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TW200800229A - Nanosized carotenoid cyclodextrin complexes - Google Patents

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TW200800229A
TW200800229A TW095137067A TW95137067A TW200800229A TW 200800229 A TW200800229 A TW 200800229A TW 095137067 A TW095137067 A TW 095137067A TW 95137067 A TW95137067 A TW 95137067A TW 200800229 A TW200800229 A TW 200800229A
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TW
Taiwan
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cyclodextrin
composition
carotenoid
fish oil
final blend
Prior art date
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TW095137067A
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English (en)
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TWI462740B (zh
Inventor
Carsten R Smidt
Mark R Bartlett
Angela Mastaloudis
Stephen J Poole
Original Assignee
Nse Products Inc
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Filing date
Publication date
Application filed by Nse Products Inc filed Critical Nse Products Inc
Publication of TW200800229A publication Critical patent/TW200800229A/zh
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Description

200800229 九、發明說明： ^ t申請案主張於2005年10月5日提申之美國臨時申 清案第60/724,051號之利益。 【發明所屬之技術領域】 曰本發明係相關於提高由含有類胡蘿蔔素之營養調配物 所提供之類胡蘿蔔的生物利用度的組成物及相關方法。因 此，本發明涉及化學、食品科學、生物學及營養學領域。 【先前技術】
類胡蘿蔔素係一種具高度有色的油溶性植物色素，其 營養與健康上的優點已為眾所周#。類胡蘿蔔素之相關優 點包含抗氧化活性和可轉化成維生素A。研究指出在飲食 攝取較高的類胡蘿蔔素，可提供保護以對抗某些癌症、黃 斑部病變、白内障、心臟疾病及其他與抗氧化或自由基損 害相關之健康狀態的發展。由於與類胡蘿蔔素相關的顯著 且合意的健康利S ’營養公司已迅速在市場上銷售含有類 胡蘿蔔素的產品。遺憾的是，類胡蘿蔔素不能立即溶解於 腸液中，因此身體對其之吸收通常是相當低的。 因此，持續在尋找改善類胡蘿_素及其他營養素之吸 收與生物利用度的方法與系統。 【發明内容】 因此，本發明係提供增進營養素，特別是類胡蘿葡素 的生物利用度的方法及組成物，其主要是經由特殊之製造 技術。 