TWI747811B

TWI747811B - 活化長壽基因的組合物

Info

Publication number: TWI747811B
Application number: TW104139964A
Authority: TW
Inventors: 姜顯瑞; 金亨俊; 劉世眞; 金知賢
Original assignee: 韓商愛茉莉太平洋股份有限公司
Priority date: 2014-12-09
Filing date: 2015-11-30
Publication date: 2021-12-01
Also published as: AU2015362283B2; AU2015362283A1; WO2016093515A1; CN107438423A; US20170326100A1; TW201628614A

Abstract

本案揭示一種用於活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中之一或多種基因之組合物，其含有作為活性成分的甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物。在一態樣中，本發明提供活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種基因且適用於預防或治療與該等基因相關之疾病、預防老化且改善皮膚之醫藥組合物、化妝品組合物或食品組合物。

Description

活化長壽基因的組合物

本發明係關於含有作為活性成分之甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物之組合物。

皮膚老化為人類之不可避免的過程。然而，關於皮膚老化如何發生並未知曉過多。詳言之，難以對個別程度的老化進行研究，因為其耗用極長時間。

對皮膚老化的研究主要集中於光老化及固有老化。關於光老化，已積極地研究用於阻斷作為主要原因之UV及防止藉由UV輻射引起的皮膚改變之方法。另外，已研究用於緩解年齡相關固有老化之方法。近來，集中於發現用於調節皮膚老化之方法。詳言之，正在研究基於對調節個體之老化及壽命的基因之研究來防止皮膚老化之方法。

相關技術之參考文獻

韓國專利登記號10-0531947。

在一態樣中，本發明有關於提供使用甲基化兒茶素活化作為年齡相關長壽基因之XPD基因、 Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種基因之組合物。

在另一態樣中，本發明有關於提供藉由活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因或FoxO3基因中的一或多者來預防或治療與該等基因相關之疾病之醫藥組合物、化妝品組合物或食品組合物。

在另一態樣中，本發明有關於提供藉由活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種基因而具有卓越抗老化及皮膚改善效應以及卓越皮膚安全性之醫藥組合物、化妝品組合物或食品組合物。

在一態樣中，本發明提供用於活化長壽基因之組合物，其含有作為活性成分的甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物，其中該長壽基因為XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多者。

在一例示性實施例中，長壽基因之活化可增進轉錄為mRNA。

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可自綠茶葉萃取。

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可由化學式1表示：[化學式1]

其中R₁、R₂、R₃以及R₄中每一者獨立地為OCH₃或OH，除了其中R₁、R₂、R₃以及R₄均為OH的情形，且X₁及X₂中每一者獨立地為H或OH。

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可為選自由EGCG3''Me(表沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、EGCG4''Me(表沒食子兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、ECG3''Me(表兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、ECG4''Me(表兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、GCG3''Me(沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、GCG4''Me(沒食子兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、CG3''Me(兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)以及CG4''Me(兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)組成之群之一或多者。

在一例示性實施例中，該組合物可含有以該組合物之總重量計0.0001-10wr%之甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物。

在一例示性實施例中，該組合物可用於增進XPD蛋白、Klotho蛋白、Sirt-1蛋白、ERCC8蛋白以及FoxO3蛋白中之一或多種蛋白之表現。

在一例示性實施例中，該組合物可用於延長壽命、延遲生物或皮膚老化或改善生物或皮膚老化之症狀。

在一例示性實施例中，該組合物可用於增進皮膚彈性或改善皮膚皺紋。

在一例示性實施例中，該組合物可用於改善皮膚。

在一例示性實施例中，該組合物可用於使皮膚保濕或強化皮膚障壁。

在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療XPD相關疾病、Klotho相關疾病、Sirt-1相關疾病、ERCC8相關疾病以及FoxO3相關疾病中之一或多種疾病。

在一例示性實施例中，XPD相關疾病可為癌症、著色性乾皮病、科凱恩症候群或毛髮低硫營養不良，Klotho相關疾病可為動脈硬化、骨質疏鬆症、中風或阿爾茲海默氏病，Sirt-1相關疾病可為癌症、糖尿病、神經退化性疾病、肥胖、發炎疾病或過敏性呼吸道疾病，ERCC8相關疾病可為癌症或科凱恩症候群，且FoxO3相關疾病可為癌症或發炎疾病。

在一例示性實施例中，該組合物可為醫藥組合物。

在一例示性實施例中，該組合物可為化妝品組合物。

在一例示性實施例中，該組合物可為食品組合物。

在一態樣中，本發明提供使用甲基化兒茶素活化作為年齡相關長壽基因之XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種基因之組合物。

在另一態樣中，本發明提供藉由活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因或FoxO3基因中的一或多者來預防或治療與該等基因相關之疾病之醫藥組合物、化妝品組合物或食品組合物。

在另一態樣中，本發明提供藉由活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種基因而具有卓越抗老化及皮膚改善效應以及卓越皮膚安全性之醫藥組合物、化妝品組合物或食品組合物。

第1圖展示比較EGCG及EGCG''3Me對角質細胞之分化的效應之結果。

第2圖展示角質細胞之細胞存活比率的改變，視EGCG及EGCG3''Me之濃度而定。

下文中，詳細描述本發明。

在一態樣中，本發明提供一種用於活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種長壽基因之方法，其包括向有需要之個體投與有效量的甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物之步驟。

在一態樣中，本發明提供甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物用於製備用於活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種長壽基因之組合物之用途。

在一態樣中，本發明提供用於活化XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因中的一或多種長壽基因之甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物。

