitent ses possibilités.

Tout d'abord,, sa toxicité est trop forte, la dose léthale 25 ^50 ^ose requise pour détruire à 50 $ un groupe d'animaux en deux semaines, par injection dans la cavité intrapariétaie) étant égale à environ 150 mg par kg de poids corporel. De plus, l'allopurinol est-progressivement métabolisé in vivo en 4,6-dihydroxypyrazolo-[3,4-d]-pyrimidine, qui n'est pas un inhibi-30 teur aussi efficace que l'allopurinol. Outre les inconvénients

4

mentionnés ci-dessus, l'allopurinol, du fait de sa nature chimique, entre en compétition avec la xanthine pour occuper une place sur l'enzyme xanthine-oxydase en vue d'inhiber l'enzyme et d'empêcher ainsi la formation d'acide urique par l'or-5 ganisme,.ce qui limite de même son efficacité. Il est également connu que des crises aiguës d'arthrite se manifestent au début du traitement à l'allopurinol. Il est donc nécessaire d'administrer de la -colchicine pendant la période initiale de traitement pour empêcher ces crises aiguës. On a également noté le dévelop-10 pement d'un prurit Intense chez certains patients, avec des signes occasionnels de somnolence lorsqu'on administre l'allopurinol. Pour cette raison, il serait évidemment très désirable: de trouver l'inhibiteur de xanthine-oxydase de toxicité acceptable et, en même temps, de plus grande efficacité ihhi-15 bitrice comparativement à l'allopurinol.

La demande de <brevet des". 'Etats-Unis d'Amérique ■

H° 172-196- déposée par Darrell E.'O'Brien et

RolandK. Robins décrit des composés d'imidazo-[1,2,a]- et pyrazolo-[1,5,a]^pyrimidine doués d'une grande activité inhi-

20 bitrice. Certains de ces composés ont un plus grand pouvoir inhibiteur contre l'enzyme xanthine-oxydase que l'allopurinol.

Bien-que • ces composés constituent donc des inhibiteurs efficaces,

il est encore nécessaire de trouver des inhibiteurs qui soient doués d'une activité encore plus grande.

- • ,dlinhibiteurs de .

25 En conséquence, l'invention concerne, un pro.céd,e de. préparation/

xanthine-oxydase consistant en composés de pyrazolo-[1,5,a]~

pyrimidine de formule générale suivante :

dans laquelle R désigne un noyau aromatique non substitué ou substitué,- par exemple phényle, naphtyle, tolyle, phényles 30 halogénés, noyaux hétérocycliques, etc., R^ est un atome

5

d'hydrogène, un métal alcalin ou un groupe ammonium et R^ est un atome, d'hydrogène ou un groupe OR,. , , ,,,

1 obtenu* au moyen du procédé les inhibiteurs de xanthine-oxydase/de la présente invention sont représentés par la formule donnée ci-dessus. Comme le mon-5 trent les exemples qui suivent, ces composés déploient une activité inhibitrice bien plus grande que celle de l'allopurinol, qui est dans certains cas 100 à 200 fois plus forte.

Comme indiqué précédemment, le substituant R est un noyau aromatique non substitué ou substitué. Des exemples de substi-10 tuants comprennent les groupes phényle, 1-naphtyle, phényles . substitués de formule :

dans laquelle R^ est un groupe CH^, un atome d'halogène ou un groupe EH-C-CH^, m-t.olyle, des noyaux hétérocycliques tels que :

15

(pipéronyle),

etc,

et R.j désigne de préférence un atome d'hydrogène, ce qui donne des 5,7-dihydroxypyrazolo-[1,5,a-]-pyrim.idines lorsque R2 est un groupe OR^, bien qu'on puisse aussi utiliser des sels acceptables- du point de vue physiologique, par exemple des sels 20. de métaux alcalins ou d'ammonium.

