TW201819920A - 免疫學測定方法及測定試劑 - Google Patents
免疫學測定方法及測定試劑 Download PDFInfo
- Publication number
- TW201819920A TW201819920A TW106135426A TW106135426A TW201819920A TW 201819920 A TW201819920 A TW 201819920A TW 106135426 A TW106135426 A TW 106135426A TW 106135426 A TW106135426 A TW 106135426A TW 201819920 A TW201819920 A TW 201819920A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- reagent
- sulfite
- immunological measurement
- immunological
- measurement
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 175
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 title abstract description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 title 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 107
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 77
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 50
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract description 39
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 25
- -1 thiol compound Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 89
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 53
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 claims description 43
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 39
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 claims description 37
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 30
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 30
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 30
- 239000004816 latex Substances 0.000 claims description 26
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims description 26
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims description 15
- RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N thiophenol Chemical compound SC1=CC=CC=C1 RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 claims description 9
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 9
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 claims description 9
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 7
- SHLSSLVZXJBVHE-UHFFFAOYSA-N 3-sulfanylpropan-1-ol Chemical compound OCCCS SHLSSLVZXJBVHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 claims description 3
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 claims 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 abstract description 66
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 abstract description 66
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 49
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 47
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 abstract description 22
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 58
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 30
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 29
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 29
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 29
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 29
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 29
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 26
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 14
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 14
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 12
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 10
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 10
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 10
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 10
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 102000000422 Matrix Metalloproteinase 3 Human genes 0.000 description 8
- 108010016160 Matrix Metalloproteinase 3 Proteins 0.000 description 8
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 4
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 4