在本發明中，「鹽」或「醫藥學上可接受之鹽」係指根據本發明之鹽，其為醫藥學上可接受的且具有母體化合物之所需藥理學活性。其包括由無機酸、有機酸、無機鹼或有機鹼形成之常見鹽及四級銨酸加成鹽。該鹽可包括(1)由諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等之無機酸或由諸如乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸、肉桂酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙烷二磺酸、2-羥基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基雙環[2,2,2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡糖庚酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、第三丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、麩胺酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸及黏糠酸之有機酸形成的酸加成鹽或(2)當存在於母體化合物中之酸性質子經取代時形成的鹽。適合之鹼式鹽的特定實例包括鈉、鋰、鉀、鎂、鋁、鈣、鋅、N,N'-二苯甲基乙二胺、氯普魯卡因、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺及普魯卡因之鹽。

在本發明中，「醫藥學上可接受」意謂由政府管理機構或與其相應的國際組織批準或列於藥典或其他公認用於動物、更特定言之用於人類之藥典中，因為當與常見藥物劑量一起使用時可避免顯著毒性效應。

在本發明中，「前藥」係指藥物，其物理及化學特性已改變，以致其實際上不展現生理學活性，但在其經由化學或酶促作用活體內轉化為初始藥物後發揮藥物效應。在經投與後，前藥經由代謝作用化學轉化為活性藥物。一般而言，前藥為本發明化合物之功能衍生物且容易活體內轉化為所需化合物。用於選擇及製備適合之前藥衍生物之方法描述於例如「Design of Prodrugs」,H Bund Saard,Elsevier,1985中，其完整內容以引用之方式併入本文中。

在本發明中，「水合物」係指與水結合之化合物。該術語以廣泛含義使用，包括在水與該化合物之間缺乏化學結合的包含化合物。

在本發明中，「溶劑合物」係指在溶質分子或離子與溶劑分子或離子之間形成之高級化合物。

在本發明中，「異構物」係指具有相同化學式但不同一之化合物。異構物包括結構異構物、幾何異構物、光學異構物及立體異構物。結構異構物係指具有相同分子但由於不同結構而具有不同特性之化合物。幾何異構物係指具有結合於由雙鍵連接之兩個原子的原子或一組原子之不同空間配置之異構物。立體異構物係指具有相同化學結構但原子或取代基之空間配置不同的化合物。光學異構物(對映異構物)係指兩種彼此呈不重疊鏡像之立體異構物。非對映異構物係指具有兩個或兩個以上對掌性中心且彼此不呈鏡像之立體異構物。

在本發明中，「異構物」詳言之不僅包括光學異構物(例如，基本上純對映異構物、基本上純非對映異構物或其混合物)，而且包括構形異構物(僅一或多個化學鍵之角不同的異構物)、位置異構物(特定言之，互變異構物)或幾何異構物(例如，順-反異構物)。

在本發明中，「基本上純」例如當關於對映異構物或非對映異構物使用時意謂諸如對映異構物或非對映異構物之特定化合物以約90%(w/w)或更高、特定言之約95%或更高、更特定言之約97%或更高或約98%或更高、進一步更特定言之約99%或更高、甚至更特定言之約99.5%或更高存在。

在本發明中，「活化基因」意謂促進染色體DNA上特定基因之轉錄及轉譯為蛋白，使得可發揮其功能。亦即，其意謂促進該基因之表現，使得轉錄為mRNA及轉譯為蛋白主動地發生且該基因之功能可良好發揮。

XPD(ERCC2；切除修復交叉互補組2)蛋白為維持DNA完整性之DNA修復蛋白的成員。其為牽涉於DNA展開中之兩種酶之一且由另一種XP蛋白執行核苷酸切除修復。因此，對XPD基因造成之損傷可引起各種皮膚疾病及老化(Mol Cell.2003年6月；11(6)：1635-46.)。在人類中，XPD基因位於染色體19之45.85-45.87Mb上且具有例如NM_000400之mRNA序列。且，肽序列為NP_000391。DNA修復之缺陷藉由促進老化而引起年齡相關疾病(Best,BP (2009).「Nuclear DNA damage as a direct cause of aging」.Rejuvenation Research 12(3)：199-208.)且增加癌症風險(Bernstein C,Bernstein H,Payne CM,Garewal H.DNA repair/pro-apoptotic dual-role proteins in five major DNA repair pathways：fail-safe protection against carcinogenesis.Mutat Res.2002年6月；511(2)：145-78.Review.)。作為影響DNA修復之缺陷的DNA修復蛋白之XPD基因之突變可引起著色性乾皮病、科凱恩症候群或毛髮低硫營養不良。著色性乾皮病為具有皮膚癌之高發生率的隱性高光敏性皮膚病且由DNA修復相關基因之突變引起。科凱恩症候群為一種類型之侏儒症，其特徵在於生長不足、高光敏性或過早老化。此疾病亦已知由DNA修復基因之缺陷引起。因為引起科凱恩症候群之基因亦牽涉於蛋白產生中，故蛋白之異常積聚及產生可發生。存在四種形式之科凱恩症候群，其中一些顯示與著色性乾皮病相關之症狀。毛髮低硫營養不良為硫缺陷型毛髮營養不良，其特徵在於歸因於含硫蛋白之不足產生的脆弱且易斷裂毛髮。作為一種DNA修復蛋白之XPD蛋白已知為此三種疾病之常見原因。在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可自綠茶葉萃取。其可在洗滌綠茶葉之後用冷水或溫水萃取。特定言之，使用溫水獲得之萃取物可在固化為粉末之後使用。

Klotho為由KL基因編碼之酶。此基因編碼I型膜蛋白，該蛋白與β-葡萄醣醛酸酶相關。在人類中，klotho基因位於染色體13之33.59-33.64Mb上且具有例如NM_004795之mRNA序列。且，肽序列為NP_004786。

Klotho基因剔除小鼠顯現各種類似加速老化之症狀且展現與增加含量之1,25(OH)₂D₃有關的動脈硬化、血管鈣化、軟組織鈣化、氣腫、活動減退、性腺發育不全、不育、皮膚萎縮、共濟失調、低血糖症及高磷酸血症(Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing.Nature 1997；390,45-51)。相反，klotho蛋白之增加的表現引起較長壽命、增加之胰島素抗性、增加之IGF-1抗性等(Kurosu等人，2005)。