Le- procédé de préparation .conforme, à la présente invention est décrit en détail dans les exemples suivants. Dans son ensemble, la synthèse est la suivante :

En suivant le mode opératoire général décrit par E. L. Ander-25 son, J. E.. Casey Jr.', L. C. G-reene, J. J. Lafferty et H. E. Reiff ("J. Med. Chem.", I, 259 (1964)) on prépare des 3-amino-

4-arylpyrazoles (III) à partir de dérivés aryliques d'acétoni-trile (I)♦

Ar Ar

HCH, —> HC CHO

i2 i

ï ii m la condensation de ces 3-amino-4~arylpyrazoles (III)

avec le malonate diéthyliqueen présence d'une solution d'éthy-

5 late de sodium donne les sels disodiques de 3-aryl~5,7~dihydroxy-

pyrazolo-[1,5,a]-pyrimidine. Lorsqu'on dissout ces sels de sodium dans l'eau et qu'on traite la solution avec de l'acide chlorhydrique dilué, on obtient les 3-aryl-5,7-dihydroxypyrazolo-

[1,5,a]-pyrimidines représentées par (IV). Naturellement, il y

10 a.lieu de remarquer que le groupe aryle, dans le schéma réaction-

nel général donné ci-dessus, .représente les divers noyaux ^rpma-

obtenus dans le procédé tiques et aromatiques substitués des composés/de l'invention.

De même, la condensation de ces 3-amino-4~arylpyrazoles

(III) avec le sel de sodium du formylacétate d'éthyle (ester

15 malonaldéhydique) dans l'éthanol anhydre donne le sel de sodium de diverses 3-aryl-7-.hydroxypyrazolo-[1 ,5,a]-pyrimidines .

Lorsqu'on dissout ces sels de sodium dans l'eau et qu'on les précipite par addition d'acide chlorhydrique, on obtient des

3-aryl-7-hydroxypyrazolo-[1,5,a]-pyrimidines représentées par

20 (V).

0 II

J2T + I 2 *

!i ;

//- e~ otia,

. Une variante que l'on utilise pour la préparation de ces dérivés implique la -condensation dés divers 3-amino-4-aryl-

pyrazoles (III) avec 11 éthoxyméthylènemalonate diéthylique en solution dans l'acide acétique pour former diverses 3-aryl-6-5 carbéthoxy-7-hydroxypyrazolo-[1,5,a]-pyrimidines (VI). Par chauffage au. reflux d'une solution de ces 3-aryl-6~carbéthoxy-7-hydroxypyrazolo-[1 ,5,a]-pyrimidines (VI) dans l'acide sulfu-rique à 40 $ , on obtient les 3-aryl-7-hydroxypyraz olo-[1,5,a]-pyrimidines (V) correspondantes.

10 L'invention est illustrée par les exemples suivants,

donnés à titre non limitatif. Les spectres ultraviolets ont été enregistrés sur un spectrophotomètre "Cary-15".

Exemple 1

Préparation du 3-phénylpyrazolo-r 1 .5,al-pyrimidine~5.7-diol 15 On prépare une.solution d'éthylate de sodium en dissolvant

1>7 g (0,074 atome-gramme) de sodium dans 200 ml d'éthanol absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 6,8 g (42,5 mmoles) de malonate diéthylique-et 6,0 g (37,7 mmoles) de 3-amino-4-phénylpyrazole. On agite la solution résultante et 20 -on la chauffe au reflux pendant 16 heures. On laisse ensuite le mélange refroidir à la température ambiante et on recueille le*sel de sodium du produit par filtration. On lave correctement le sel de sodium à l'éthanol, on le fait sécher à l'air puis on le dissout dans 150 ml d'eau. On obtient le produit par 25 acidification de cette solution avec de l'acide chlorhydrique 6M", jusqu'à un pH égal à 1-2. On sépare le produit par filtration, on le lave à 1Veau et on le sèche à 100°. Par reprécipita—

jzr

8

tion de ce produit dans une solution diluée d'hydroxyde de sodium, par addition d'acide chlorhydrique 6N, on obtient 4,03 g (48 $)de produit analytiquement pur ; point de fusion 315-317° (décomposition) ; .X max. (pH 1) 203 (e 23 400) et 238 ( e18 200); 5 X max. (pH 11) 234 nm (e 19 500) et 297 nm (e 16 600).