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 4
- 102000012406 Carcinoembryonic Antigen Human genes 0.000 description 4
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 4
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 4
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical compound [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 3
- DENMGZODXQRYAR-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethylamino)ethanethiol Chemical compound CN(C)CCS DENMGZODXQRYAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 2
- DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N phenobarbital Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002695 phenobarbital Drugs 0.000 description 2
- SUVIGLJNEAMWEG-UHFFFAOYSA-N propane-1-thiol Chemical compound CCCS SUVIGLJNEAMWEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 2
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 2
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- AOSFMYBATFLTAQ-UHFFFAOYSA-N 1-amino-3-(benzimidazol-1-yl)propan-2-ol Chemical compound C1=CC=C2N(CC(O)CN)C=NC2=C1 AOSFMYBATFLTAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVSDWRGWBWLCLS-UHFFFAOYSA-N 4-(2-hydroxyethyl)piperazine-1-sulfonic acid Chemical compound OCCN1CCN(S(O)(=O)=O)CC1 CVSDWRGWBWLCLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- PQUCIEFHOVEZAU-UHFFFAOYSA-N Diammonium sulfite Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S([O-])=O PQUCIEFHOVEZAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000004576 Placental Lactogen Human genes 0.000 description 1
- 108010003044 Placental Lactogen Proteins 0.000 description 1
- 239000000381 Placental Lactogen Substances 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000004260 Potassium ascorbate Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 235000010376 calcium ascorbate Nutrition 0.000 description 1
- 229940047036 calcium ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000011692 calcium ascorbate Substances 0.000 description 1
- GBAOBIBJACZTNA-UHFFFAOYSA-L calcium sulfite Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])=O GBAOBIBJACZTNA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000010261 calcium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- BLORRZQTHNGFTI-ZZMNMWMASA-L calcium-L-ascorbate Chemical compound [Ca+2].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] BLORRZQTHNGFTI-ZZMNMWMASA-L 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 description 1
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000000423 heterosexual effect Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004880 lymph fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 235000019275 potassium ascorbate Nutrition 0.000 description 1
- 229940017794 potassium ascorbate Drugs 0.000 description 1
- BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L potassium sulfite Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])=O BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019252 potassium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- CONVKSGEGAVTMB-RXSVEWSESA-M potassium-L-ascorbate Chemical compound [K+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] CONVKSGEGAVTMB-RXSVEWSESA-M 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5306—Improving reaction conditions, e.g. reduction of non-specific binding, promotion of specific binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本發明之目的在於提供一種即便於所測定之試樣中高濃度地含有異嗜性抗體或類風濕因子等干擾物質之情形時，亦能夠長時間充分地抑制因該等所引起之干擾作用，且不受因血紅蛋白產生之影響的免疫學測定方法及使用其之免疫學測定試劑；具體而言，本發明係關於一種免疫學測定試劑，其係含有亞硫酸鹽者，其特徵在於：將pH值設為7.4以下，且進而含有抗壞血酸或其鹽、硫醇化合物等還原性物質。
Description
本發明係關於一種於被測定物質之利用免疫學方法之測定中，能夠抑制因異嗜性抗體或類風濕因子(rheumatoid factor)等干擾物質(以下稱為干擾物質)所引起之干擾作用，而準確地測定抗原或抗體濃度之免疫學測定方法及免疫學測定試劑。