已報導，長壽基因Klotho之單一核苷酸多形性亦與人類中之縮短的壽命、骨質疏鬆症、中風及冠狀動脈疾病有關(Arking等人，2002,Kawano等人，2002；Mullin等人，2005,Ogata等人，2002；Yamada等人，2005)。另外，據報導較高含量之Klotho蛋白引起腦細胞之延長壽命、諸如心臟病之相關疾病的降低發生率及強化之認知能力(諸如注意力、記憶、感知等)且該蛋白之不足會加速老化過程。然而，尚未研究皮膚細胞與Klotho表現之間的關係或可增加Klotho表現之物質。

SIRT1(沉默交配型資訊調節2同系物；sirtuin 1)為NAD⁺依賴性去乙醯化酶。在人類中，Sirt-1基因位於染色體10之69.64-69.68Mb上且具有例如NM_001142498之mRNA序列。且，肽序列為NP_001135970。其已知為藉由使離胺酸殘基去乙醯基來調節各種蛋白之功能的酶(Ageing Res，第1卷，第313-326頁，(2002))且已知展現抑制老化細胞之死亡的效應。

哈佛醫學院之研究組報告了飲食減少導致延長壽命之原因在於Sirt-1之活性增加(Science.2004年7月16日；305(5682)：390-2.2004年6月17日電子出版.)。其極其類似於酵母Sir2，酵母Sir2具有NAD⁺依賴性III類組蛋白去乙醯化活性。詳言之，其藉由移除乙醯基調節諸如核因子-kB、p53等之轉錄因子的功能(Cancer Res，第64卷，第7513-7525頁，(2004)；Cell，第107卷，第149-159頁，(2001)；Trends Endocrinol Metab，第17卷，第186-191頁，(2006))。

SIRT1牽涉於與基因表現有關之染色質重構、DNA損傷、與減少飲食有關之壽命延長等中(Chen等人，Science 310,1641,2005)。又，已知SIRT1與過敏性呼吸道疾病有關(J Allergy Clin Immunol.2010年2月；125(2)：449-460.e14.doi：10.1016/j.jaci.2009.08.009.2009年10月27日電子出版.)。如酵母Sir2，SIRT1重構染色質且經由組蛋白去乙醯化抑制基因表現。除了組蛋白，其亦誘導牽涉於細胞生長、應力反應、內分泌調節等中之各種轉錄因子的去乙醯化。

近來已報導藉由SIRT1應用去乙醯化活性之增加用於糖尿病、肥胖、神經退化性疾病、年齡相關疾病等之方法。亦即，已報導SIRT1藉由牽涉於基因表現、糖代謝、胰島素產生、發炎反應、腦細胞之保護等中來調節細胞生長、老化及死亡且在組織及個體層面上牽涉於諸如癌症、代謝性疾病、肥胖、發炎疾病、糖尿病、心臟病、神經退化性疾病等之各種年齡相關疾病中。

ERCC8(切除修復交叉互補組8)為在DNA修復中發揮重要作用之蛋白。在人類中，ERCC8基因位於染色體5之60.17-60.24Mb上且具有例如NM_000082之mRNA序列。且，肽序列為NP_000073。ERCC8之突變可導致科凱恩症候群，其為伴隨過早老化之遺傳性疾病。過早老化顯露出ERCC8顯著影響老化。

DNA修復之缺陷藉由促進老化而引起年齡相關疾病(Best,BP(2009).「Nuclear DNA damage as a direct cause of aging」.Rejuvenation Research 12(3)：199-208.)且增加癌症發生率(Bernstein C,Bernstein H,Payne CM,Garewal H.DNA repair/pro-apoptotic dual-role proteins in five major DNA repair pathways：fail-safe protection against carcinogenesis.Mutat Res.2002年6月；511(2)：145-78.Review.)。

FoxO3a為藉由FoxO3(叉頭框O3)基因編碼之蛋白，該基因稱為長壽基因。其為牽涉於胰島素信號傳導中之轉錄因子且對諸如Mn-SOD及過氧化氫酶之酶的表現起作用。在人類中，FoxO3基因位於染色體6之108.88-109.01Mb上且具有例如NM_001455之mRNA序列。且，肽序列為NP_001446。FoxO3a之活化經由例如活體內防禦機制之活化而引起抗老化效應。

FoxO3蛋白稱為抗癌劑(Myatt SS,Lam EW(2007年11月).「The emerging roles of forkhead box(Fox)proteins in cancer」.Nat.Rev.Cancer 7(11)：847-59.)。FoxO3基因之活性與癌發生有關。FoxO3活性之下調通常可見於癌症中且FoxO3基因亦已知與經由淋巴細胞之增殖引起的發炎疾病有關(Immunity 2004.21：203-213.,Proc.Natl.Acad.Sci.2004.101：2975-2980.,Cell 1999.96：857-868)。

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可自綠茶葉萃取。其可在洗滌綠茶葉之後用冷水或溫水萃取。特定言之，使用溫水獲得之萃取物可在固化為粉末之後使用。

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可為選自由甲基化表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、甲基化沒食子兒茶素沒食子酸酯(GCG)、甲基化表沒食子兒茶素(EGC)、甲基化表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、甲基化沒食子兒茶素(GC)、甲基化兒茶素沒食子酸酯(CG)、甲基化表兒茶素(EC)及甲基化兒茶素(C)組成之群之一或多者。

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可由化學式1表示：

在一例示性實施例中，甲基化兒茶素可為選自由EGCG3''Me(表沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、EGCG4''Me(表沒食子兒茶素 -3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、ECG3''Me(表兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、ECG4''Me(表兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、GCG3''Me(沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、GCG4''Me(沒食子兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、CG3''Me(兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)以及CG4''Me(兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)組成之群之一或多者。