Analyse : C fo H i<> ïï" i»

Calculé pour C|2Hg¥^02 63,4 3,94 18,5

Trouvé 63,2 4,01 18,6

Exemple 2 '

10 Préparation du 3-(m-tolyl)-pyrazolo-n.5.a1-pyrimidine-5.7-diol .

On préparé une solution d'éthylate de sodium en dissolvant 1,6 g de sodium.(0,0695 atome-gramme) dans 200 ml d'éthanol absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 6,2 g (38,7 mmoles) de malonate diéthylique et 6,0 g (34,7 mmoles) 15 de 3-amino-4-(m-tolyl)-pyrazole. On agite la solution résultante et on la chauffe lentement • à la température de reflux. Après . que le reflux a été établi, le sel de sodium du produit, de couleur blanche-, commence à précipiter. On continue de chauffer au reflux et d'agiter pendant 16 heures puis on laisse, refroi-20 . dir le mélange à la température ambiante. On sépare le sel de sodium par filtration, on le lave avec trois fois 200 ml d'éthanol absolu et on le fait sécher à l'.air. On dissout ensuite le sel de sodium dans 300 ml d'eau et on précipite le produit dans la solution par l'addition d'acide chlorhydrique 25 6I\T jusqu'à ce qu'un pH égal à 1-2 ait été obtenu. On lave correctement le produit à l'eau et on le sèche à 100°. On effectue une purification en dissolvant le produit dans une solution diluée d'hydroxyde de sodium et en le reprécipitant à l'acide chlorhydrique 6N. Le produit, après purification, pèse 30 2,93 g (35 $>) et a un point de fusion de 284-285° (décomposition) ; X 'max. (pH 1) 207 nm (29 200) et 240 nm (s. 20 500) ; ■ max. (pH 11) 230 nm (26 400) et 286 nm (e 18 800).

Analyse : C i<> E fo IST io

Calculé pour C^H^IT^Og 64,8 4,57 17,4

35 Trouvé 64,9 4,66 17,4

9

Exemple 3

Préparation du 3-(p-1 ol.vl)-pyrazolo-F 1.5.al-pyrimidine-5.7-diol

On prépare une solution d'éthylate de sodium en dissolvant 2,13 g (0,092 atome-gramme) de sodium dans 200 ml d'éthanol 5 absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 8,2 g (51 mmoles) de malonate diéthylique et 8,0 g (46,2 mmoles) de 3-amino-4-(p-tolyl)-pyrazole. On agite la solution résultante et on la chauffe .lentement g/la température de reflux. Lorsque le reflux a été établi, le sel de sodium du produit, de cou-10 leur blanche, commence à précipiter. On continue de chauffer au reflux et d'agiter pendant 6 heures, puis on laisse refroidir le mélange à la température ambiante. On sépare le sel de sodium par filtration, on le lave à ltéthanol absolu, on le fait sécher à l'air puis on le dissout dans 300 ml d'eau. Par 15 acidification de cette solution à l'acide chlorhydrique 6N jusqu'à ce qu'un pïï égal à 1-2 ait été obtenu, on obtient le produit qu'on sépare par filtration, qu'on lave à l'eau,

qu'on sèche à 100° et qu'on purifie par reprécipitation dans une solution d'hydroxyde de sodium par addition d'acide chlor-20 hydrique 6ÏT. Apres purification, le produit pèse 4,55 g (41 ?°) et a un point'de fusion de 255-257° (décomposition) ;

X max (pH 1) .203 nm (s 30 600) et 243 nm (e 20 500).

Analyse ï 0 $ H fo M" fo

Calculé pour Cy^H^F^Og 64,8 ' 4,57 17,4

25 Trouvé 64,9 4,51 ' 19,3

Exemple 4 -

Préparation du 3-(p-bromophényl)-pyrazolo-r 1 ,5,a1-pyrimldine-5.7-diol

On prépare une solution d'éthylate de sodium'en dissol-30 vant 0,97 g (0,042 atome-gramme) de sodium dans 100 ml.d'éthanol absolu.,..On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 0,7 g (23 mmoles) de malonate diéthylique et 5,0 g (21 mmoles) de 3-amino-4-(p-bromophényl)-pyrazole. On agite la solution résultante et on la chauffe lentement à la température de reflux. 35 Lorsque le reflux a été établi, le sel de sodium du produit, de. couleur blanche, commence à précipiter dans la solution.