本發明的-具體實例中，包含一種製造含有類胡蘿f 5 200800229 ^之呂養補充品的方法。該方法包含在50°C時將一定量的 ^十月精與水混合以形成一水/環糊精衆狀物；將一定量之至 > I種的類胡蘿蔔素與該水/環糊精漿狀物摻合，以形成含 有％糊精類胡蘿蔔素複合物的預摻合組成物；對該預摻合 、且成物抽真空且徹底混合該預摻合組成物最少1小時；在 〃 下使該未乾燥之預摻合組成物與額外的營養成分在約 40 C至約45 C的溫度下混合以形成一最終摻合物；在真空 下研磨该最終摻合物；將該經研磨的最終摻合物裝入膠囊 内。 在本發明的一方面，該環糊精係為一 環糊精。在本 發明的另一方面，該至少一種類胡蘿蔔素係選自由還原蝦 紅素（astaxanthin)、番茄紅素（lyCOpene)、玉米黃素 (zeaxanthin)、β-胡蘿蔔素及其組合所組成之族群。在本發 明的另一方面，可將額外的營養成分併入組成物中，包含 魚油、蜜蝶、維生素A、維生素Ε、葉黃素（lutein)、填蝦 油（krill oil)及其組合。 在本發明的另一具體實例，為一製造含有類胡蘿蔔素 的營養補充品，包含在一摻合裝置中加熱一定量的水至5〇 C ;使一定量的環糊精與水混合以形成水/環糊精漿狀物； 將 疋里的至J 一種類胡蘿fc素與該水/壞糊精浆狀物捧合 以形成一含有環糊精類胡蘿蔔素複合物的預摻合組成物； 將該預摻合組成物抽真空並在一單獨的混合容器内徹底混 合該預摻合組成物最少1小時；經由在6 0 °C下混合一定量 的魚油直至徹底混合，而後冷卻至40-45。(：以形成魚油摻 6 200800229 合物’在真空下將未乾燥的預捧人細 幻預摻口組成物與魚油/蜂蠟摻合 物於約40-45。(：的溫度混合以 蜂良^ 取取〜摻合物；視需要掺 合額外的營養成分至最終捧合物内，冷卻最終捧合混合物 將該經研磨的最終播合物裝入膠囊内。 【實施方式】 定義 下列名詞係依據下述定義使 在描述及主張本發明時
用〇 除非文中另有明確指示，該單數型態，，_，，及，，咳，，係包 含複數型態之所指對卜因此，舉例而言，含有，，一種環糊 楕成分”之營養補充品指的是包含一或多種環糊精成分，而 所指”該類胡蘿銷素，，包含指的是一或多種類胡蘿葡素。 在此所使用的，，個體（subject)”係指哺乳動物，其可自 所給予之本發明營養補充品或方法獲得益處。個體之例子 包含人類，及也可包含其他動物，例如馬、豬、牛、狗、 書苗、兔子及水生哺乳動物。 ^在此所使用的，，調配物，，及，，組成物”可交替使用，且係 私一或多種化合物、元素或分子的混合物。 μ 在此所使用的，”單一劑量”係指一或多種膠囊傳遞單 位’其可將欲量的類胡蘿蔔素傳遞給一個體。 t在此所使用的，，有效量，’及，，足夠量，，可交替使用，且係 成分的一定量，當其被包含在一咀嚼組成物中時，足 以達到一預期的組合或生理效果。舉例而言，”足夠量，，的 7 200800229 類胡蘿蔔素抽出物係為要具有營養效果所需的最小數量。 另外’治療有效量”係指足以達到所欲生理效果的類胡蘿 蔔素的量。有效量的決定為製藥、營養食品、製草藥、化 妝品及醫藥科學技術領域中的一般技藝人士所熟知的。舉 例而言，參見 Meiner 及 Tonascia 所著之，，Clinical Trails:
Design, Conduct, and Analysis/5 Monographs in 五5ζ·〇仙"以，v〇1· 8 (1986)，其全文係以參 考方式併入本文。 捧合”一詞係指該藥物及/或增強劑能被溶解、分散或 懸浮於載體中。在某些實例中，該藥物可被均勻地掺合於 載體中。 在此所使用的複數物件、結構元件、組成元件及/或物 質’為了方便起見可以一共同表單呈現。然而，這些表單 應被解讀為如同該表單中的各個成員係被單獨確認為個別 且獨特的成員。因此，在沒有相反的指示下，該表單中沒 有一個個別成員應被解讀為事實上等同於同一表單中的任 一其他的成員，僅僅基於他們出現在一共同的組群中。 