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HK1209155B - Generation of functional and durable endothelial cells from human amniotic fluid-derived cells - Google Patents

Generation of functional and durable endothelial cells from human amniotic fluid-derived cells Download PDF

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Publication number
HK1209155B
HK1209155B HK15109719.4A HK15109719A HK1209155B HK 1209155 B HK1209155 B HK 1209155B HK 15109719 A HK15109719 A HK 15109719A HK 1209155 B HK1209155 B HK 1209155B
Authority
HK
Hong Kong
Prior art keywords
cells
rac
acs
vecs
expression
Prior art date
Application number
HK15109719.4A
Other languages
English (en)
French (fr)
Chinese (zh)
Other versions
HK1209155A1 (en
Inventor
Shahin Rafii
Sina Y. Rabbany
Michael Ginsberg
Original Assignee
Cornell University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cornell University filed Critical Cornell University
Priority claimed from PCT/US2013/043236 external-priority patent/WO2013181326A1/en
Publication of HK1209155A1 publication Critical patent/HK1209155A1/en
Publication of HK1209155B publication Critical patent/HK1209155B/en

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Claims (12)

  1. Verfahren zum Erzeugen einer proliferativen Population stabiler vaskulärer Endothelzellen, das Folgendes beinhaltet:
    Transduzieren amniotischer Zellen, die aus amniotischem Fluid extrahiert wurden, mit Vektoren, die Nucleinsäuren umfassen, die die Transkriptionsfaktoren ETV2, FLI1 und ERG kodieren, um eine Expression der Transkriptionsfaktoren zu erzielen; und
    Kultivieren der amniotischen Zellen unter Bedingungen, bei denen die Transkriptionsfaktoren ETV2, FLI1 und ERG in den amniotischen Zellen exprimiert werden, in Anwesenheit eines TGFβ-Signalisierungsinhibitors, um dadurch eine proliferative Population stabiler vaskulärer Endothelzellen zu erhalten.
  2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei ETV2 in den amniotischen Zellen transient exprimiert wird, z.B. 13-15 Tage lang, und die Expression von FLI und ERG konstitutiv ist.
  3. Verfahren nach Anspruch 1, wobei der TGFβ-Signalisierungsinhibitor in der Zellkultur 20-24 Tage lang anwesend ist.
  4. Verfahren nach Anspruch 3, wobei der TGFβ-Signalisierungsinhibitor ein für TGFβ-Rezeptoren vom Typ I spezifischer Inhibitor ist.
  5. Verfahren nach Anspruch 4, wobei der genannte Inhibitor ein Polypeptid ist, das eine lösliche Form eines TGFβ-Rezeptors vom Typ I, einen gegen einen Typ I TGFβ-Rezeptor oder -Ligand gerichteten Antikörper oder eine Kleinmolekülverbindung umfasst, ausgewählt aus SB-431542, A 83-01, D 4476, LY 364947, SB 525334, SD 208 und SJN 2511, z.B. SB-431542.
  6. Verfahren nach Anspruch 1, wobei amniotische Zellen wenigstens 21 Tage lang, z.B. wenigstens insgesamt 28 Tage lang oder wenigstens insgesamt 42 Tage lang, mit Expression von ETV2 in den amniotischen Zellen für die ersten 13-15 Tage, Anwesenheit des TGFβ-Signalisierungsinhibitors für die ersten 20-21 Tage und konstitutiver Expression von FLI1 und ERG kultiviert werden.
  7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 6, wobei ERG ERG1 ist.
  8. Verfahren nach Anspruch 1, das ferner das Isolieren von VE-Cadherin+, CD31+, VEGFR2+ Endothelzellen beinhaltet.
  9. Im Wesentlichen reine Population von ECs, die von amniotischen Zellen abgeleitet sind, die mit dem Verfahren nach Anspruch 1 erhältlich ist, wobei die genannten ECs durch Expression der Oberflächenmarker VE-Cadherin, CD31 und VEGFR2 und durch Anwesenheit exogen eingebrachter Nucleinsäure, die FLI1 kodiert, gekennzeichnet sind.
  10. Zusammensetzung, die die im Wesentlichen reine Population von ECs nach Anspruch 9 und wenigstens einen pharmazeutisch akzeptablen Träger oder Verdünnungsmittel umfasst.
  11. Zusammensetzung nach Anspruch 10 zur Verwendung bei der Reparatur von verletztem Gewebe in einem menschlichen Subjekt durch Unterstützen der Vaskularisation in dem genannten Gewebe.
  12. Zusammensetzung zur Verwendung nach Anspruch 11, wobei die genannten ECs so konstruiert sind, dass ein Antitumormittel geliefert wird und nach Verabreichung die genannten ECs Gefäße in einem Tumor bilden.
HK15109719.4A 2012-05-30 2013-05-30 Generation of functional and durable endothelial cells from human amniotic fluid-derived cells HK1209155B (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261653185P 2012-05-30 2012-05-30
US61/653,185 2012-05-30
US201261709431P 2012-10-04 2012-10-04
US61/709,431 2012-10-04
PCT/US2013/043236 WO2013181326A1 (en) 2012-05-30 2013-05-30 Generation of functional and durable endothelial cells from human amniotic fluid-derived cells

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HK1209155A1 HK1209155A1 (en) 2016-03-24
HK1209155B true HK1209155B (en) 2020-05-22

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