10

• f »

iOn continue de chauffer au reflux et d'agiter pendant 6 heures, . ' puis on laisse refroidir le mélange à la température ambiante. On sépare le sel de sodium par filtration, on le lave à l'éthanol absolu, on le fait sécher à l'air et on le dissout dans 100 ml 5 d'eau. Le produit est précipité dans cette solution par addition d'acide chlorhydrique 6F jusqu'à un pïï égal à 1-2. On sépare le produit par filtration, on le lave à l'eau, on le sèche à 100° et on le purifie- par reprécipitation en solution dans l'hydroxyde de sodium par addition d'acide chlorhydrique 6F. Après purifica-10 tion, le produit pèse 2,31 g (36 $) et a un point de fusion de 330-332° (décomposition) ; X max (pH 1) 202 nm (e 31 900) et 247 nm (e 27 500) ; X max (pH '11 ) 234 nm (e 41 400) et 308 nm (e 37 100)',

Analyse' : ' 0 fo H fo • F fo

15 Calculé pour C12H8BrF302 47,1 2,62 . 13,7

Trouvé 47,2 2,58 13,8

11

Exemple 5 .

Préparation du 3-(p-chlorophényl)pyrazolo[1,5,a]pyrimidine-

5.7-diol

On prépare une solution d'éthylate de sodium en 5. dissolvant 0,356 g (0,0155 atome-gramme) de sodium dans 100 ml d'éthanol absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 1,38 g (8,6 mmoles) de malonate diéthylique. On agite la solution résultante et on la chauffe lentement à la température de reflux. Lorsque le reflux a été établi, le sel de sodium 10 du produit, de couleur blanche, commence à précipiter dans la solution. On continue de chauffer au reflux et d'agiter pendant 6 heures, puis on laisse refroidir le mélange à la température ambiante. On sépare le sel de sodium par filtration, on le lave à l'éthanol absolu, on le fait sécher à l'air et on le 15 dissout dans 100 ml d'eau. On précipite le produit dans cette solution par addition d'acide chlorhydrique 6F jusqu'à ce qu'on obtienne un pH égal à 1-2.

On sépa.re le produit par filtration, on le lave à l'eau, on le sèche à 100° et on le purifie par reprécipitation 20 dans une solution d1hydroxyde de sodium par addition d'acide chlorhydrique 6F. Après purification, le produit pèse 1,16 g (57 fi) et a un point de fusion de 330-331° (décomposition) ; X max (pH1 ) 204-nm (e 26 500) et 245 nm (e.23 700) ; À. max (pH11) 233 nm (e 24 000) et 305 nm (e 21 500).

25 Analyse :

C fi

H- fi f fi

Calculé pour CigHgClF^Og :

55,1

3,06

16,1

Trouvé :

55,1

3,06

16,2

Exemple 6

Préparation du 3-i-(p-acétamidophényl)pyrazolo[l ,5,a]pyrimidine

30 5.7-dlol : ' - -

On prépare une solution d'éthylate de sodium en dissolvant 1,06 g (0,046 atome-gramme) de sodium dans 200 ml d'éthanol absolu. On ajoute 4,2 g (26 mmoles) de malonate diéthylique à ia solution d'éthylate de sodium. On agite la 35 solution résultante et on la chauffe à la température de reflux pendant 16 heures. On laisse ensuite refroidir le

«i)

12

•mélange à la température ambiante et on recueille le sel de sodium du produit par filtration. On lave correctement le sel de sodium avec de l'éthanol, on le fait sécher à l'air, puis on le dissout dans 150.ml d'eau. On obtient le produit par 5 acidification de cette solution avec de 1*'acide chlorhydrique 6KF jusqu'à un pH égal à 1-2. On sépare le produit par filtration, on le lave à l'eau et on le fait sécher à 100°. Par reprécipitation de ce produit, dans une solution'diluée d'hydroxyde de sodium par addition d'acide chlorhydrique 6N, 10 on obtient 3,54 g (54 f°) de produit analytique ment pur;

point de fusion 212-274° (déeomposition)X max (pH1 ) 204 nm * (e 38-500) et 262 nm (e 31 100) max (pH 11) 232 nm (e 36 000) et 31"1 nm (e 32 000).