在一例示性實施例中，該組合物可含有以該組合物之總重量計0.0001-10wt%或0.001-1wt%之甲基化兒茶素、其鹽、其前藥、其水合物、其溶劑合物或其異構物。

在一例示性實施例中，該組合物可用於增進XPD蛋白、Klotho蛋白、Sirt-1蛋白、ERCC8蛋白以及FoxO3蛋白中之一或多種蛋白之表現。當皮膚細胞用甲基化兒茶素處理時，隨著XPD蛋白、Klotho蛋白、Sirt-1蛋白、ERCC8蛋白以及FoxO3蛋白中之一或多種蛋白之表現增進而展現卓越抗老化及皮膚改善效應。

在一例示性實施例中，該組合物可用於改善皮膚。

在一例示性實施例中，該組合物可用於對抗癌症。

在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療XPD相關疾病。XPD相關疾病係指藉由XPD引起之疾病且包括著色性乾皮病、科凱恩症候群或毛髮低硫營養不良，XPD為影響DNA修復之缺陷的DNA修復蛋白。在一例示性實施例中，該組合物可為醫藥組合物。該醫藥組合物可用於抗老化，用於改善皮膚或用於預防或治療癌症、著色性乾皮病、科凱恩症候群或毛髮低硫營養不良。

在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療klotho相關疾病。klotho相關疾病係指藉由klotho引起之疾病，例如klotho蛋白缺乏。特定實例包括動脈硬化、骨質疏鬆症、中風、阿爾茲海默氏病等。在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療動脈硬化、骨質疏鬆症、中風或阿爾茲海默氏病。在一例示性實施例中，該組合物可為醫藥組合物。該醫藥組合物可用於抗老化，用於改善皮膚或用於預防或治療動脈硬化、骨質疏鬆症、中風或阿爾茲海默氏病。

在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療Sirt-1相關疾病。Sirt-1相關疾病係指藉由Sirt-1(例如Sirt-1蛋白之缺乏、抑制等)引起之疾病且包括癌症、糖尿病、神經退化性疾病、肥胖、發炎疾病、過敏性呼吸道疾病等，該Sirt-1蛋白為藉由使離胺酸殘基去乙醯基來調節各種蛋白之功能的酶。在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療癌症。在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療糖尿病。在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療神經退化性疾病。神經退化性疾病之實例包括阿爾茲海默氏病、肌萎縮性側索硬化、帕金森氏病、亨廷頓氏病、多發性硬化等。在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療肥胖。在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療發炎疾病。發炎疾病之實例包括皮炎、過敏、結膜炎、齒齦炎、鼻炎、中耳炎、咽炎、扁桃體炎、肺炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、肝炎、食道炎、胃炎、腸炎、胰臟炎、結腸炎、腎炎、關節炎、全身性水腫、局部水腫等。在一例示性實施例中，該組合物可為醫藥組合物。該醫藥組合物可用於抗老化，用於改善皮膚或用於預防或治療癌症、糖尿病、神經退化性疾病、肥胖、發炎疾病或過敏性呼吸道疾病。

在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療ERCC8相關疾病。ERCC8相關疾病係指藉由ERCC8引起之疾病，ERCC8為影響DNA修復之缺陷的DNA修復蛋白。特定實例包括年齡相關疾病、癌症、科凱恩症候群等。在一例示性實施例中，該組合物可為醫藥組合物。該醫藥組合物可用於抗老化，用於改善皮膚或用於預防或治療癌症或科凱恩症候群。

在一例示性實施例中，該組合物可用於預防或治療FoxO3相關疾病。FoxO3相關疾病係指藉由FoxO3基因之活化或抑制引起的疾病且包括癌症、年齡相關疾病、發炎疾病等。發炎疾病之實例包括皮炎、過敏、結膜炎、齒齦炎、鼻炎、中耳炎、咽炎、扁桃體炎、肺炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、肝炎、食道炎、胃炎、腸炎、胰臟炎、結腸炎、腎炎、關節炎、全身性水腫、局部水腫等。在一例示性實施例中，該組合物可為醫藥組合物。該醫藥組合物可用於抗老化，用於改善皮膚或用於預防或治療癌症或發炎疾病。

在一態樣中，該醫藥組合物可進一步含有通常用於製備醫藥組合物之適合載劑、賦形劑或稀釋劑。在一態樣中，可含有該組合物中之載劑、賦形劑或稀釋劑之實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藻糖醇、麥芽糖醇、澱粉、阿拉伯膠、褐藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、矽酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、水、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂、礦物油等。

該醫藥組合物可製備成用於經口投與之調配物，諸如散劑、顆粒、錠劑、膠囊、懸浮液、乳液、糖漿、氣溶膠等；用於外用之調配物；根據常用方法之栓劑或無菌可注射溶液。

該調配物可含有常用稀釋劑、賦形劑等，諸如填充劑、增量劑、黏合劑、濕潤劑、崩解劑、界面活性劑等。用於經口投與之固體調配物可包括錠劑、丸劑、散劑、顆粒、膠囊等。除活性成分外，該固體調配物可進一步包括至少一種賦形劑，例如澱粉、碳酸鈣、蔗糖、乳糖或明膠。除簡單賦形劑外，亦可含有諸如硬脂酸鎂或滑石之潤滑劑。用於經口投與之液體調配物包括懸浮液、用於內用之溶液、乳液、糖漿等且除常用簡單稀釋劑(諸如水及液體石蠟)外亦可含有各種賦形劑，例如濕潤劑、甜味劑、芳族物、防腐劑等。用於非經腸投與之調配物可包括滅菌水溶液、非水溶液、懸浮液、乳液、冷凍乾燥調配物及栓劑。關於非水溶液或懸浮液，可使用丙二醇、聚乙二醇、諸如橄欖油之植物油、諸如油酸乙酯之可注射酯等。作為栓劑之基質，可使用witepsol、聚乙二醇(macrogol)、tween 61、三月桂酸甘油酯、可可脂、甘油明膠等。