利用抗原與抗體之間之抗原抗體反應的免疫學測定方法由於能夠簡便、迅速地測定生物中之蛋白質等免疫學活性物質，故而近年來廣泛用於各種疾病之診斷。作為此種免疫學測定方法，放射免疫測定法(RIA)、酵素免疫測定法(EIA)、螢光免疫測定法(FIA)、免疫比濁法(TIA)、乳膠凝集法(LA)、免疫層析法等各種方法正得到實用化。 然而，於成為免疫學測定方法之測定對象之檢體中，有包含對抗原抗體反應產生干擾之干擾物質等之情況。若於該等抗原抗體反應中包含干擾物質，則會對測定產生影響，故而無法進行準確之測定，尤其於臨床檢查之領域無法進行準確之診斷，故而迄今為止提出有減輕或者抑制干擾物質之影響之方法。 例如，為了解決因混合存在類風濕因子所引起之干擾作用之問題，提出有預先對檢體利用會結合於人類風濕因子之結合部位之動物源抗體進行預處理而降低因類風濕因子所引起之干擾作用的免疫學測定方法(專利文獻1)、或藉由將反應液之pH值保持於4.0～6.0而抑制類風濕因子之干擾作用的免疫學測定方法(專利文獻2)等。 又，為了減輕或抑制因干擾物質所引起之干擾作用，提出有使用藉由酵素反應去除免疫學測定所使用之抗體之Fc部分而獲得之F(ab')2
的方法(專利文獻3)。然而，該免疫學測定方法僅能夠用於測定抗原之情形，而且需要用以製作F(ab')2
之酵素反應或純化等繁雜之步驟，存在成本上升或製造批次間差異之問題。 進而，亦提出有利用經聚合化或凝集之抗體分子的抑制因異嗜性抗體所引起之干擾作用之方法(專利文獻4)，但為了完全地抑制因異嗜性抗體所引起之干擾作用，需要大量之經聚合化或凝集之抗體分子，而存在成本變高之問題。 雖然該等文獻所記載之抑制因干擾物質所引起之干擾作用之方法確實改善了因干擾物質所產生之影響，但於欲測定之試樣中以高濃度含有干擾物質之情形時，抑制其干擾作用之效果並不充分。 提出有即便於欲測定之試樣中以高濃度含有干擾物質之情形時，亦能夠抑制因干擾物質所引起之干擾作用的利用亞硫酸鹽之方法(專利文獻5)。亞硫酸鹽非常廉價，即便以能夠充分地抑制高濃度之干擾物質之影響之濃度使用，亦不會使成本上升，又，有不易對抗原抗體反應產生影響之優點。 然而，亞硫酸鹽由於會因測定試劑中之溶氧或空氣中之氧氣而緩慢氧化為硫酸鹽，故而因干擾物質所引起之干擾作用之抑制效果會經時地降低。即，存在如下問題：由於為了在自動分析裝置等中使用而於開封狀態下保存於試劑庫等，故而亞硫酸鹽濃度會經時地減少，變得無法充分地抑制干擾物質之影響。 [先前技術文獻] [專利文獻] [專利文獻1]日本專利特開平7-012818號公報 [專利文獻2]日本專利特開平8-146000號公報 [專利文獻3]日本專利特開昭54-119292號公報 [專利文獻4]日本專利特開平4-221762號公報 [專利文獻5]日本專利特開2001-074739號公報
[發明所欲解決之問題] 本發明者發現：藉由將包含亞硫酸鹽之測定試劑之pH值設為7.0以下，能夠改善空氣氛圍下之亞硫酸鹽之穩定性，長時間維持因干擾物質所引起之干擾作用之抑制效果，進而能夠充分地抑制非常高濃度之異嗜性抗體之干擾作用。 然而，將包含亞硫酸鹽之測定試劑之pH值設為7.0以下時會面臨如下問題：於測定已溶血之試樣之情形時，會受到血紅蛋白之影響，無法在已溶血之試樣中進行準確之測定。 該因血紅蛋白產生之影響尤其在基於免疫凝集反應法之免疫比濁法(TIA法)或乳膠凝集法(LIA法)等不進行B/F分離(Bound/Free(束縛/自由)分離)之免疫學測定方法中成為大問題。 因此，本發明係著眼於上述現狀而完成者，其目的在於提供一種即便於所測定之試樣中高濃度地含有干擾物質之情形時，亦能夠長時間充分地抑制因該等所引起之干擾作用，且可不受因血紅蛋白產生之影響而準確地測定的免疫學測定方法及使用其之測定試劑。 [解決問題之技術手段] 本發明者為了解決上述問題而進行了努力研究，結果發現：藉由將包含亞硫酸鹽之測定試劑之pH值設為7.4以下，並進而含有抗壞血酸或其鹽、硫醇化合物等還原性物質，可長時間獲得對干擾物質之抑制效果，且能夠抑制血紅蛋白之影響，從而完成本發明。 即，本發明包含以下構成。 (1)一種免疫學測定方法，其係使用免疫學測定試劑，於亞硫酸鹽之存在下進行抗原抗體反應者，其特徵在於：免疫學測定試劑含有亞硫酸鹽及還原性物質。 (2)如(1)所記載之免疫學測定方法，其中上述還原性物質之濃度為1 mM至300 mM。 (3)如(1)或(2)所記載之免疫學測定方法，其中上述亞硫酸鹽為50 mM至600 mM。 (4)如(1)至(3)中任一項所記載之免疫學測定方法，其中含有上述亞硫酸鹽及上述還原性物質之免疫學測定試劑之pH值為5.6至7.4之範圍。 (5)如(1)至(4)中任一項所記載之免疫學測定方法，其中上述還原性物質為選自抗壞血酸或其鹽、或者硫醇化合物中之任一種以上之還原性物質。 (6)如(5)所記載之免疫學測定方法，其中上述硫醇化合物為選自2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇、2-巰基乙醇、3-巰基丙醇、二硫蘇糖醇、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸、還原型麩胱甘肽、苯硫酚中之任一種以上之硫醇化合物。 (7)如(1)至(6)中任一項所記載之免疫學測定方法，其包括如下步驟：將包含上述免疫學測定試劑之第1試劑、及包含與測定對象物進行反應之抗體或抗原或者擔載有與測定對象物進行反應之抗體或抗原之載體的第2試劑進行混合；且上述免疫學測定方法係對測定對象物進行定量或定性測定。 (8)如(1)至(7)中任一項所記載之免疫學測定方法，其中免疫學測定方法為乳膠凝集法。 (9)一種免疫學測定試劑，其特徵在於：其係用於在亞硫酸鹽之存在下進行抗原抗體反應之免疫學測定方法的試劑，且含有亞硫酸鹽及還原性物質。 (10)如(9)所記載之免疫學測定試劑，其中上述還原性物質之濃度為1 mM至300 mM。 (11)如(9)或(10)所記載之免疫學測定試劑，其中上述亞硫酸鹽為50 mM至600 mM。 (12)如(9)至(11)中任一項所記載之免疫學測定試劑，其中含有上述亞硫酸鹽及上述還原性物質之試劑之pH值為5.6至7.4之範圍。 (13)如(9)至(12)中任一項所記載之免疫學測定試劑，其中上述還原性物質為選自抗壞血酸或其鹽、或者硫醇化合物中之任一種以上之還原性物質。 (14)如(13)所記載之免疫學測定試劑，其中上述硫醇化合物為選自2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇、2-巰基乙醇、3-巰基丙醇、二硫蘇糖醇、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸、還原型麩胱甘肽、苯硫酚中之任一種以上之硫醇化合物。 (15)如(9)至(14)中任一項所記載之免疫學測定試劑，其中免疫學測定方法為乳膠凝集法。 (16)一種免疫學測定試劑套組，其包括：包含如(9)至(15)中任一項所記載之免疫學測定試劑之第1試劑、及包含與測定對象物進行反應之抗體或抗原或者擔載有與測定對象物進行反應之抗體或抗原之載體的第2試劑。 本說明書包括成為本申請之優先權基礎的日本專利申請編號2016-205056號所揭示之內容。 [發明之效果] 本發明藉由使包含亞硫酸鹽之pH值為7.4以下之免疫學測定試劑中進而含有抗壞血酸或其鹽、或者硫醇化合物等還原性物質，而提供即便於作為測定對象之試樣中以高濃度含有針對抗原抗體反應之干擾物質之情形時，亦能夠不受干擾物質之影響而進行免疫學測定的穩定性優異之免疫學測定試劑。進而，提供即便於作為測定對象之試樣中包含血紅蛋白之情形時，亦能夠精度良好地進行免疫學測定的穩定性優異之免疫學測定試劑。 而且，對藉由該免疫學測定而獲得之結果亦期待可靠性較高。