濃度、數量及其他數字資料得以範圍形式陳述或表 不可以理解的是，該範圍形式係僅為方便及簡潔而使用， 口此應彈性解釋為不僅包含已明確列舉作為範圍界限的數 值而且也包含所有涵括於該範圍内的所有個別數值或次 範圍，猶如每個數值及次範圍已明確列舉。作為一個實例， 約1至約5”的數值範圍應被解釋為不僅包含所明確列舉的 約1至約5的數值，而且也包含所指範圍内的個別數值 8 200800229 及次範圍。因此，包含在此數值範圍的有例如2、3及4 的個別數值及例如自1至3、自2至4及自3至5等的次 範圍。 此相同原則應適用僅列舉單一數值的範圍。更進一 步，不論範圍的廣度或所描述特性，這樣的解釋均應適用。 發明 本發明包含一種製備含有類胡蘿蔔素的營養補充品的 方法，包含形成-種類胡蘿環糊精複合物。類胡㈣ 素在營養領域係眾所周知可提供多種健康益處。本發明提 供製造-種可快速地被吸收之含有類胡蘿_素的營養補充 品之方法，其係操作簡| ’具時間與成本效率，且製成產 品中的類胡蘿蔔素兼具高敎性及為快速生物可利用的。 在營養補充品技藝眾所周知的是，類胡蘿葡素在腸液 中具低溶解度。此低溶解度造成類胡㈣素進人系統循環 的低吸收率或攝取率。另—造成類胡㈣素低吸收率的因 素為類胡蘿菌素有聚集成不易快速消化或吸收的大粒子的 傾向。環糊精能囊包(encapsulate)該低溶解性化合物以增 加其溶解度並抑制一般會發生的聚集。該較小的囊包化合 物通常指奈米顆粒，因為其非常小的顆粒大小。 口 本發明提供-種有效率的方法以製造含有類胡蘿葡素_ 環糊精複合物的營養補充品。特別是’該方法為生產及隨 後將類胡蘿菊素-環糊精複合物直接併入營養補充品(而沒 有中間的收集、分離及乾燥步驟）作準備。因為類胡蘿_素 -環糊精複合物可直接併入營養補充品中而沒有中間=步 9 200800229 驟，所以降低了成本β 明之方法包含藉由結合一定量的環糊 Γ =精裝狀物。製造該衆狀物的較佳溫度是從至5。 八有類型的環糊精及其組合均得使用於本發明中，包 3心糊精、γ•環糊精及β_環糊精 你田沾與，， 再體貝例中，所 月精4 I環糊精。在另—具體實例中，該環糊， 二1^%糊精與β_環糊精的混 w，入、n 應被混合約2〇八\主 該缞糊精與水的混合物
水的角色Γ 間或直至觀察到褐色的顏色。 Γ蘿=:於水合環糊精。水合的環糊精可更佳地與類 辛捧人於ΓΓ—旦形成該環糊精漿狀物，可將類胡蘿蔔 度自約4 0 :c至。該類胡桌葡素/環糊精混合物的混合應在溫 持續最少1小時。在高剪切力下混 類胡蘿^ 混合物’可增強或增加反應速率，及 類月蘿I]素-環糊精複合物 速率所“ Α 物的开/成速率。然而，較低的混合 迷羊斤產生的較低剪切值， 胡蘿”音f„ 问樣可有效地使用於形成該類 明羅旬素-裱糊精複合物。 在本發明中可使用的 域中已知呈古x 、月蘿蔔素，包含任何在所屬領 …: 康益處的類胡蘿葡素。用於本發明之 孝父佳的類胡蘿蔔為還原蝦紅 Μ月之 胡蘿蔔辛、榮至I ”、番茄紅素、玉米黃素、 ，，勺素葉頁素及其混合物。若是可行，較俨摩斟士 明之含有類胡蘿萄素的組成書丁土應對本發 胡蘿菌素的降解。另—wtL抽真空，以減緩或抑制該類 的方法，係將含有類胡蘿蘿菌素的穩定性之可接受 者浪人 、v 1素的混合物存放在氮氣下。 *〜&該類胡蘿菌夸/ 、” 〃辰糊精組成物時，類胡蘿蔔素 10 200800229 衣糊精複合物開始自溶液沉殿而使溶液更為黏祠。此黏稠 j的增加可作為成功形成類胡蘿蔔素-環糊精複合物的指 ‘。在傳統的類胡蘿蔔素_環糊精複合物製造方法中，該沉 _複合物係在製程的此刻被收集、分離及乾燥。藉此， 將原本存在於環糊精漿狀物中的水分排除。在本發明的方 去中，邊複合物係維持在含有水的預摻合漿狀物中。本發 明的製造方法能省略乾燥方法的能力，降低了與製程相關 的時間及成本。 。在該類胡蘿蔔素-環糊精複合物形成之後，然後可在4〇 它至45X：的溫度將該預摻合漿狀物與額外的營養成分混 合以形成一最終摻合物。