本發明中所揭示之活性成分的投與劑量可視患者之身體狀態及體重、疾病嚴重程度、藥物類型及投與時期及途徑而變化。投與劑量可在此項技術中常用之範圍內加以選擇。在一態樣中，活性成分之每日投與劑量以乾重計可為0.0001-1000g/kg。在另一態樣中，投與劑量可為0.001-100g/kg。在另一態樣中，投與劑量可為0.001-10g/kg。在另一態樣中，投與劑量可為0.001-1g/kg。在一態樣中，每日投與劑量可為 0.0001g/kg或更高、0.001g/kg或更高、0.05g/kg或更高、0.01g/kg或更高或0.05g/kg或更高。在另一態樣中，每日投與劑量可為500g/kg或更低、100g/kg或更低、50g/kg或更低、10g/kg或更低、1g/kg或更低或0.5g/kg或更低。在一例示性實施例中，活性成分可以約0.086g/kg之每日劑量投與。在另一例示性實施例中，其可以約0.143g/kg之每日劑量投與。投與可在1-5天內進行一次或一天進行數次。在一態樣中，投與可一天進行3次。

本發明中所揭示之活性成分可經由各種途徑投與至諸如牛、人類等之哺乳動物。可預期任何投與模式。例如，其可經口、經直腸、靜脈內、肌肉內、皮下、子宮內或腦室內投與。

在一例示性實施例中，該組合物可為化妝品組合物。除作為活性成分之甲基化兒茶素或其異構物外，該化妝品組合物亦可含有化妝品組合物中常用之成分。例如，其可含有常見佐劑，諸如抗氧化劑、穩定劑、增溶劑、維生素、顏料、著色劑及香料以及載劑。

本發明之化妝品組合物可製備成此項技術中常見之任何調配物。例如，其可製備成溶液、懸浮液、乳液、糊劑、凝膠、乳膏、洗劑、散劑、皂、含界面活性劑之清潔劑、油、粉底霜、粉底液、粉底蠟、噴霧劑等，不過不限於此。更特定言之，其可製備成化妝品，諸如軟化洗劑、滋養洗劑、洗劑、身體洗劑、滋養乳膏、按摩乳膏、保濕乳膏、護手霜、香精、眼霜、清潔乳膏、洗面奶、卸妝水、面膜、凝膠、貼片、噴霧劑、散劑、水包油(O/W)或油包水(W/O)基質化妝品、唇膏、化妝品基質、粉底等；或清潔劑，諸如洗髮劑、漂洗劑、身體清潔劑、牙膏、漱口液等；毛髮固定劑，諸如護髮素、凝膠、摩絲等；或毛髮化妝品，諸如滋補劑、染髮劑等。

當本發明之化妝品組合物的調配物為糊劑、乳膏或凝膠時，動物油、植物油、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚矽氧、膨潤土、二氧化矽、滑石、氧化鋅等可用作載劑。

當本發明之化妝品組合物的調配物為散劑或噴霧劑時，乳糖、滑石、二氧化矽、氫氧化鋁、矽酸鈣或聚醯胺粉末可用作載劑。尤其，噴霧劑可進一步含有推進劑，諸如氯氟烴、丙烷/丁烷或二甲醚。

當本發明之化妝品組合物的調配物為溶液或乳液時，溶劑、增溶劑或乳化劑可用作載劑。實例包括水、乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、丁二醇、1,3-丁二醇油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、甘油(glycerol)、丙三醇(glycerin)、脂族酯、苯氧基乙醇、三乙醇胺、聚乙二醇、蜂蠟、聚山梨醇酯60、去水山梨糖醇倍半油酸酯、石蠟、去水山梨糖醇硬脂酸酯、親脂性甘油單硬脂酸酯、硬脂酸、甘油硬脂酸酯/PEG-400硬脂酸酯、羧基聚合物、穀甾醇、聚甘油基-2油酸酯、神經醯胺、膽固醇、硬脂醇聚醚-4、磷酸雙十六酯、澳大利亞堅果油、羧基乙烯基聚合物、三仙膠、去水山梨糖醇之脂肪酸酯等。

當本發明之化妝品組合物的調配物為懸浮液時，諸如水、乙醇、丁二醇或丙二醇之液體稀釋劑、諸如乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯及聚氧乙烯去水山梨糖醇酯、微晶纖維素、羥基乙基纖維素、透明質酸鈉、苯氧基乙醇、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂、黃蓍等之懸浮劑可用作載劑。

當本發明之化妝品組合物的調配物為含界面活性劑之清潔劑時，脂族醇硫酸酯、脂族醇醚硫酸酯、磺基丁二酸單酯、羥乙基磺酸鹽、咪唑啉鎓衍生物、牛磺酸甲酯、肌胺酸鹽、脂肪酸醯胺醚硫酸酯、烷基醯胺基甜菜鹼、脂族醇、脂肪酸甘油酸酯、脂肪酸二乙醇醯胺、植物油、羊毛脂衍生物、乙氧基化甘油脂肪酸酯等可用作載劑。

在一例示性實施例中，該組合物可為食品組合物。該食品組合物可用於抗老化，用於改善皮膚或用於預防或改善癌症、著色性乾皮病、科凱恩症候群、毛髮低硫營養不良、發炎疾病、動脈硬化、骨質疏鬆症、中風、阿爾茲海默氏病、糖尿病、神經退化性疾病、肥胖或過敏性呼吸道疾病。