Analyse g C H f° ÎT &

15. Calculé pour'014H12îr405.2H20 52,4 5,03 17,5

Trouvé : 52,5 5,10 17,8

Exemple ' 7 '

Préparation du. 3-pipéronylpyrazolo[1,5,a]pyrimidine~5,7-diol On prépare une solution d'éthylate de sodium en dis-20 solvant 1,78 g (0,077 atome-gramme) de sodium, dans 200 ml d'éthanol absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 3,21 g (20 mmoles) de malonate diéthylique et 3,65 g (17,9 mmoles) de 3-amino-4-pipéronylpyrazole. On agite la solution résultante et on la chauffe à la température de reflux pendant 16 heures. 25 On laisse ensuite refroidir le mélange à la température ambiante et .on lave correctement le sel de sodium avec de l'éthanol, on le fait sécher à l'air puis on le dissout dans. 150 ml d'eau. On obtient le produit par acidification de cette solution avec de l'acide : chlorhydrique 6U jusqu'à 30 un pH égal à 1-2. On sépare le. produit par filtration, on le lave à l'eau et on le sèche à 100°. Par reprécipitation de ce produit dans une solution diluée d'hydroxyde de sodium par addition d'acide chlorhydrique 6N, on obtient 3,25 g (59 °/°) de produit analytique ment pur ; point de fusion 35 245-246° (décomposition) ; % max (pH1) 305 nm (e 29 950), 257 nm (épaulement) (e 13 300) et 295 nm (e 10 450) ; À.max (pH11 ) 230 nm

13

(e 17 300) et 275 nm (s 14 100).

Analyse : C i° H fo F $

Calculé pour C^Hgïr^O^ : .57,6 3,34 15,5

Trouvé î ' 57,3 3,62 15,5

5 Exemple 8 .

Préparation du S-D'-pyridyl^pyrazolofl, 5,a]pyrimidine-5,7-

diôl " _

On prépare une solution d'éthylate de sodium en dissolvant 2,76 g (0,12 atome-gramme)' de sodium dans 200 ml 10 d'éthanol absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de sodium 10,55'g (66 mmoles) de malonate diéthylique et 9,60 g (60 mmoles) de 3-amino-4-(3'-pyridyl)pyrazole. On agite la solution résultante et on la chauffe lentement à la température de reflux. lorsque le reflux a été établi, le sel de 15 sodium du produit commence à précipiter. On continue de chauffer au reflux et d'agiter pendant 16 heures puis on laisse refroidir le mélange/â la température, ambiante. On sépare le sel de sodium par filtration, on le lave avec trois fois 200 ml d'éthanol absolu et on le fait sécher à,l'air. On dissout ensuite le 20 sel de sodium dans 300 ml d'eau et on obtient le produit précipité dans la solution par addition d'acide chlorhydrique 6N jusqu'à un- pH égal à 1-2. On sépare le produit par filtration, on le lave à l'eau et on le sèche à 100°. On effectue la purification par dissolution du produit dans une solution diluée 25 d'hydroxyde de sodium et reprécipitation à l'acide chlorhydrique 6H". Après purification, le produit pèse 3,52 g (25 f°) et a un point de fusion de 275-2770, (décomposition) ; \ max (pHl ) 205 nm (épaulement) (e 27 450), 215 nm (e 28 500) , 242 nm (e 20 500) et 280 nm (e 19 500) ; Xmax (pH 11 ) 232 nm 30 (s 31 750) et 275 nm (s 25 000).

Analyse :

Calculé pour ^HgïT^Og :

.. Trouvé :

Exemple 9

35- Préparation du 3-(1 '-naphtyl)pyrazolo[l,5,a]pyridmidine-5,7-diol

C io

57,9

57,5

H 1o 3,53 .3,42

N io

24,6

24,9

H

On prépare une solution d'éthylate de sodium par dissolution de 1,38 g. (0,06 atome-gramme) de sodium dans 200 toi d'éthanol absolu. On ajoute à la solution d'éthylate de .sodium 5,27 g (33 mmoles) de malonate diéthylique et 6,26 g 5 "(30 mmoles) de 3-amino-4-(r!-naphtyl)pyrazole. On agite la solution résultante et on la chauffe -à la température de reflux pendant 16 heures. On laisse ensuite refroidir le mélange à la température ambiante et on recueille le sel de sodium du produit par filtration. On lave correctement le sel de sodium 10 -avec de l'éthanol, on le fait sécher à l'air puis on le dissout . dans 150 ml d'eau. On obtient le produit par acidification " de cette solution avec de l'acide- chlorhydrique 6N jusqu'à un pH égal à 1-2; On sépare le produit par filtration, on le lave à l'eau et on le sèche à 100°C. Par reprécipitation 15 de ce produit dans une solution diluée d'hydroxyde de sodium, par addition d'acide chlorhydrique 6N, on obtient 1,91 g (2-3- fo) de produit ' analytique ment pur ; point de fusion 219-221° ., . (décomposition) / (pB/f*)0 205 nm (e 32 500), 256 nm (e 15 700)

et 290 nm (e 12 100) ; \ max (pH11 ) 230 nm ( e 19400) et. 275 nm 20 (e 15 700)./;