以下，對本發明之較佳之實施形態進行說明。 本發明之一實施形態係一種免疫學測定方法，其係於亞硫酸鹽之存在下，使用免疫學測定試劑進行抗原抗體反應者，且免疫學測定試劑含有亞硫酸鹽及還原性物質。 於本發明中，所謂「還原性物質」係指容易釋出氫離子(質子)之物質。 又，於本發明中，所謂「免疫學測定方法」係指使用與作為測定對象之測定對象物特異性結合之物質(例如抗體或抗原)而進行判定有無測定對象物之存在(檢測、定性測定)、或於存在測定對象物之情形時進行其存在量之測定(定量)的方法，例如可列舉三明治法、基於競爭法原理之RIA法或ELISA(enzyme linked immunosorbent assay，酵素結合免疫吸附分析)法、基於免疫凝集反應法之免疫比濁法(TIA法)或乳膠凝集法(LIA法)等。 本發明所謂「免疫學測定試劑」係用於進行抗原抗體反應之免疫學測定方法之試劑，包含亞硫酸鹽及還原性物質。進而，本發明之免疫學測定試劑能夠用作包含測定對象物質之測定試樣之預處理試劑。 所謂本發明之「預處理試劑」係用於在使用免疫學測定方法對包含測定對象物質之測定試樣進行測定前，對測定試樣進行處理之試劑，包含亞硫酸鹽及還原性物質。經預處理試劑處理之測定試樣能夠直接作為公知之免疫學測定方法之測定試樣。 本發明所使用之亞硫酸鹽可自公知者中適當選擇。作為亞硫酸鹽，例如可列舉：亞硫酸鈉、亞硫酸鉀、亞硫酸鈣、亞硫酸銨、亞硫酸氫鈉、亞硫酸氫銨等。 於本發明中，於免疫學測定試劑或預處理試劑中包含亞硫酸鹽之情形時，免疫學測定試劑或預處理試劑中之亞硫酸鹽濃度為50 mM以上，較佳為50至600 mM，更佳為100～600 mM，進而較佳為250 mM至500 mM。若亞硫酸鹽之濃度未達50 mM，則不易充分地抑制會對免疫反應產生影響之干擾物質之影響，若超過600 mM，則亦變得無法有效地抑制干擾物質之影響，又，可能因溶液之黏度上升而對測定產生不良影響。 又，本發明所使用之還原性物質亦可自公知者中適當選擇。作為還原性物質，例如可列舉：抗壞血酸或其鹽、硫醇化合物等。 抗壞血酸或其鹽可自公知者中適當選擇，例如可列舉：抗壞血酸、抗壞血酸鈉、抗壞血酸鉀、抗壞血酸鈣等。 硫醇化合物亦可自公知者中適當選擇，例如可列舉：2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇、2-巰基乙醇、3-巰基丙醇、二硫蘇糖醇、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸、還原型麩胱甘肽、苯硫酚等。 於本發明中，於免疫學測定試劑或預處理試劑中包含還原性物質之情形時，免疫學測定試劑或預處理試劑中之還原性物質濃度為1 mM以上，較佳為1～300 mM，更佳為1～100 mM，進而較佳為1～50 mM。藉由使還原性物質之濃度為1 mM以上，能夠有效地避免因血紅蛋白產生之影響，但若超過300 mM，則有對測定產生不良影響而變得無法進行準確測定之情況。 本發明之含有亞硫酸鹽及還原性物質之免疫學測定試劑或預處理試劑之pH值較佳為7.4以下，更佳為pH值5.6至pH值7.4之範圍，進而較佳為pH值6.7至pH值6.9之範圍。若pH值低於5.6，則變得容易產生蛋白質等之變性，而容易對準確測定產生影響，若pH值超過7.4，則干擾物質之影響之抑制效果變得容易經時降低。 於本發明中，視需要可添加公知之蛋白質保護劑而提高測定對象物質之穩定性。作為此種蛋白質保護劑，可列舉：白蛋白或明膠等蛋白質或合成聚合物素材、界面活性劑等。 利用本發明之含有亞硫酸鹽及還原性物質之免疫學測定試劑或預處理試劑而抑制了干擾物質之影響的試樣能夠直接藉由公知之免疫學測定方法進行測定。作為免疫學測定方法，例如可列舉：三明治法、基於競爭法原理之RIA法或ELISA法、基於免疫凝集反應法之免疫比濁法(TIA法)或乳膠凝集法(LIA法)等。 於該等免疫學測定方法中，尤其較佳為免疫比濁法或乳膠凝集法，其等係以如下作為測定原理：使測定試樣中之作為被測定物質之抗原(或抗體)與測定試劑中之抗體(或抗原)進行反應，並對其結果所產生之免疫凝集物進行檢測。 本發明之免疫學測定試劑可用於免疫比濁法或乳膠凝集法，可包括如下兩種試劑：包含緩衝液之第1試劑、及於緩衝液中包含抗體或抗原或者擔載有抗體或抗原之載體(較佳為乳膠粒子)的第2試劑。又，亦可將該等2種試劑製成免疫學測定試劑套組而提供。 作為能夠用於利用免疫比濁法或乳膠凝集法之免疫學測定試劑之緩衝液，只要能夠將pH值保持為固定，則無特別限定，可自公知者中適當選擇。例如可列舉：磷酸緩衝液、三羥甲基胺基甲烷緩衝液、古德緩衝液等。 亦可將本發明之包含亞硫酸鹽及還原性物質之免疫學測定試劑作為上述包含2種試劑之免疫比濁法或乳膠凝集法等免疫學測定方法之第1試劑。即，亦可於使用本發明之干擾物質之影響之抑制方法的第1試劑中混合測定試樣後，於該混合液中混合包含抗體(或抗原)或者擔載有抗體(或抗原)之乳膠粒子等的第2試劑而進行測定。 又，亦可於將使用本發明之干擾物質之影響之抑制方法的預處理試劑與測定試樣進行混合後，將該混合液作為ELISA法或乳膠凝集法等免疫學測定方法之測定試樣進行測定。 於本發明中，作為擔載於載體之抗體或抗原，並無特別限定，可自公知者中適當選擇。作為擔載於載體之抗體或抗原，例如可列舉：針對C反應性蛋白(CRP)、運鐵蛋白等血漿蛋白質之抗體，針對促甲狀腺激素(TSH)、甲狀腺素、胰島素、人胎盤生乳素等激素之抗體，針對癌瘤胚性抗原(CEA)、β2-微球蛋白、α-胎蛋白(AFP)等腫瘤相關物質之抗體，針對HBs抗原、HBe抗原等病毒性肝炎之抗原之抗體及針對HBs抗體、HBe抗體等病毒性肝炎之抗體之抗原，針對疱疹、麻疹、風疹等病毒、各種生物成分之抗體或抗原，針對苯巴比妥、乙醯胺酚、環孢素等各種藥劑之抗體等。 於本發明中，作為擔載抗體或抗原之載體，並無特別限定，可自公知者中適當選擇。作為擔載抗體或抗原之載體，可列舉：聚苯乙烯板、聚苯乙烯珠、乳膠粒子、金屬膠體粒子、二氧化矽膠體粒子等。 關於本發明中可使用之上述抗體，其所源自之動物種類並無特別限定，例如可列舉源自兔、山羊、小鼠、大鼠、馬、綿羊等動物之抗體，可使用由對測定對象物免疫之動物之血清獲得之多株、使對測定對象物免疫之動物之脾臟與骨髓瘤細胞進行細胞融合而獲得之單株抗體之任一者。 於本發明中，測定試樣並無特別限定，例如可列舉：血液、血清、血漿、尿、淋巴液、穿刺液、脊髓液、汗、唾液、胃液、肺灌洗液、糞便等。該等之中，尤佳為血清、血漿。根據本發明，於為血清、血漿等測定試樣溶血之情形時，能夠實現避免了血紅蛋白之影響之準確測定。 又，於本發明中，對測定對象物質亦無特別限定，例如可列舉：C反應性蛋白(CRP)、運鐵蛋白等血漿蛋白質，促甲狀腺激素(TSH)、甲狀腺素、胰島素、人胎盤生乳素等激素，癌瘤胚性抗原(CEA)、β2-微球蛋白、α-胎蛋白(AFP)等腫瘤相關物質，HBs抗原、HBe抗原等病毒性肝炎之抗原及HBs抗體、HBe抗體等病毒性肝炎之抗體，針對疱疹、麻疹、風疹等病毒、各種生物成分之抗體或抗原，苯巴比妥、乙醯胺酚、環孢素等各種藥劑等。 [實施例] 以下，基於實施例對本發明進行具體說明，但本發明並不限定於該等實施例。 實施例1 亞硫酸鹽濃度對干擾反應抑制效果之影響 評價亞硫酸鹽濃度對於因添加亞硫酸鈉而引起之干擾反應抑制的影響。又，於促進亞硫酸鹽之氧化之條件(填充至試劑容器之一半並於4℃下振盪3週)下加以保存並評價穩定性。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含0 mM、50 mM、100 mM、250 mM、350 mM、500 mM或600 mM之亞硫酸鈉的50 mM之HEPES(4-(2-hydroxyethyl)- 1-piperazineethanesulfonic acid，4-(2-羥基乙基)-1-哌乙磺酸)緩衝液(pH值7.4)。又，將所製備之第1試劑填充至試劑容器之一半，於4℃下振盪3週，而促進亞硫酸鹽因空氣中之氧氣而引起之氧化。 又，作為第2試劑，製備包含擔載有抗KL-6抗體之聚苯乙烯乳膠液的50 mM之HEPES緩衝液(pH值7.4)。 上述擔載有抗KL-6之乳膠液係藉由公知之方法而製備。即，藉由將抗KL-6抗體與聚苯乙烯乳膠加以混合，將抗KL-6抗體擔載於聚苯乙烯乳膠表面而製備。 (2)測定試樣 以類風濕因子(RF)濃度成為0、100、200、300、400、500或1000 IU/mL之方式於混合血清中添加Interference Check RF Plus(Sysmex股份有限公司)而製備RF試樣。 (3)評價方法 於上述RF試樣2.0 μL中混合第1試劑120 μL，於37℃下培養5分鐘後，於該混合液中混合第2試劑40 μL，於37℃下進行反應，測定於混合第2試劑後約5分鐘之660 nm之吸光度變化。再者，一系列之測定係使用日立7180型自動分析裝置(日立高新技術股份有限公司)而進行。 為了對KL-6之濃度進行定量，根據測定KL-6之標準物質所獲得之校準曲線而算出血清檢體中之KL-6濃度。將剛製備後之結果示於表1，將促進了亞硫酸鹽之氧化之情形之結果示於表2。 [表1]
[表2]