在一態樣中，該食品組合物可為例如各種食品、飲料、膠、茶、維生素複合物、健康補充食品等且可以散劑、顆粒、錠劑、膠囊或飲料之形式使用。除活性成分外，該食品組合物之各調配物亦可含有此項技術中常用之成分，該等成分可由熟習此項技術者考慮特定調配物或目的用途容易地選擇而無困難。此等成分可提供協同效應。

該食品或飲料組合物中所含之活性成分的量一般關於健康食品組合物可為1-5wt%且關於健康飲料組合物可為每100mL 0.02-10g，特定言之0.3-1g。

除本發明中所揭示之活性成分外亦可含於健康飲料組合物中之液體成分未受特定限制。各種調味劑、天然碳水化合物可進一步含於常見飲料中。天然碳水化合物之實例包括單醣，諸如葡萄糖、果糖等；二醣，諸如麥芽糖、蔗糖等；多醣；糖，諸如糊精、環糊精等；糖醇，諸如木糖醇、山梨糖醇、赤藻糖醇等；等等。作為調味劑，可使用天然調味劑(索馬甜、甜葉菊萃取物(例如甜葉菊苷A、甘草甜素等)或合成調味劑(例如糖精、阿斯巴甜糖等)。天然碳水化合物之含量可為一般每100mL本發明中所揭示之組合物約1-20g、特定言之約5-12g。

此外，在一態樣中，該食品組合物可含有各種營養物、維生素、礦物(電解質)、調味劑(諸如合成調味劑及天然調味劑)、著色劑、增量劑(奶酪、巧克力等)、果膠酸及其鹽、褐藻酸及其鹽、有機酸、保護性膠狀增稠劑、pH控制劑、穩定劑、防腐劑、丙三醇、醇、用於碳酸化飲料中之碳酸劑等等。其可進一步含有用於製備天然果汁或蔬菜汁之果肉。此等成分可獨立地或組合使用。此等添加劑之添加量未受特定限制。一般而言，其含量以100重量份之本發明中所揭示之組合物計為約0-20重量份。

[發明模式]

下文中，將經由實例詳細描述本發明。然而，以下實例僅用於說明性目的且熟習此項技術者將顯而易知，本發明之範圍不受該等實例限制。

測試實例

存在三種類型之構成人類皮膚之細胞。其為構成表皮之角質細胞、產生黑色素之黑素細胞及構成真皮之纖維母細胞。

角質細胞深深地牽涉於藉由防止水蒸發而實現之皮膚小型化及保護皮膚免於有害因素之障壁功能中。黑素細胞決定皮膚之顏色及色調且亦產生雀斑及暫時性斑。纖維母細胞產生諸如膠原蛋白之彈性纖維且與皮膚彈性及皮膚皺紋深深地相關。

使用正常人類角質細胞(NHK)及正常人類纖維母細胞(NHF)進行實驗以研究甲基化兒茶素之效應。特定言之，2×10⁵個購自Lonza(Allendale,NJ,USA)之NHF(正常人類纖維母細胞)在37℃下在60-mm皿上使用DMEM培養24小時。棄去該培養基且將細胞轉移至新的組織培養燒瓶中。又，使用角質細胞生長培養基(KGM-GOLD,Lonza,Allendale,NJ, USA)培養購自Lonza(Allendale,NJ,USA)之NHEK(正常人類表皮角質細胞，對應於NHK)。該等細胞在繼代培養之後用0.025%胰蛋白酶分離且轉移至新的組織培養燒瓶中。

如下文所述，已確認含有作為活性成分之甲基化兒茶素的組合物在角質細胞及纖維母細胞中引起增加之長壽基因(XPD、Klotho、Sirt-1、ERCC8及Fox03)表現。又，研究長壽基因(XPD、Klotho、Sirt-1、ERCC8及Fox03)之表現對角質細胞之增加的分化及纖維母細胞中增加的細胞外基質(ECM)之效應。

(1)評估XPD活化

甲基化兒茶素對XPD活化之效應與視黃醇及未甲基化兒茶素之彼等效應相比較。

特定言之，在用視黃醇、綠茶EGCG及綠茶EGCG''3Me中之每一者在10ppm下處理角質細胞(NHK)及纖維母細胞(NHF)，隨後在37℃下培育24小時之後，自細胞分離總RNA且比較XPD mRNA之相對表現。

使用TRIzol^TM(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)根據製造商之方案分離總RNA。以分光光度法量測RNA濃度且使用BioAnalyzer 2100(Agilent Technologies,Santa Clara,CA,USA)量測RNA完整性。使用SuperScript^®III逆轉錄酶(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)將4μg RNA 逆轉錄為cDNA。cDNA儲存於-70℃下。藉由定量即時TaqMan RT-PCR(7500Fast,Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)量測標靶基因之表現水準。循環條件為在95℃下10分鐘，在95℃下15分鐘及在60℃下1分鐘之50個循環。

已確認，含有作為活性成分之甲基化兒茶素的組合物如與未甲基化兒茶素相比顯著地增加XPD基因之表現。

(2)評估Klotho活化

甲基化兒茶素對Klotho活化之效應與視黃醇及未甲基化兒茶素之彼等效應相比較。

特定言之，在用視黃醇(10ppm)、綠茶EGCG(1及10ppm)及綠茶EGCG''3Me(1及10ppm)中之每一者處理角質細胞(NHK)及纖維母細胞(NHF)，隨後在37℃下培育24小時之後，自細胞分離總RNA且比較Klotho mRNA之相對表現。

使用TRIzol^TM(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)根據製造商之方案分離總RNA。以分光光度法量測RNA濃度且使用BioAnalyzer 2100(Agilent Technologies,Santa Clara,CA,USA)量測RNA完整性。使用SuperScript^®III逆轉錄酶(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)將4μg RNA逆轉錄為cDNA。cDNA儲存於-70℃下。藉由定量即時TaqMan RT-PCR(7500Fast,Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)量測標靶基因之表現水準。循環條件為在95℃下10分鐘，在95℃下15分鐘及在60℃下1分鐘之50個循環。