Analyse : . 0 fi H fi N fi

Calculé pour : 69,3 . 4,00 15,2

Trouvé : 68,5 3,72 14,9

Exemple 10

25 Préparation du 3-(m-tolyl)pyrazolo|"1 ,5a1pyrimidine-7-ol

On agite à la température ambiant§(xne suspension de 4,0 g (0,174 atome-gramme) de-sodium métallique dans un litre d'éther absolu, tout en ajoutant goutte à goutte un mélange de 14,8 g (0,2 mole) de. formiate éthylique et de 30 17 g (0,193 mole) d'acétate éthylique. On agite le mélange résultant à la température ambiante pendant 48 heures, le sodium métallique ayant alors entièrement réagi. On évapore le mélange à sec sous pression réduite et on dissout le résidu d'alpha-formylaeétate éthylique brut dans 500 ml^d'éthanol 35 absolu. On agite cette solution à la température ambiante, tout en ajoutant 10,0 g (0,0625 mole) de 3-amino-4-(m-tolyl)pyrazole.

15

On chauffe ensuite ce mélange au reflux pendant 4 heures puis on l'évaporé à sec. On dissout le résidu solide dans 200 ml d'eau, on traite la solution avec du charbon décolorant et on la filtre. Par acidification du filtrat avec de l'acide chlorhy-5 drique concentré, on obtient 8,3 g (59 fi) de 3-(m-tolyl)-pyrazolo[1,5a]pyrimidine-7-ol.qui a un point de fusion de 308-310° (décomposition).

Après reprécipitation de ce produit dans une solution diluée d'hydroxyde de sodium, on ne note pas de modification du 10 point de fusion.A. max (pH1 ) à 206 nm (e 24 600) et 272 nm ( e 13 080) ; X max (pH11 ) à 226 nm (s 9 700) et 327 nm * ( e 12 870) ; épaulement (pH 11) 'à 293 nm.

Analyse : C fi H fi> N fi>

Calculé pour C^H^E^O : 69,5 4,90 18,7

15 Trouvé : 69,5 5,09 18,5

Exemple 11

Préparation du 3-phénylpyrazolo [" 1 , 5a]pyrimidine-7-ol

■ On agite une suspension de 4,0 g (0,174 atome-gramme) de sodium métallique dans de l'éther absolu (1 litre) à. la 20 température ambiante tout en ajoutant goutte à goutte un mélange de formiate éthylique (14,8 g, 0,2 mole) et d'acétate éthylique (17 g, 0,193 mole). On agite le mélange résultant à la température ambiante pendant 48 heures, période au bout de laquelle le sodium métallique a réagi en totalité. On évapore 25 le mélange à sec sous pression réduite et on dissout le résidu d'a-formylacétate éthylique brut dans 500 ml d'éthanol absolu. On agite cette solution à la température ambiante tout en ajoutant 10,0 g (0,063 mole) de 3-amino-4-phényl-pyrazole. On chauffe ensuite ce mélange au reflux pendant 4 heures, puis on évapore à 30 sec. On dissout le résidu solide dans 200 ml d'eau, on traite la solution avec du carbone décolorant et on la filtre. Par acidification du filtrat à l'acide chlorhydrique concentré, on obtient 9,6 g- (.69 fi) de 3-phénylpyrazoio[l,5a]pyrimidine-7-ol ayant vin point de fusion de 322-324° (décomposition). X max (pH 1) à 35 208' nm (e 26 800) et 273 nm (e 12 150). X max (pH 11) à 225 nm (e 11 000) et 329 nm (s 7 400) ; épaulement (pH|11 ) à 294 nm.