由表1得知：於亞硫酸鹽濃度為50 mM以上時，可見因RF引起之干擾反應之抑制效果，於亞硫酸鹽濃度為50 mM時，亦能夠將因RF引起之干擾反應抑制為未添加亞硫酸鹽時(0 mM)之約1/2。又，得知干擾反應之抑制效果依存於亞硫酸鹽濃度而提高，於亞硫酸鹽濃度為250 mM至500 mM時抑制效果最大，於亞硫酸鹽濃度為600 mM時有所降低。亞硫酸鹽濃度較佳為50 mM以上，進而較佳為100 mM至600 mM，最佳為250～500 mM。 又，由表1與表2得知：於亞硫酸鹽濃度為50 mM之情形時，因亞硫酸鹽之氧化，故而干擾反應之抑制效果降低。亞硫酸鹽之氧化對干擾反應之抑制效果之影響依存於亞硫酸鹽濃度而減輕，於亞硫酸鹽濃度為250 mM至500 mM時影響最小，穩定性提高，但於亞硫酸濃度為600 mM之情形時，因亞硫酸鹽之氧化，故而干擾反應之抑制效果降低。 實施例2 pH值對亞硫酸鹽抑制干擾反應之影響 將亞硫酸鈉設為250 mM，評價pH值對抑制干擾物質之干擾反應之影響。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM亞硫酸鈉的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6.4或6.8)或50 mM之HEPES緩衝液(pH值7.4、7.8或8.2)。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 除了以類風濕因子濃度成為0、100、200、300、400、或500 IU/mL之方式於混合血清中添加Interference Check RF Plus(Sysmex股份有限公司)製備RF試樣所獲得之RF試樣，將正常檢體(異嗜性抗體及RF陰性之人血清試樣)及異常檢體(異嗜性抗體及RF陽性之人血清試樣)作為測定試樣。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將RF試樣之結果示於表3，將人血清試樣之結果示於表4。 [表3]
[表4]
由表3明確：因亞硫酸鹽所產生之RF之干擾反應之抑制效果於pH值為7.8以上時，pH值越高，越明顯降低，測定值之正誤差擴大。但是，pH值為7.4以下時因亞硫酸鹽所產生之RF之干擾反應之抑制效果未見較大差異。 又，由表4得知：於正常檢體中幾乎未見pH值對因亞硫酸鹽引起之干擾反應抑制產生影響。相對於此，於存在干擾物質之異常檢體中，pH值越高，亞硫酸鹽之干擾反應之抑制效果越明顯降低，測定值越為高值，但pH值為6.4及6.8時之測定值之變動較小，有效地抑制了干擾反應。 實施例3 含亞硫酸鹽之試劑之pH值對血紅蛋白影響之影響 將亞硫酸鈉設為250 mM，評價pH值對血紅蛋白(Hb)影響、及類風濕因子之干擾反應之抑制的影響。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6.7)或50 mM之HEPES緩衝液(pH值7.4)。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 以類風濕因子濃度成為0、100、200、300、400、500或1000 IU/mL之方式於混合血清中添加Interference Check RF Plus(Sysmex股份有限公司)而製備RF試樣。又，以血紅蛋白濃度成為0、100、200、300、400、500、600、800或1000 mg/dL之方式於混合血清中添加Interference Check A Plus溶血血紅蛋白(Sysmex股份有限公司)而製備Hb試樣。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將結果示於表5。 [表5]
由表5明確：含有亞硫酸鹽之試劑之pH值為7.4之情形時可見因RF所引起之干擾反應，相對於此，於pH值為6.7時，因RF所引起之干擾反應得到抑制。相對於此，於pH值為7.4時未見血紅蛋白對測定值之影響，相對於此，於pH值為6.7時可見依存於血紅蛋白濃度之正向影響。 實施例4 血紅蛋白之影響原因之確認 將亞硫酸鈉濃度設為250 mM，評價pH值對血紅蛋白之吸收光譜之影響。 (1)試劑 第1試劑與實施例3相同。作為第2試劑，準備自實施例1之組成去除擔載有抗KL-6抗體之乳膠而成者。 (2)測定試樣 以血紅蛋白濃度成為500 mg/dL之方式於混合血清中添加Interference Check A Plus溶血血紅蛋白(Sysmex股份有限公司)而製備Hb試樣。 (3)評價方法 於Hb試樣10 μL中添加第1試劑600 μL，於該混合物中添加第2試劑後，利用SHIMADZU UV-2600(島津製作所股份有限公司)於波長800 nm至400 nm下測定吸收光譜。結束吸收光譜測定後，將混合液以37℃加溫，加溫開始5分鐘後，於波長800 nm至400 nm下測定吸收光譜，其後每隔5分鐘於波長800 nm至400 nm下測定吸收光譜。將結果示於圖1及圖2。 由圖1明確：於含有亞硫酸鹽之第1試劑之pH值為7.4之情形時，未見血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。相對於此，如圖2得知：於含有亞硫酸鹽之第1試劑之pH值為6.7之情形時，血紅蛋白之吸收光譜經時變化。該血紅蛋白之吸收光譜之經時變化對免疫比濁法或乳膠凝集法等不進行B/F分離之免疫學測定方法之測定值產生影響，顯示出對測定值產生影響之原因為血紅蛋白。 實施例5 還原性物質對血紅蛋白影響之效果 將亞硫酸鈉設為250 mM、將pH值設為6.7，評價還原性物質之抗壞血酸鈉(AA)、2-巰基乙基胺(2-MEA)、2-二甲基胺基乙硫醇(2-DAET)、及二硫蘇糖醇(DTT)之效果。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉、及10 mM之還原性物質(DTT為5 mM)的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6.7)。又，作為比較例，亦製備未添加還原性物質者。進而，關於抗壞血酸鈉及2-巰基乙基胺，亦製備去除亞硫酸鈉所得者。 第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 與實施例3同樣地進行製備。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將結果示於表6及表7。 [表6]
[表7]
由表6明確：即便於含有亞硫酸鈉之第1試劑中添加抗壞血酸鈉、2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇或二硫蘇糖醇，亦與比較例同樣地未見因RF所引起之干擾反應。相對於此，於不含亞硫酸鈉而單獨使用抗壞血酸鈉或2-巰基乙基胺之情形時，可見因RF所引起之干擾反應。 由表7可明確：比較例明顯受到血紅蛋白之影響，相對於此，藉由添加抗壞血酸鈉、2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇或二硫蘇糖醇等還原性物質，血紅蛋白之影響得到抑制。於單獨使用抗壞血酸鈉時雖然可見血紅蛋白之影響，但令人驚奇的是藉由與同樣地單獨添加時可見血紅蛋白之影響之亞硫酸鹽(比較例)組合，能夠抑制血紅蛋白之影響。 實施例6 還原性物質之添加效果之確認 將亞硫酸鈉濃度設為250 mM、將pH值設為6.7，評價還原性物質之抗壞血酸鈉(AA)、2-巰基乙基胺(2-MEA)、2-二甲基胺基乙硫醇(2-DAET)、二硫蘇糖醇(DTT)、2-巰基乙醇(2-ME)、半胱胺酸或還原型麩胱甘肽對血紅蛋白之吸收光譜之效果。 (試劑) 作為第1試劑，除實施例5以外，亦製備分別添加2-巰基乙醇、半胱胺酸或還原型麩胱甘肽10 mM而成者。第2試劑與實施例4相同。 (2)測定試樣 與實施例4同樣地進行製備。 (3)評價方法 與實施例4同樣地測定血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。將結果示於圖3至圖10。 由圖3至圖9可明確：於第1試劑中除亞硫酸鈉以外亦包含抗壞血酸鈉、2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇、二硫蘇糖醇、2-巰基乙醇、半胱胺酸或還原型麩胱甘肽等還原性物質之情形時，血紅蛋白之吸收光譜未經時變化而穩定。相對於此，若不添加亞硫酸鈉而單獨添加抗壞血酸鈉(圖10)，則可見血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 實施例7 添加有亞硫酸鹽及2-巰基乙基胺之組成中之pH值影響 將亞硫酸鈉設為250 mM、將2-巰基乙基胺設為10 mM，評價pH值對類風濕因子之干擾反應或血紅蛋白影響之影響。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM亞硫酸鈉、10 mM之2-巰基乙基胺的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6.0、6.2、6.7或6.9)或50 mM之HEPES緩衝液(pH值7.4或8.0)。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 以類風濕因子濃度成為0、250或500 IU/mL之方式於混合血清中添加Interference Check RF Plus(Sysmex股份有限公司)而製備RF試樣。又，以血紅蛋白濃度成為0、250或500 mg/dL之方式於混合血清中添加Interference Check A Plus溶血血紅蛋白(Sysmex股份有限公司)而製備Hb試樣。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將結果示於表8及表9。 [表8]