已確認，含有作為活性成分之甲基化兒茶素的組合物如與未甲基化兒茶素相比增加Klotho基因之表現。詳言之，在低濃度下差異明顯。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及效率方面為卓越的。

(3)評估Sirt-1活化

甲基化兒茶素對Sirt-1活化之效應與視黃醇及未甲基化兒茶素之彼等效應相比較。

特定言之，在用視黃醇、綠茶EGCG及綠茶EGCG''3Me中之每一者在10ppm下處理角質細胞(NHK)及纖維母細胞(NHF)，隨後在37℃下培育24小時之後，自細胞分離總RNA且比較Sirt-1 mRNA之相對表現。

使用TRIzol^TM(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)根據製造商之方案分離總RNA。以分光光度法量測RNA濃度且使用BioAnalyzer 2100(Agilent Technologies,Santa Clara,CA, USA)量測RNA完整性。使用SuperScript^®III逆轉錄酶(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)將4μg RNA逆轉錄為cDNA。cDNA儲存於-70℃下。藉由定量即時TaqMan RT-PCR(7500Fast,Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)量測標靶基因之表現水準。循環條件為在95℃下10分鐘，在95℃下15分鐘及在60℃下1分鐘之50個循環。

已確認，含有作為活性成分之甲基化兒茶素的組合物如與未甲基化兒茶素相比顯著地增加Sirt-1基因之表現。

(4)評估ERCC8活化

甲基化兒茶素對ERCC8活化之效應與視黃醇及未甲基化兒茶素之彼等效應相比較。

特定言之，在用視黃醇、綠茶EGCG及綠茶EGCG''3Me中之每一者在10ppm下處理角質細胞(NHK)及纖維母細胞(NHF)，隨後在37℃下培育24小時之後，自細胞分離總RNA且比較ERCC8 mRNA之相對表現。

已確認，含有作為活性成分之甲基化兒茶素的組合物如與未甲基化兒茶素相比顯著地增加ERCC8基因之表現。

(5)評估FoxO3活化

甲基化兒茶素對Fox03活化之效應與視黃醇及未甲基化兒茶素之彼等效應相比較。

特定言之，在用視黃醇、綠茶EGCG及綠茶EGCG''3Me中之每一者在10ppm下處理角質細胞(NHK)及纖維母細胞(NHF)，隨後在37℃下培育24小時之後，自細胞分離總RNA且比較Fox03 mRNA之相對表現。

已確認，含有作為活性成分之甲基化兒茶素的組合物如與未甲基化兒茶素相比顯著地增加Fox03基因之表現。

已確認，含有作為活性成分之甲基化兒茶素的根據本發明之組合物藉由經由活化角質細胞中之XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因及FoxO3基因使皮膚保濕且強化皮膚障壁來提供皮膚改善效應，該等基因防止水蒸發且保護皮膚免於有害因素。又，已確認該組合物藉由經由活化纖維母細胞中之XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因及FoxO3基因增進皮膚彈性且改善皮膚皺紋來提供抗老化效應，該等基因與皮膚彈性及皮膚皺紋深深地相關。此等效應如與未甲基化兒茶素相比為顯著卓越的。

(6)評估細胞分化

如下文所述，已確認增加XPD基因、Klotho基因、Sirt-1基因、ERCC8基因及FoxO3基因之表現的甲基化兒茶素可藉由活化該等長壽基因來促進細胞分化。

為了研究甲基化兒茶素對角質細胞之分化的效應，正常人類表皮角質細胞(NHEK)用EGCG''3Me及EGCG在各種濃度下處理48小時。如自圖1可見(比例尺=100μm)，EGCG''3Me以濃度依賴性方式促進角質細胞之分化。如與EGCG相比，其在低濃度下展現角質細胞之卓越分化。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及諸如皮膚保濕及皮膚障壁效應之皮膚改善效應方面為卓越的。

又，已發現甲基化兒茶素藉由增加纖維母細胞中之細胞外基質(ECM)而具有增進皮膚彈性且改善皮膚皺紋之抗老化效應。

(7)細胞存活比率

在用EGCG及EGCG''3Me在各種濃度(0、0.1、1、10及50μM)下處理正常人類表皮角質細胞(NHEK)之後，48小時及72小時之後確定細胞存活比率。

在用EGCG及EGCG''3Me中之每一者處理NHEK持續48小時及72小時之後，溶解於KGM-GOLD中之50μL(2mg/mL)噻唑藍溴化四唑鎓(MTT,Sigma-Aldrich,St.Louis,MO,USA)添加至細胞中。在37℃下培育3小時之後，移除培養基且細胞之甲臢(formazan)晶體輕柔地震盪10分鐘且溶解於200μL DMSO中。在540nm下使用微板讀取器(Molecular Devices,Sunnyvale,CA,USA)量測剩餘甲臢之量。

已發現活化長壽基因XPD之表現之甲基化兒茶素顯示高於未甲基化兒茶素之細胞存活比率。詳言之，在低濃度下細胞存活比率之差異顯著較高。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及效率方面為卓越的。

又，已發現活化長壽基因Klotho之表現之甲基化兒茶素顯示高於未甲基化兒茶素之細胞存活比率。詳言之，在低濃度下細胞存活比率之差異顯著較高。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及效率方面為卓越的。

又，已發現活化長壽基因Sirt-1之表現之甲基化兒茶素顯示高於未甲基化兒茶素之細胞存活比率。詳言之，在低濃度下細胞存活比率之差異顯著較高。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及效率方面為卓越的。

又，已發現活化長壽基因ERCC8之表現之甲基化兒茶素顯示高於未甲基化兒茶素之細胞存活比率。詳言之，在低濃度下細胞存活比率之差異顯著較高。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及效率方面為卓越的。