16

Analyse : * 0 fi H fi N fi

Calculé pour O^gHgir^O : 68,3 4,26 19,9

Trouvé : 68,1 4,25 20,2

Exemple 12

.5, Préparation de 6-carbéthoxy-3-(m-tolyl)pyrazolo[1,5a]pyrimidine-

7-ol,

On agite et on chauffe au reflux pendant 3 heures une solution de 18,3 g (0,1 mole) de 3-amino~4-m-tolylpyrazole et de 21,6 g (0,1 mole) d'éthoxyméthylène-malonate diéthylique 10 dans 200 ml d'acide acétique. On obtient initialement une dissolution totale ; toutefois, après chauffage au reflux pendant environ 1,5 heure, le produit commence à précipiter dans la solution bouillante. On laisse refroidir le mélange à la température ambiante et on sépare le produit par filtration, 15 on le lave au.méthanol et. on le sèche. Par recristallisation,

dans un mélange de diméthylformamide et d'eau, on obtient 18,6 g (6.3 fi)'de 6-carbéthoxy-3-(m-tolyl)-pyrazolo[l ,5a]pyrimidine-7-ol analytiquement pur, .qui a un point de fusion de 278-280° (décomposition).

20 A. max (pH1 ) 211 nm (e 32 700) et 292 nm (e 13 660). X max (pH 1 1) 227 nm (s 17 800) et 319 nm (e 22 300).

Analyse ..:

Calculé pour C, J3, r-H^O^ :

16 15 3 3

Trouvé :

2 5 Exemple■ 13 .

Préparation du 3-(m~tolyl-pyrazolo[1,5a]pyrimidine-7-ol

On agite et on chauffe au reflux pendant 2,5 heures une solution de 1 g de 6-carbéthoxy-3-(m-tolyl)pyrazolo[1,5a]-pyrimidine-7-ol dans 5 ml d'acide suifurique à 40 fi. A la fin 30 de cette période de temps, on refroidit la solution et on l'ajoute à 10 ml d'èau. On ajoute une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium à cette suspension jusqu'à ce que le -pH soit égal à 4. On sépare par filtration le produit de couleur blanche,

on le lave à l'eau puis on le recristallise dans un mélange de 35 diméthylformamide et d'eau pour obtenir le 3-(m-tolyl)pyrazolo-[1,5aJpyrimidine-7~ol analytiquement pur qui est identique, à

G fi H fi N fi

64,6 5,05 14,12

64,53 5,09 14,11

17

tous points de vue,, au produit obtenu dans l'exemple 11.

Exemple 14

Dans cet exemple, on détermine l'activité inhibitrice des,composés

3 , , les variations,

obtenus au Moyen du procède de l'invention en enregistrant/.spec-

5 traies à une longueur d'onde constante de 290 nm, en utilisant un spectrophotomètre enregistreur "Cary" modèle 15 équipé d'un circuit en pont de „■ 0-0,1' unité de D.O. Pour faciliter la dissolution dans le mélange en cours d'incubation, on dissout les composés de l'invention dans du diméthylsulfoxyde (de 10 pureté spectrale) ,"qui est un solvant convenable et aussi qui n'inhibe pas'l'enzyme.. Après dissolution dans le diméthyl-sulfoxyde,■on introduit les composés dans le mélange en cours d'incubation contenant 150 'micromoles de tampon au chlorhydrate de tris (pH 7,50), 0,6 micromole de EDTA, 0,013 micromole 15 de xanthine et '20 à 40'microgrammes de xanthine-oxydase dans un volume final de 3,0 ml. la xanthine-oxydase est une xanthine-oxydase•de lait, purifiée, vendue par la firme Worthington Biochemical Corporation, et ayant une activité spécifique de 0,29 unité/mg de protéine. On effectue le- titrage 20 en mélangeant tous les composants dans une cellule à 25°C. On déclenche la réaction par addition de l'enzyme au moyen d'un dispositif d'addition équipé d'un agitateur. On mesure les variations de densité optique pendant plusieurs minutes et on calcule le taux de variation (varation de densité optique 25 par minute) d'après la variation spectrale pendant les 15 premières secondes.