[表9]
由表8明確：於pH值為6.0至7.4時，類風濕因子之干擾反應得到抑制，相對於此，於pH值為8.0時，依存於RF濃度而可見類風濕因子之干擾反應，亞硫酸鹽之干擾反應之抑制效果降低。 又，由表9明確：藉由向亞硫酸鹽中添加2-巰基乙基胺，於pH值6.0至8.0之範圍內，血紅蛋白之影響得到抑制。於亞硫酸鹽中混合有2-巰基乙基胺之免疫學測定試劑之pH值較佳為7.4以下。 實施例8 添加有亞硫酸鹽及抗壞血酸鹽之組成中之pH值影響 將亞硫酸鈉設為250 mM、將抗壞血酸鈉設為10 mM，評價pH值對類風濕因子之干擾反應及血紅蛋白影響之影響。又，於抑制亞硫酸鹽或抗壞血酸鹽之氧化之條件(填滿試劑容器並於4℃下靜置)、及促進氧化之條件(填充至試劑容器之一半並於4℃下振盪3週)下進行保存，評價亞硫酸鹽或抗壞血酸鹽之氧化之影響。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉、10 mM之抗壞血酸鈉的50 mM之PIPES緩衝液(pH值5.6、6.0、6.2、6.4、6.7或6.9)或50 mM之HEPES緩衝液(pH值7.2或7.4)。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 以類風濕因子濃度成為0、100、200、300、400或500 IU/mL之方式於混合血清中添加Interference Check RF Plus(Sysmex股份有限公司)而製備RF試樣。又，以血紅蛋白濃度成為0、100、200、300、400或500或500mg/dL之方式於混合血清中添加Interference Check A Plus溶血血紅蛋白(Sysmex股份有限公司)而製備Hb試樣。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將結果示於表10及表11。 [表10]
[表11]
由表10明確：於pH值為5.6至7.4之pH值範圍內，類風濕因子之干擾反應得到抑制，但於pH值為7.2以上時，抑制效果降低。但是，於pH值為5.6至7.4之pH值範圍內，即便於促進亞硫酸鹽及抗壞血酸鹽之氧化之保存條件下，亦未見類風濕因子之干擾反應之抑制效果之降低。 又，由表11明確：未見pH值對血紅蛋白影響之影響，又，亦未見因保存條件引起之差異。於亞硫酸鹽中混合有抗壞血酸鹽之免疫學測定試劑之pH值較佳為7.4以下，更佳為pH值5.6至7.4，進而較佳為pH值5.6至6.9。 實施例9 硫醇化合物之濃度之影響 將亞硫酸鈉設為250 mM、將pH值設為6.7，評價2-巰基乙基胺濃度對類風濕因子之干擾反應及血紅蛋白影響之影響。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉、0(比較例)、10、50、或100 mM之2-巰基乙基胺的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6、7)。進而，關於添加有10 mM及50 mM之2-巰基乙基胺的試劑，亦製備去除亞硫酸鈉所得者。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 與實施例8同樣地進行製備。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將結果示於表12及表13。 [表12]
[表13]
由表12明確：於亞硫酸鹽中混合有2-巰基乙基胺之情形時，未見2-巰基乙基胺之濃度對於類風濕因子之干擾反應抑制產生影響。相對於此，於未添加亞硫酸鹽而單獨添加2-巰基乙基胺之試劑中，可見因濃度引起之差異，於10 mM時可見因類風濕因子所引起之干擾反應。 由表13明確：於未混合2-巰基乙基胺之比較例中，可見血紅蛋白之影響，相對於此，於亞硫酸鹽中混合有2-巰基乙基胺之情形時，未見血紅蛋白之影響，亦未見2-巰基乙基胺之濃度之影響。 實施例10 抗壞血酸濃度 將亞硫酸鈉設為250 mM、將pH值設為6.7，評價抗壞血酸濃度對血紅蛋白影響之影響。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉、1、2、5、10、30、50、100或300 mM之抗壞血酸鈉的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6.7)。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 與實施例8之Hb試樣同樣地進行製備。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣，評價抗壞血酸鈉濃度對血紅蛋白(Hb)影響之影響。將結果示於表14。 [表14]
由表14明確：於未添加抗壞血酸時可見之血紅蛋白之影響能夠藉由添加1 mM以上之抗壞血酸鈉而完全得到抑制。又，得知即便於添加300 mM之情形時，亦能夠準確地進行測定。 實施例11 還原性物質添加濃度之下限之確認 將亞硫酸鈉濃度設為250 mM、將pH值設為6.7，藉由對於血紅蛋白之吸收光譜之經時變化的效果而評價還原性物質之抗壞血酸鈉、或2-巰基乙基胺(2-MEA)之添加濃度之下限。 (試劑) 將抗壞血酸鈉濃度設為0.01 mM或0.1 mM、將2-巰基乙基胺濃度設為0.1 mM或1.0 mM，與實施例5同樣地製備第1試劑。第2試劑與實施例4相同。 (2)測定試樣 與實施例4同樣地進行製備。 (3)評價方法 與實施例4同樣地測定血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。將結果示於圖11至圖14。 由圖13至圖14得知：於添加1 mM之2-巰基乙基胺時，血紅蛋白之吸收光譜之經時變化得到抑制。又，根據圖12，於添加有0.1 mM之抗壞血酸鈉時，雖然可見若干血紅蛋白之吸收光譜之經時變化，但與相同濃度之2-巰基乙基胺相比，經時變化較小，因此認為於與2-巰基乙基胺同樣地添加1 mM時，血紅蛋白之吸收光譜之經時變化得到抑制。 實施例12 含有亞硫酸鹽及抗壞血酸鹽之試劑之穩定性之評價 將添加有亞硫酸鈉及抗壞血酸之第1試劑於4℃下保存12個月後，以剛製備後之第1試劑作為對照，測定包含干擾物質之人血清檢體，並評價干擾反應之抑制效果之穩定性。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉、10 mM之抗壞血酸鈉的50 mM之PIPES緩衝液(6.7)。又，亦製備自上述組成去除抗壞血酸鈉所得之第1試劑。第2試劑與實施例1相同。 (2)測定試樣 將包含異嗜性抗體(HARA(human anti-rabbit antibody，人抗兔抗體)、HAGA(human anti-goat antibody，人抗山羊抗體)、HAMA(human anti-mouse antibody，人抗小鼠抗體)或HAHA(human anti-human antibody，人抗人抗體))及/或類風濕因子之人血清檢體作為試樣。 (3)評價方法 與實施例1同樣地測定試樣。將結果示於表15。 [表15]
根據表15，於4℃下保存12個月之第1試劑中之包含異嗜性抗體及/或類風濕因子之血清檢體之測定值與剛製備後之第1試劑中之測定值相同，即便於4℃下保存12個月，亦未見干擾反應之抑制效果之降低，長時間穩定。又，雖然亦未見因有無抗壞血酸鈉所產生之穩定性差異，但於不含抗壞血酸之情形時，如實施例5等所示受到血紅蛋白之影響。 實施例13 利用MMP-3(matrix metalloproteinase-3，基質金屬蛋白酶-3)測定試劑時之效果 進而，將測定對象物質變為MMP-3，確認本發明之效果。 (1)試劑 作為第1試劑，製備包含250 mM之亞硫酸鈉、10 mM之抗壞血酸鈉的50 mM之PIPES緩衝液(pH值6.7)。又，亦製備自上述組成去除抗壞血酸鈉所得之第1試劑、及將去除上述抗壞血酸鈉所得之第1試劑之PIPES緩衝液(pH值6.7)換為HEPES緩衝液(pH值7.4)而成者。 作為第2試劑，製備包含擔載有抗MMP-3抗體之聚苯乙烯乳膠液的50 mM之HEPES緩衝液(pH值7.4)。 上述擔載有抗MMP-3之乳膠液係藉由公知方法而製備。即，藉由將抗MMP-3抗體與聚苯乙烯乳膠加以混合，將抗MMP-3抗體擔載於聚苯乙烯乳膠表面而製備。 (2)測定試樣 製備異嗜性抗體或類風濕因子陽性之人血清檢體，並與實施例8同樣地製備Hb試樣。 (3)評價方法 於試樣2.4 μL中混合第1試劑120 μL，並於37℃下培養5分鐘後，於該混合液中混合第2試劑40 μL，並於37℃下進行反應，測定混合第2試劑後約5分鐘之主波長570 nm及副波長800 nm之兩種波長下之吸光度變化。再者，一系列之測定係使用日立7180型自動分析裝置(日立高新技術股份有限公司)而進行。 為了對MMP-3之濃度進行定量，根據測定MMP-3之標準物質所獲得之校準曲線而算出試樣中之MMP-3濃度。將結果示於表16及表17。 [表16]
