HK1119245B

HK1119245B - Pathogen detection biosensor

Info

Publication number: HK1119245B
Application number: HK08112865.9A
Authority: HK
Inventors: Eric Schwoebel; James Harper; Martha S. Petrovick; Frances Nargi; Mark Hollis; Bernadette Johnson; Joseph Lacirignola; Richard Mathews; Kristine Hogan; Trina Vian; Allan Heff; Mark Hennessy; Songeeta Palchaudhuri; Todd Rider
Original assignee: Massachusetts Institute Of Technology
Priority date: 2005-11-30
Filing date: 2006-11-30
Publication date: 2014-03-21

Claims

Verfahren zum Testen auf das Vorhandensein eines hämatogenen Pathogens, umfassend:
a) Gewinnen einer Plasmaprobe, die auf ein hämatogenes Pathogen zu testen ist, wobei die Probe unter Verwendung eines Plasma-Trennröhrchens und von Differentialzentrifugation gewonnen wird;

b) Zugeben von Emitterzellen zu dem Plasma, wobei die Emitterzellen Rezeptoren umfassen, die auf der Oberfläche jeder Emitterzelle exprimiert werden und für das zu detektierende hämatogene Pathogen spezifisch sind, wobei jede Emitterzelle ferner ein Emittermolekül umfasst, das als Reaktion auf das Binden des hämatogenen Pathogens an die Rezeptoren ein Photon emittiert; und

c) Detektieren einer Photonenemission, wobei eine Photonenemission ein Anzeichen für ein Pathogen in dem Plasma ist.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Pathogen ein Bakterium, ein Virus oder ein Toxin ist.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Pathogen Yersinia pestis oder Botulinum-Toxin ist.
Verfahren zum Testen auf das Vorhandensein eines intrazellulären Pathogens in einer Blutprobe, umfassend:
a) Gewinnen einer Erythrozytenprobe, die auf ein Pathogen zu testen ist, wobei die Probe unter Verwendung eines Zellen-Trennröhrchens, eines Erythrozytenisoliermediums, eines Polyestergels und einer Zentrifugation gewonnen wird;

b) Lysieren der Erythrozyten mit einem Lysemittel unter Bildung einer lysierten Erythrozytenprobe;

c) Zugeben von Emitterzellen zu der lysierten Erythrozytenprobe, wobei die Emitterzellen Rezeptoren umfassen, die auf der Oberfläche jeder Emitterzelle exprimiert werden und spezifisch für das zu detektierende Pathogen in intrazellulärem Blut sind, wobei jede Emitterzelle ferner ein Emittermolekül umfasst, das als Reaktion auf das Binden des Pathogens an die Rezeptoren ein Photon emittiert; und

d) Detektieren einer Photonenemission, wobei eine Photonenemission ein Anzeichen für ein Pathogen in der lysierten Erythrozytenprobe ist.
Verfahren nach Anspruch 4, wobei das Pathogen ein Virus ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 1-5, wobei das Emittermolekül ein calciumsensitives lumineszierendes Molekül oder ein calciumsensitives fluoreszierendes Molekül ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 1-6, wobei das Emittermolekül aus der Gruppe von Aequorin, Obelin, Thalassicolin, Mitrocomin, Clytin, Mnemopsin, Berovin, Indo-1, Fura-2, Quin-2, Fluo-3, Rhod-2, Calciumgrün, BAPTA und einem Cameleon ausgewählt ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 1-7, wobei die Emitterzelle eine Zelle ist, die aus der Gruppe von einer prokaryotischen Zelle, einer eukaryotischen Zelle, einer künstlichen Zelle und einer nicht-lebenden Zelle ausgewählt ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 1-8, wobei die Emitterzelle aus der Gruppe von B-Zellen, T-Zellen, Makrophagenzellen, Mastzellen und Fibroblasten ausgewählt ist.