Pour évaluer entièrement l'activité inhibitrice et pour comparer les pouvoirs inhibiteurs relatifs décomposés obtenus- par

. ' essais le procédé de l'Invention avec.l'allopurinol,on effectue des/dans

3"0 lesquels on fait varier la concentration de l'inhibiteur dans

. .. _4 v ■ -8

une gamme d'environ 10 a environ 10 M et on mesure la vitesse, initiale d'oxydation de la xanthine. On calcule la : concentration de l'inhibiteur donnant une inhibition à 50 ^ (I5Q) d'après la' courbe de variation du logarithme de la con-35 centration de 1'inhibiteur en fonction du pourcentage d'inhibition. On détermine cette valeur d'après une analyse par

18

régression linéaire des droites obtenues sur ce graphique.

' les résultats sont indiqués sur le tableau I qui donne les valeurs de I^q, ainsi que l'activité relative (a) des composés'particuliers .obtenus par'le procédé de l'inven-5 tion, comparés à l'allopurinol..

I

19

TABIEAU I

Composé R

a

E-, E2

'50

I^q de l'allopurinol 1,-Q du composé

H OH 9,6 x 10"° 52

Cl

.H OH 4,3 x 10

\ H OH 3,3 x 10' -KH—€ —CHj H OH 8,9 x 10"

H OH 3,8 x 10"

-8

H OH 2,5 x 10"

H OH 2,9 x 10"

H OH 4,3 x 10"

H OH 2,5 x 10~7

H H 1,0 x 10

H H 1,5 x 10

-7

116

151 56

131 200

172

116

20 50 33

Allopurinôl

5 x 10

20

' | Il resso'rt des résultats donnés ci-dessus que tous les composés que perme't d'obtenir'le procédé de l'invention dé-ploient

■ • v commerce,à savoir

' une activité au moins 20 fois supérièure' a celle du produit du/

l'allopurinol. En fait, les composés (2), (3), (5), (6), (7) 5 et (8)exercent une activité qui est de 100 à 200 fois supérieure à celle de l'allopurinol. Il y a lieu de remarquer également que les composés dé l'invention ont aussi des taux acceptables de toxicité (DL,_q), généralement de l'ordre de 200 mg par kg de poids corporel.

iO Les inhibiteurs de xanthine-oxydase sont administrés sous la forme de préparations orales, de capsules ou de com-y primés. Les comprimés ou capsules-contiennent environ 0,5 à ■ environ 50 mg d'inhibiteur par élément. La dose requise d'inhibiteur varie, naturellement en fonction de l'état du patient, 15 mais elle se-situe normalement entre environ 10 et 20 mg par jour. Pour inhiber efficacement l'enzyme xanthine-oxydase, la concentration dans le sang est nécessairement d'environ l à environ 500 microgrammes: d'inhibiteur par ml, de préférence d'un à environ 50 microgrammes par ml.

Claims

RESUME

Procédé de préparation de composés de formule :

(dans laquelle R-désigne un noyau aromatique non substitué ou substitué, par exemple un noyau phényle, un noyau de formule

(dans laquelle R^ est un groupe méthyle, un atome d'halogène tel que chlore ou brome ou un groupe'

0 H

BH-C-CH„

R pouvant représenter en outre un groupe de formule ;

22

procédé caractérisé par les points suivants pris séparément ou en combinaison:: .

1. Il consiste à condenser un 3-amino~4-arylpyrazole • avec des dérivés d'acide maIonique.

5
2. Il consiste à condenser un 3-amino~4-arylpyrazole avec le malonate diéthylique en présence d'une solution alcoolique de sodium et à dissoudre éventuellement dans l'eau le sel disodiqùè résultant puis à traiter la solution avec un acide dilué pour obtenir le composé dihydroxylique correspondant.

10 3.. Il consiste à condenser un 3-amino-4-arylpyrazole avec le sel.de sodium du formylacétate éthylique dans l'alcool anhydre et à dissoudre éventuellement dans l'eau le sel de sodium résultant puis à traiter la solution avec un acide dilué pour obtenir le composé 7-hydroxylique correspondant.

15 4.' Il consiste à condenser un 3-amino-4-arylpyrazole avec 1'éthoxyméthylènemalonate diéthylique en solution dans l'acide acétique et à chauffer au reflux le composé 6-carbéthoxy résultant avec un acide, fort pour former le composé 7-hydroxylique correspondant. •

ORIGINAL

en.JÎLaiu, pages — contenant Renvois

UX- mot ajouté—-mot rayé nul URAU

iété Industrielle ie^ChgrJptte f?LO

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