[表17]
由表16明確：無論有無抗壞血酸鈉，藉由將第1試劑之pH值設為6.7，均能夠抑制因干擾物質所引起之干擾反應，相對於此，若將第1試劑之pH值設為7.4，則對於以高濃度包含干擾物質之血清(血清1、血清2、血清12及血清14)，無法充分地抑制因干擾物質所引起之干擾反應，MMP-3測定值變成高值。 由表17明確：關於MMP-3，亦於將第1試劑之pH值設為6.7且不添加抗壞血酸鹽之情形時，可見血紅蛋白之影響，相對於此，藉由添加抗壞血酸鹽，能夠抑制血紅蛋白之影響。 [產業上之可利用性] 如上所述，根據本發明，可提供即便於測定之試樣中高濃度地含有異嗜性抗體或類風濕因子等干擾物質之情形時，亦能夠長時間充分地抑制因該等所引起之干擾作用，且可不受因血紅蛋白產生之影響而準確地對測定對象物進行測定的免疫學測定方法及免疫學測定試劑。 本說明書中所引用之所有出版物、專利及專利申請係直接藉由引用而併入至本說明書中。
圖1表示第1試劑之pH值為7.4時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖2表示第1試劑之pH值為6.7時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖3表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之抗壞血酸鈉時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖4表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之2-巰基乙基胺時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖5表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之2-二甲基胺基乙硫醇時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖6表示第1試劑之pH值為6.7且添加有5 mM之二硫蘇糖醇時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖7表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之2-巰基乙醇時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖8表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之半胱胺酸時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖9表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之還原型麩胱甘肽時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖10表示第1試劑之pH值為6.7且添加有10 mM之抗壞血酸鈉並將亞硫酸鹽鈉去除時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖11表示第1試劑之pH值為6.7且添加有0.01 mM之抗壞血酸鈉時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖12表示第1試劑之pH值為6.7且添加有0.1 mM之抗壞血酸鈉時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖13表示第1試劑之pH值為6.7且添加有0.1 mM之2-巰基乙基胺時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。 圖14表示第1試劑之pH值為6.7且添加有1 mM之2-巰基乙基胺時之血紅蛋白之吸收光譜之經時變化。
Claims (16)
- 一種免疫學測定方法，其係使用免疫學測定試劑，於亞硫酸鹽之存在下進行抗原抗體反應者，其特徵在於：免疫學測定試劑含有亞硫酸鹽及還原性物質。
- 如請求項1之免疫學測定方法，其中上述還原性物質之濃度為1 mM至300 mM。
- 如請求項1或2之免疫學測定方法，其中上述亞硫酸鹽為50 mM至600 mM。
- 如請求項1至3中任一項之免疫學測定方法，其中含有上述亞硫酸鹽及上述還原性物質之免疫學測定試劑之pH值為5.6至7.4之範圍。
- 如請求項1至4中任一項之免疫學測定方法，其中上述還原性物質為選自抗壞血酸或其鹽、或者硫醇化合物中之任一種以上之還原性物質。
- 如請求項5之免疫學測定方法，其中上述硫醇化合物為選自2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇、2-巰基乙醇、3-巰基丙醇、二硫蘇糖醇、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸、還原型麩胱甘肽、苯硫酚中之任一種以上之硫醇化合物。
- 如請求項1至6中任一項之免疫學測定方法，其包括如下步驟：將包含上述免疫學測定試劑之第1試劑、及包含與測定對象物進行反應之抗體或抗原或者擔載有與測定對象物進行反應之抗體或抗原之載體的第2試劑進行混合；且上述免疫學測定方法係對測定對象物進行定量或定性測定。
- 如請求項1至7中任一項之免疫學測定方法，其中免疫學測定方法為乳膠凝集法。
- 一種免疫學測定試劑，其特徵在於：其係用於在亞硫酸鹽之存在下進行抗原抗體反應之免疫學測定方法的試劑，且含有亞硫酸鹽及還原性物質。
- 如請求項9之免疫學測定試劑，其中上述還原性物質之濃度為1 mM至300 mM。
- 如請求項9或10之免疫學測定試劑，其中上述亞硫酸鹽為50 mM至600 mM。
- 如請求項9至11中任一項之免疫學測定試劑，其中含有上述亞硫酸鹽及上述還原性物質之試劑之pH值為5.6至7.4之範圍。
- 如請求項9至12中任一項之免疫學測定試劑，其中上述還原性物質為選自抗壞血酸或其鹽、或者硫醇化合物中之任一種以上之還原性物質。
- 如請求項13之免疫學測定試劑，其中上述硫醇化合物為選自2-巰基乙基胺、2-二甲基胺基乙硫醇、2-巰基乙醇、3-巰基丙醇、二硫蘇糖醇、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸、還原型麩胱甘肽、苯硫酚中之任一種以上之硫醇化合物。
- 如請求項9至14中任一項之免疫學測定試劑，其中免疫學測定方法為乳膠凝集法。
- 一種免疫學測定試劑套組，其包括：包含如請求項9至15中任一項之免疫學測定試劑之第1試劑、及包含與測定對象物進行反應之抗體或抗原或者擔載有與測定對象物進行反應之抗體或抗原之載體的第2試劑。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP??2016-205056 | 2016-10-19 | ||
| JP2016205056 | 2016-10-19 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW201819920A true TW201819920A (zh) | 2018-06-01 |
| TWI799394B TWI799394B (zh) | 2023-04-21 |
Family
ID=62019425
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW106135426A TWI799394B (zh) | 2016-10-19 | 2017-10-17 | 免疫學測定方法及測定試劑 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP3531130B1 (zh) |
| JP (1) | JP6782785B2 (zh) |
| KR (1) | KR102181485B1 (zh) |
| CN (1) | CN109716132B (zh) |
| TW (1) | TWI799394B (zh) |
