HK1172641B - Placental stem cell populations - Google Patents

Claims (15)

1. Population isolierter adhärenter Amnion-Chorion-Stammzellen, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen das SLC12A8-Gen auf einem mindestens zweimal höheren Niveau als eine entsprechende Anzahl von Knochenmark-abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen (BM-MSCs) exprimieren, welche unter entsprechenden Bedingungen kultiviert wurden und der gleichen Anzahl von Kulturpassagen wie die Amnion-Chorion-Stammzellen unterzogen wurden, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen CD10⁺, CD34^-, CD105⁺, und CD200⁺ sind.
2. Population nach Anspruch 1, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen ferner CD90⁺ und CD45^- sind.
3. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 2, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen die Fähigkeit aufweisen, sich zu Zellen mit Eigenschaften neuronaler Zellen zu differenzieren.
4. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen das SLC12A8-Gen auf einem mindestens zweimal höheren Niveau als eine entsprechende Anzahl von Knochenmark-abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen über 3, über 11-14, oder über 24-38 Populationsverdoppelungen exprimieren.
5. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei die Population 1 x 10⁵, 5 x 10⁵, 1 x 10⁶, 5 x 10⁶, 1 x 10⁷, 5 x 10⁷, 1 x 10⁸, 5 x 10⁸, 1 x 10⁹, 5 x 10⁹, 1 x 10¹⁰, 5 x 10¹⁰ oder 1 x 10¹¹ Amnion-Chorion-Stammzellen umfasst.
6. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei die Population 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38 oder 40, oder mehr Populationsverdoppelungen unterzogen wurde.
7. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen das SLC12A8-Gen auf einem mindestens zweimal höheren Niveau als eine entsprechende Anzahl von Knochenmark-abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen exprimieren, wenn die Amnion-Chorion-Stammzellen und die Knochenmark-abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen in einem Medium kultiviert werden, das 60 % DMEM-LG und 40% MCDB-201; 2% fötales Kälberserum, 1X Insulin-Transferrin-Selen, 1X Linolensäure-Rinderserumalbumin, 10^-9 M Dexamethason, 10^-4 M Ascorbinsäure-2-Phosphat, 10 ng/ml epidermalen Wachstumsfaktor und 10 ng/ml Blutplättchen-abgeleiteten Wachstumsfaktor umfasst.
8. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 7, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen die Fähigkeit aufweisen, sich 10 bis 40 Mal in Kultur zu replizieren.
9. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 8, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen 5 bis 10 Mal passagiert wurden.
10. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 9, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen in Zellen differenzieren, welche eine Eigenschaft von chondrogenen Zellen aufweisen, wenn sie in DMEM kultiviert werden, das 15% Nabelschnurblutserum und 0,01 µg/mL transformierenden Wachstumsfaktor-beta (TGFβ) umfasst; und wobei die Eigenschaft chondrogener Zellen die positive Färbung mit Alcianblaufarbe ist.
11. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 9, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen in Zellen differenzieren, welche eine Eigenschaft osteogener Zellen aufweisen, wenn sie in DMEM kultiviert weden, das 15% Nabelschnurblutserum, 0,1 µM Dexamethason, 0,05 mM Ascorbinsäure-2-Phosphat und 10 mM Betaglycerophosphat umfasst; und wobei die Eigenschaft osteogener Zellen durch Färbung mit Kossafarbe oder durch die Produktion von mRNA für Alkalinphosphatase, wie durch RT-PCR bestimmt, gezeigt wird.
12. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen das SLC12A8-Gen auf einem mindestens dreimal höheren Niveau als eine entsprechende Anzahl von Knochenmark-abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen exprimieren.
13. Population nach einem der Ansprüche 1 bis 12, wobei mindestens 90% oder mindestens 99% der genannten Amnion-Chorion-Stammzellen nicht mütterlichen Ursprungs sind.
14. Zusammensetzung umfassend die isolierten adhärenten Amnion-Chorion-Stammzellen nach einem der Ansprüche 1 bis 13, wobei die Zusammensetzung eine zur intravenösen Verabreichung geeignete Form aufweist.
15. Verfahren zur Herstellung einer Amnion-Chorion-Stammzellenpopulation nach Anspruch 1, umfassend das Identifizieren von adhärenten Amnion-Chorion-Stammzellen, die das Gen SLC12A8 auf einem mindestens zweimal höheren Niveau als eine entsprechende Anzahl von Knochenmark-abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen exprimieren, die unter entsprechenden Bedingungen kultiviert wurden und der gleichen Anzahl von Kulturpassagen wie die Amnion-Chorion-Stammzellen unterzogen wurden, und das Isolieren der Amnion-Chorion-Stammzellen, wobei die Amnion-Chorion-Stammzellen CD10⁺, CD34^-, CD105⁺, und CD200⁺ sind.