將該最終摻合物徹底混合最少2〇 分鐘。在本發日月中可使用之額外的#養成分的例子包含但 不限於’維生素A、維生素E、葉黃素、魚油、摔樣油精 (monene)、蜂蠟及其組合。較佳的是，該最終摻合物係 與魚油混合。@習此項技藝人士所熟知之任何種類的魚油 均可於本發明中使用。就本發明之目的而言，#包含碟瑕 油作為魚油。 除了，，、、油所固有的健康盈處之外，添加魚油至預摻合 物漿狀物中有助於穩定及溶解任何存在於該預摻合漿狀^ 中之未複合的類胡蘿葡ι’進而增強該複合及未複合之類 胡蘿菌素兩者的生物利用度。經確定的是，當本發明的類 胡蘿葡素-環糊精複合物與一最小量的魚油共同投予時，該 巧月蘿蔔素的生物利用度被提高而優於單獨投予該類胡蘿 萄素-環糊精複合物時。不受理論的限制，咸信此生物利用 200800229 度的增加是因為，至少邱公e ^ ,, ^ 疋口為，”、、油對腸内脂肪酶的 刺激’因而促進類胡蘿蔔素的吸收。在一較佳具體實例中， 該魚油構成最終摻合組成物的約7G重量％至約9G重量％。 在另八體貝例中，該魚油構成最終摻合組成物的約乃 重量％至約85重量％。當其他的營養成分，特別是可快速 氧化的成分如維生| Α及維生素Ε纟包含在最終推合組 成物中時，魚油也作用於穩定及保護那些成分。 一旦完成該最終摻合組成物，則將其研磨以確保該複 合類胡蘿葡素之小顆粒大小。在研磨之後，可將該最㈣ 合物直接裝入膠囊或儲存於氮氣的氣密容器中。在本發明 的車乂仫具體貝例中，該最終摻合物係被囊包於軟明膠膠囊 中。本發明方法所生產的組成物係意欲傳遞給個體，以提 供該個體治療有效量的類胡蘿蔔素。該劑量可由一般習於 此項技藝人士，基於本發明組成物中類胡蘿菌素的濃度而 快速決定。 除方法外，本發明提供一種增強類胡蘿蔔素生物利用 度的組成物及相關之方法。具體而言，頃發現當前述之該 最終摻合組成物包含魚油時，類胡蘿蔔素的生物利用度令 人意想不到地被提高，而優於單獨只有類胡蘿蔔素/環糊精 複合物及單獨只有魚油/類胡蘿蔔素混合物的生物利用度。 如同W述，咸信該令人意想不到的生物利用度的提高是因 為，至少部分是因為，魚油對腸内脂肪酶的刺激，因而促 進該類胡蘿蔔素的吸收。 下列所k供的實施例，僅為製造本發明含有類胡蘿蔔 12 200800229 ' 素之營養補充品的一具體實例的例示說明。雖然該處理條 件及成分可為較佳的，但不意味對其設限。 實施例1 一種穩定的含有類胡蘿蔔素之營養補充品，係依下列 步驟製備： 1 ·將5.6 4 0公斤的水加入混合機中，並加熱至$ q t， 於加入環糊精前先確認溫度。 2·自混合機容器中移除混合機的葉片，及加入4 〇7〇 Φ 公斤的環糊精（Cavamax V Wacker Biochem)，並先以手 k合，而後以機械混合至少3 0分鐘或直至一環糊精水歡 狀物形成。該漿狀物為褐色。 3·加入表列數量的下列類胡蘿蔔素： 類胡蘿蔔素 活性（％或 lU/mg) 1----— 公斤 β-胡蘿蔔素（30%液狀懸浮液，5. trispora) 500.00 IU -------^〆 0.273 β-胡蘿蔔素（Caromin 13%b ； 6.5%a ;油狀；棕櫚果實） 13.000% —________， 0.689 還原蝦紅素，5%，OIL BIOAstin (H, pluvialis) 5.000% --------- 0-224 番痛紅素（20%油狀懸浮 液）LycoVit synthetic 20.000% ~~—_____ 0.560 玉米黃素（20%液狀懸浮液） 20.000% ——____ __0.056 4·對混合容抽真空，並將該組成物在4、45。〇的浪 度下低速（9·6 rpm)混合至少1小時，並形成類胡蘿蔔素磙 糊精複合物。（注意··當類胡蘿蔔素與環糊精反應時，化舍 13 200800229 物會沉澱，且混合物的黏度會增加，其為成功的複合反應 的指標）。 ’ 5·在至少i小時的混合後，立刻移出含有該類胡蘿葡 素-環糊精複合物的混合機容器，並加到一含有魚油蜂蠟 摻合物的主要混合機内。該魚油與蜂蠟摻合物係藉由加入 大約6·1公斤的蜂蠟及73·2公斤的魚油至混合機中，並於 60 C摻σ直至完全混合而製造。然後在該類胡蘿蔔素-環糊