| WO (1) | WO2018074467A1 (zh) |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2013211B (en) | 1978-01-26 | 1982-06-30 | Technicon Instr | Immunoassays using f(ab')2 fragments |
| JPS55116259A (en) * | 1979-03-01 | 1980-09-06 | Fuji Photo Film Co Ltd | Microimmunoassay method |
| US4837395A (en) * | 1985-05-10 | 1989-06-06 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Single step heterogeneous assay |
| JPH0762683B2 (ja) * | 1988-04-01 | 1995-07-05 | 明治製菓株式会社 | 安定なラテックス試薬 |
| JPH04221762A (ja) | 1990-12-25 | 1992-08-12 | Konica Corp | 免疫学的測定法 |
| US5208166A (en) * | 1991-02-28 | 1993-05-04 | Saunders Mary S | Reactive chitosan coated articles and test kit for immunoassay |
| JPH0712818A (ja) | 1993-06-25 | 1995-01-17 | Hitachi Chem Co Ltd | 免疫学的検出方法 |
| JP3423085B2 (ja) | 1994-11-17 | 2003-07-07 | 積水化学工業株式会社 | 免疫測定法 |
| JP4278123B2 (ja) | 1999-09-06 | 2009-06-10 | 栄研化学株式会社 | 免疫学的測定方法、免疫反応干渉物質の除去方法および測定試薬 |
| JP2001255325A (ja) * | 2000-03-07 | 2001-09-21 | Internatl Reagents Corp | 免疫学的測定法及び試薬 |
| JP4390963B2 (ja) * | 2000-04-05 | 2009-12-24 | シスメックス株式会社 | 免疫測定方法及び試薬キット |
| JP4507439B2 (ja) * | 2001-04-06 | 2010-07-21 | 日東紡績株式会社 | ラテックス免疫比濁測定法及びそれに用いるキット |
| WO2008039266A2 (en) * | 2006-07-28 | 2008-04-03 | Beckman Coulter, Inc. | Stabilizing agents and capture ligands for use in assays measuring analyte concentrations |
| JP2009174871A (ja) * | 2008-01-21 | 2009-08-06 | Fujifilm Corp | 免疫学的検出方法 |
| EP2360471B1 (en) * | 2008-12-11 | 2017-02-15 | Sekisui Medical Co., Ltd. | Method for pre-treating sample containing glycated hemoglobin |
| CN104360076B (zh) * | 2014-11-17 | 2016-03-30 | 福州大学 | 基于酶诱导亚硫酸根作为激活剂的免疫分析方法 |
| JP6470626B2 (ja) | 2015-04-27 | 2019-02-13 | トヨタホーム株式会社 | 半地下構造の居室壁構造 |
-
2017
- 2017-10-17 KR KR1020197009366A patent/KR102181485B1/ko active Active
- 2017-10-17 CN CN201780057194.0A patent/CN109716132B/zh active Active
- 2017-10-17 JP JP2018546356A patent/JP6782785B2/ja active Active
- 2017-10-17 EP EP17861349.3A patent/EP3531130B1/en active Active
- 2017-10-17 TW TW106135426A patent/TWI799394B/zh active
- 2017-10-17 WO PCT/JP2017/037517 patent/WO2018074467A1/ja not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3531130B1 (en) | 2022-04-13 |
| KR20190043594A (ko) | 2019-04-26 |
| KR102181485B1 (ko) | 2020-11-23 |
| CN109716132B (zh) | 2022-03-01 |
| JP6782785B2 (ja) | 2020-11-11 |
| EP3531130A1 (en) | 2019-08-28 |
| TWI799394B (zh) | 2023-04-21 |
| EP3531130A4 (en) | 2020-06-24 |
| CN109716132A (zh) | 2019-05-03 |
| JPWO2018074467A1 (ja) | 2019-07-25 |
| WO2018074467A1 (ja) | 2018-04-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI832901B (zh) | 血紅素之測定試劑、測定套組及測定方法 | |
| CN101755207B (zh) | 血红蛋白及血红蛋白衍生物的测定方法、测定试剂盒 | |
| WO2014112318A1 (ja) | 検体中のヘモグロビンA1cの免疫測定方法 | |
| CN101310186B (zh) | 测定抗原的方法和用于其的试剂盒 | |
| JP2016031250A (ja) | 標的タンパク質の測定試薬および該試薬を用いた測定方法 | |
| CN107490696A (zh) | 一种视黄醇结合蛋白检测试剂盒及检测方法 | |
| KR102181485B1 (ko) | 면역학적 측정 방법 및 측정 시약 | |
| JP5177677B2 (ja) | 抗原およびその抗原に対する抗体を測定する方法、並びにそれに用いる測定用試薬 | |
| CN107449919B (zh) | 一种c-反应蛋白检测试剂盒及检测方法 | |
| JP3220546B2 (ja) | 免疫複合体存在下の抗原または抗体の測定方法 | |
| JP4278123B2 (ja) | 免疫学的測定方法、免疫反応干渉物質の除去方法および測定試薬 | |
| JP4507439B2 (ja) | ラテックス免疫比濁測定法及びそれに用いるキット | |
| JP6857939B2 (ja) | 免疫学的測定方法および測定試薬 | |
| CN107478853A (zh) | 一种载脂蛋白b检测试剂盒及检测方法 | |
| JPH04329357A (ja) | 免疫学的測定方法 | |
| TW201932838A (zh) | 將血紅素與血紅素結合球蛋白之複合體安定化之方法、及用以保存含有血紅素之檢體之保存溶液 | |
| JP2012078161A (ja) | 試料中の測定対象物質の測定方法、測定試薬及び測定値差の改善方法 | |
| JP2006105910A (ja) | 標的物質の測定方法および測定試薬 | |
| WO2024053586A1 (ja) | 遊離ヘモグロビン測定試薬、遊離ヘモグロビン測定方法および抗ヘモグロビン抗体 | |
| JP3041382B2 (ja) | 免疫学的測定法 | |
| CN107490697A (zh) | 一种前白蛋白检测试剂盒及检测方法 | |
| WO2024038863A1 (ja) | 免疫分析方法及び試薬 | |
| CN117192134A (zh) | 一种氧化型低密度脂蛋白的检测试剂盒、检测方法 | |
| JP2005241325A (ja) | リポカリン型プロスタグランジンｄ合成酵素の定量方法及び定量用試薬 | |
| JP2005049264A (ja) | 標的物質の測定方法および測定試薬 |