又，已發現活化長壽基因Fox03之表現之甲基化兒茶素顯示高於未甲基化兒茶素之細胞存活比率。詳言之，在低濃度下細胞存活比率之差異顯著較高。因此，可見甲基化兒茶素在經濟及效率方面為卓越的。

(8)評估對皮膚之安全性

藉由量測調配物實例9之化妝品組合物的皮膚刺激來評估根據本發明之組合物對皮膚的安全性。

已發現，根據本發明之調配物實例9的化妝品組合物顯示卓越的對皮膚之安全性，而不會在應用該組合物之30位成年個體中的任一者中引起皮膚刺激。

下文中，描述根據本發明之組合物的調配物實例。然而，其他類型之調配物亦為可能的且本發明之範圍不受其限制。

[調配物實例1]健康食品

綠茶EGCG3''Me 1000mg

維生素混合物

礦物混合物

上文所述之維生素及礦物混合物的組成比率作為相對適合於健康食品之特定實例給出，但必要時可變化。

[調配物實例2]健康飲料

根據常見健康飲料製備方法，混合上文所述之成分且添加純化水以製得最終體積900mL。在85℃下在攪拌下加熱約1小時之後，所得溶液過濾且滅菌。組成比率作為相對適合於健康飲料之特定實例給出，但必要時可考慮到諸如特定消費者、國家、使用目的等之地區及種族偏好變化。

[調配物實例3]散劑

藉由混合20mg綠茶EGCG3''Me粉末、100mg乳糖及10mg滑石且填充於袋中來製備散劑。

[調配物實例4]錠劑

混合10mg綠茶EGCG3''Me粉末、100mg玉米澱粉、100mg乳糖及2mg硬脂酸鎂。根據常見錠劑製備方法將該混合物製備成錠劑。

[調配物實例5]膠囊

根據常見膠囊製備方法藉由混合10mg綠茶EGCG3''Me粉末、3mg結晶纖維素、14.8mg乳糖及0.2mg硬脂酸鎂且填充於明膠膠囊中來製備膠囊。

[調配物實例6]注射液

根據常見注射液製備方法藉由每個安瓿(2mL)混合10mg綠茶EGCG3''Me粉末、180mg甘露糖醇、2974mg無菌注射用蒸餾水及26mg Na₂HPO₄．12H₂O來製備注射液。

[調配物實例7]液體

根據常見液體製備方法，20mg綠茶EGCG3''Me粉末、10g高果糖玉米糖漿、5g甘露糖醇及適量純化水藉由添加至純化水中而溶解。在藉由添加純化水製得最終體積100mL之後，液體填充於棕色瓶中且接著滅菌。

[調配物實例8]軟膏

根據常見方法由以下組成製備軟膏(單位：wt%)。

[調配物實例9]滋養洗劑(牛奶洗劑)

根據常見方法用表11中所述之組合物製備滋養洗劑。

[調配物實例10]滋養乳膏

根據常見方法用表12中所述之組合物製備滋養乳膏。

【表12】

雖然已顯示且描述例示性實施例，但熟習此項技術者應瞭解，在不脫離如隨附申請專利範圍所定義的本發明精神及範圍之情況下，可對該等實施例做出各種形式變化及細節變化。另外，可做出多種修改以針對本發明之教示調適特定情形或材料而不偏離其基本範圍。因此，意欲本發明不限於作為預期用於進行本發明之最佳模式揭示的特定例示性實施例，但本發明將包括屬於隨附申請專利範圍之範圍內的所有實施例。

Claims

一種甲基化兒茶素、其鹽或其異構物作為一活性成分用於製造活化數個基因之組合物的用途，其中該些基因為XPD基因、Sirt-1基因、ERCC8基因以及FoxO3基因，且其中該甲基化兒茶素由化學式1表示：
其中R₁、R₂、R₃以及R₄中每一者獨立地為OCH₃或OH，除了其中R₁、R₂、R₃以及R₄均為OH的情形，且X₁及X₂中每一者獨立地為H或OH。
如請求項1所述之用途，其中該些基因之活化增進轉錄為mRNA。
如請求項1所述之用途，其中該甲基化兒茶素自綠茶葉萃取。
如請求項1所述之用途，其中該甲基化兒茶素為選自由EGCG3"Me(表沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、EGCG4"Me(表沒食子兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、ECG3"Me(表兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、ECG4"Me(表兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、GCG3"Me(沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)、GCG4"Me(沒食子兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)、CG3"Me(兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)以及CG4"Me(兒茶素-3-O-(4-O-甲基)沒食子酸酯)組成之群之一或多者。
如請求項4所述之用途，其中該甲基化兒茶素為EGCG3"Me(表沒食子兒茶素-3-O-(3-O-甲基)沒食子酸酯)。
如請求項1所述之用途，其中該組合物包含以該組合物之總重量計0.0001-10wt%之甲基化兒茶素、其鹽或其異構物。
如請求項1所述之用途，其中該組合物用於增進XPD蛋白、Sirt-1蛋白、ERCC8蛋白以及FoxO3蛋白之多種蛋白之表現。
如請求項1所述之用途，其中該組合物用於預防或治療XPD相關疾病、Sirt-1相關疾病、 ERCC8相關疾病以及FoxO3相關疾病中之一或多種疾病。
如請求項8所述之用途，其中該XPD相關疾病為癌症、著色性乾皮病、科凱恩症候群或毛髮低硫營養不良，該Sirt-1相關疾病為癌症、糖尿病、神經退化性疾病、肥胖、發炎疾病或過敏性呼吸道疾病，該ERCC8相關疾病為癌症或科凱恩症候群，且該FoxO3相關疾病為癌症或發炎疾病。
如請求項1所述之用途，其中該組合物為一醫藥組合物。
如請求項1所述之用途，其中該組合物為一化妝品組合物。
如請求項1所述之用途，其中該組合物為一食品組合物。