精複合物加入之前，將該組成物冷卻至4〇_45C>c。使用小 量的魚油/蜂蠟組成物將類胡蘿蔔素_環糊精複合物沖到混 合機容器中。
然後可將額外的成分加 $加量顯示於下表：
14 200800229 高剪切力混合該混合物20分鐘。而後使該混合物冷卻至 2 5-28°C並自混合機移出及研磨以降低顆粒大小。 8·經研磨後，將該混合物儲存在一含氮密封容器内或 立即裝入膠囊内。裝入膠囊可在軟明膠膠囊中完成。每一 軟明膠膠囊含有約1 ·2公克經研磨的最終組成物。 實施例2 進行研究以測定申請專利範圍第1項之組成物於個體 皮膚類胡蘿蔔素評分（Skin Carotenoid Scores ; SCS)的效 馨 果。5亥研究涉及利用拉叉光譜法（Raman Spectroscopy)評 估，相較於安慰劑，補充有實施例i的組成物在丨8週期 間内皮膚類胡蘿蔔素得分的變化。 52位年齡介於丨8至65歲之個體具資格參與本研究。 使用進食頻率及健康史問卷篩選内含標準，並利用華茂生 物光子掃描儀（Pharmanex Bi〇ph〇t〇nic scanner)評估皮膚類 =蘿蔔素之水平。攝取抗氧化劑補充品、具高度陽光暴露 里或使用曬黑床（tanning bed)、懷孕婦女之個體，或使用
免=晒型晒黑產品之個體，係被排除在本研究外。所有個 :白為健康非吸煙者’並接受含有少於5份每日水果及蔬 采之典型美國飲食，且具有拉曼強度得分基礎線介於 ^ 3 5,000之間的拉曼強度計數（Raman Intensity 習〇=ts):參與者被告知在整個研究期間維持其飲食及運動 :二。符合本研究標準的個體(n=52)隨機以雙盲方式分到 Ϋ 的組，分別為實施例1之組成物組（η=27)或安慰 劑組（η=25)。 15 200800229 、、口予個體其各自的膠囊，安慰劑或實施例1之組成物， 並指示個體-天服用兩次（_次與早餐〆起，—次與晚餐一 起）貝例1參與者之劑量包含每天二次，每次二個軟膠囊。 每天服用兩次的安慰劑亦包含二個軟膠囊，其含有0 _3脂 肪酸但不含類胡蘿_素。
研九結果顯示該皮膚類胡蘿蔔素評分令人意想不到地 N度的提π。具體而言，相較於幾乎沒有改變的安慰劑組 參與者’服用實施存"之組成物者，在18週後平均增加 f |7’757拉曼強度計數.在整個18週的研究期間，類胡 蘿蔔素光電子掃描評分（Car〇ten〇id 持續增 加’而未有明顯的高原效應。 上述實施例係以一或λ多的特定應用㉟明本發明的原 則’對於一般習於此項技術者而言， ^ J❿武、用法及訾 施的細節作各種修飾而不運用創新技能，亦不 、 的原則與概念是非常明顯的。因此，除了如以下 I明 請專利範圍外，其並非意欲限制本發明。 了所列之申 【圖式簡單說明】 益 【主要元件符號說明】
Ml

Claims (1)

  1. 200800229 十、申請專利範圍： 1· 一種製造含有類胡蘿蔔素之營養補充品的方法，包 括 (a)在5 0°C將一定量的環糊精與水混合，以形成水/學 糊精漿狀物； (b)將一定量之至少一種類胡蘿蔔素摻合至該水/環糊 精漿狀物’以形成包含環糊精類胡蘿蔔素複合物的預換人 組成物； (c)對該預摻合組成物抽真空，且徹底混合該預播合 組成物最少1小時； w藉由在真空下將未乾燥之預摻合組成物與额外的 營養成分在約4(TC至45。(：下混合’以形成一最終摻合物； (e) 在真空下研磨該最終摻合物； (f) 將該經研磨的最終摻合物衷入膠囊内。 2·如申請專利範圍第1項之方法，^該環糊精為r 環糊精。 顶馮_ 3. 如申請專利範圍第丨項之方 具中該裱糊精為 環糊精與/3 -環糊精之組合。 狗7 _ 4. 如申請專利範圍帛i項之方法，其中 — 胡蘿蔔素係選自由還原蝦紅素、番 夕種類 胡蘿蔔素、葉黃素及其混合物所組成之族群。、^汽素、沒_ 5·如申請專利範圍第1項之方法，=由°= 成分係選自由魚油、蜂蠟、維4I ”該額外的營養 难王I A、維 油精及其混合物所組成之族群。 " 、擰檬 17 200800229 其中該額外的營養 其中該魚油係構成 其中該魚油係構成 其中該經研磨的最 6·如申請專利範 丄、、a 礼国弟5項之方法 成为包含魚油。 如申請專利範圍f 6項之方法 該最終摻合物的7〇 董里/〇至90重量％ n ’申請專利範圍第7項之方法 該取終摻合物的75重量％至85重量％ 9·如申請專利範圍帛1項之方法 終摻合物係裝入軟明膠膠囊内。
    •種製造含有類胡蘿笱辛之、狄矣、去古口从 月羅匐京之營養補充品的方法，包 枯： =)在-摻合裝置中加熱一定量的水至5crc ; 疋塁的環糊精與水混合以形成水/環糊精漿狀 物； 將（e)將一定ϊ之至少_種類胡蘿蔔素摻合至該水/環糊 精水狀物中，以形成一含有環糊精類胡蘿蔔素複合物的預 摻合組成物； (d) 將該預摻合組成物抽真空，且徹底混合該預摻合組 成物最少1小時； (e) 在一分開的混合容器中，加熱一定量的魚油至溫度 40〇C 至 45〇C ; (f) 藉由在真空下將未乾燥的預摻合組成物與魚油在約 4 0 C至4 5 °C的溫度混合，以形成一最終務合物； (g) 視需要地將額外的營養成分摻合至該最終摻合物 200800229 (h)將該最終摻合物冷卻至25°C至28t ; ⑴在真工下研磨該最終摻合物，以降低顆粒 · (J)將該經研磨的最終摻合物裝入膠囊。 、， 11. 如申請專利範圍第10項之方法， r -環糊精。 衣糊精為 η·如申請專利範圍帛1G項之方法，i中 r-環糊精與石-環糊精之組合。 、”衣糊精為 12. 如申請專利範圍帛1〇項之方法其中
    類胡蘿葡素係選自由還原蝦紅素、養霖紅素、王:米二：種 /3 -胡蘿蔔素、葉黃素及其混合物所組成之族群。” 、 13. 如申請專利_ 1〇項之方法，其 養成分係選自由蜂纖、維生素A、維生素e 及其混合物所組成之族群。 τ松油精 14. 一種含有類胡蘿蔔素的組成物，包括： 至少一種類胡蘿蔔素； 一環糊精；及 八中該魚油構成該組成物的7〇重量％至 量％。 重 如申請專利範圍第14項之組成物，其中該環糊 為T -¾糊精。 ^如中請專利範圍帛14項之組成物，其中該環糊精 為7 糊精與/5 _環糊精之組合。 17.如申請專利範圍帛14項之組成物，其中該至少_ 種類胡蘿蔔素係選自由還原蝦紅素、番茄紅素、玉米黃素、 200800229 万-胡蘿蔔素、葉黃素及其混合物所組成之族群。 其進一步包含 維生素E、D- 18.如申請專利範圍第14項之組成物， 額外的營養成分’係選自由蜂蠛、維生素A 擰檬油精及其混合物所組成之族群。 19.如申請專利範圍第14項之組成物，其中係存在該 魚油，構成該組成物的75重量。/。至85重量0/〇。
    20·如申請專利範圍第14項之組成物，其中該至少一 種類胡蘿蔔素係與該環糊精複合。 21—種增強類胡蘿葡素之生物利用度的方法，包括： 對有舄要之個體共同投予類胡蘿芍 的組合。 丁頰Λ羅匐素及裱糊精與魚油 素及該環糊精係複合在一起。、…甲該類胡蘿葡 23.如申請專利範圍第21項之方法，其中 7、環糊精。 、^衣糊精為 24·如申請專利範圍帛2ι項之方法， 7、環糊精與^環糊精之組合。 -中^鞠精為 25·如中請專利範圍第21項之方法， :係選自由還原瑕紅素、㈣紅素、玉米黃中”， 素、葉黃素及其混合物所組成之族群。…^胡蘿萄 •如申凊專利範圍第2 1項 養成分係共同投予，…U該額外的營 生素A、維生素F n卜的營養成分係選自由蜂，、維 、 挣檬油精及其混合物所組成' 27.如申請專利範圍第21項之方法^群。 〃甲该類胡蘿輯 20 200800229 1 素、環糊精及魚油係於以單一劑量型式投予。 十一、圖式： 無
    21
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