HK1171741B - Conjugates of pyrrolo[1,4]benzodiazepine dimers as anticancer agents - Google Patents

Claims (34)

1. Verbindung der Formel (I): wobei:

   ● ---- für eine Einfachbindung oder eine Doppelbindung steht, mit der Maßgabe, dass, wenn ---- für eine Einfachbindung steht, dann:

   ❖ ---- für eine Einfachbindung steht,

   ❖ U und/oder U', die gleich oder verschieden sind, unabhängig voneinander für H steht/stehen,

   ❖ W und/oder W', die gleich oder verschieden sind, unabhängig voneinander für Folgendes steht/stehen:

   OH, -OR, -OCOR, -COOR, -OCOOR, -OCONRR', ein zyklisches Carbamat, derart, dass N10 und C11 in einem Ring enthalten sind, -NRCONRR', -OCSNHR, ein zyklisches Thiocarbamat, derart, dass N10 und C11 in einem Ring enthalten sind, -SH, -SR, -SOR, -SOOR, -SO₃ ^-, -NRSOOR', -NRR', ein zyklisches Amin, derart, dass N10 und C11 in einem Ring enthalten sind, -NROR', -NRCOR', -N₃, CN, Hal, eine Trialkylphosphonium- oder Triarylphosphonium-Gruppe,

   ● R₁, R₂, R₁', R₂' , die gleich oder verschieden sind, unabhängig voneinander für: H, Hal oder eine (C₁-C₆)-Alkyl-Gruppe stehen, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituent(en) substituiert ist, ausgewählt aus : Hal, CN, NRR', CF₃, OR, einer Aryl- oder Heteroaryl-Gruppe, S(O)_qR mit q ₌ 0, 1 oder 2, oder

   ● R₁ und R₂ und/oder R₁' und R₂' jeweils zusammen eine Doppelbindung =CH₂ oder =CH-CH₃ bilden,

   ● Y und Y', die gleich oder verschieden sind, unabhängig voneinander für H oder OR stehen,

   ● M für CH oder N steht,

   ● ALK und ALK', die gleich oder verschieden sind, unabhängig voneinander für eine (C₁-C₆)-Alkylen-Gruppe stehen,

   ● R und R' unabhängig voneinander für H oder eine (C₁-C₆)-Alkyl- oder Aryl-Gruppe stehen, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituent(en) substituiert ist, ausgewählt aus: Hal, CN, NRR', CF₃, OR, einer Aryl- oder Heteroaryl-Gruppe,

   ● L steht für:

   ❖ die Gruppe -L₁-L₂-, worin L₁ an den M umfassenden aromatischen Ring über die Gruppe ALK oder OALK gebunden ist und durch eine der folgenden Gruppen dargestellt wird:

   - ALK-S-

   - O-ALK-NR₃-ALK-S-

   und L₂ für die Gruppe -CH₂C(=O)-NR₃-(CH₂CH₂O)_i-ALK-steht, die an L_l über -CH₂C(=O)-gebunden ist, oder

   ·:· für die Gruppe -O-ALK-NR₃-ALK-S- (CH₂CH₂O_)i-ALK-, die an den M umfassenden aromatischen Ring über die Gruppe OALK gebunden ist, ● R₃ für H oder eine (C₁-C₆)-Alkyl-Gruppe steht, ● i für eine ganze Zahl von 1 bis 40, besser von 1 bis 20, vorzugsweise von 1 bis 10 steht, ● Z_b für eine Einfachbindung, -0- oder -NH- steht, wobei R_b für H oder eine (C₁-C₆)-Alkyl-, (C₃-C₇)-Cycloalkyl-, Aryl-, Heteroaryl- oder (C₃-C₇)-Heterocycloalkyl-Gruppe steht, oder auch Z_b für eine Einfachbindung und R_b für Hal steht.
2. Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:
3. Verbindung nach Anspruch 1 der Formel (IA) oder (IB) :
4. Verbindung nach Anspruch 1 bis 3, wobei Y und Y' für eine (C₁-C₄)-Alkoxy-, insbesondere Methoxy-Gruppe stehen.
5. Verbindung nach Anspruch 1 bis 4, wobei L aus Folgenden ausgewählt ist: -Alk-S-CH₂C (=O) -NH-(CH₂CH₂O)_i-CH₂CH₂- -O-ALK-NR₃-ALK-S-CH₂C (=0) -NH- (CH₂CH₂O)_i-CH₂CH₂ -O-Alk-NR₃-ALK-S- (CH₂CH₂O) _i-CH₂CH₂-
6. Verbindung nach Anspruch 1 oder 5, wobei L aus Folgenden ausgewählt ist:
7. Verbindung nach Anspruch 1 oder 5, wobei L aus Folgenden ausgewählt ist:
8. Verbindung nach Anspruch 1 bis 7, wobei -COZ_bR_b für -COOH, -COO(C₁-C₆) -Alkyl, -COOCH₃, COOCH₂CH=CH₂, oder die Gruppe steht, wobei GI für mindestens eine induktive Gruppe, insbesondere steht.
9. Verbindung nach Anspruch 1, die aus den folgenden ausgewählt ist:
10. Verfahren zur Herstellung eines Konjugats, bei dem man:

    (i) eine gegebenenfalls gepufferte, wässrige Lösung eines Zielsteuerungsmittels und eine Lösung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 in Kontakt bringt und umsetzt,

    (ii) anschließend gegebenenfalls das in Schritt (i) gebildete Konjugat von der Verbindung der Formel (I) und/oder dem nicht umgesetzten Zielsteuerungsmittel und/oder von Aggregaten, die sich möglicherweise gebildet haben, abtrennt.
11. Verfahren nach Anspruch 10, wobei die Gruppe -C(=O)Z_bR_b mit auf dem Zielsteuerungsmittel vorhandenen chemischen Gruppen, insbesondere mit auf einem Antikörper vorhandenen Aminogruppen, derart reaktiv ist, dass die Bindung der Verbindung der Formel (I) an das Zielsteuerungsmittel durch Bildung einer kovalenten Bindung gewährleistet ist.
12. Verfahren nach Anspruch 10 bis 11, wobei man in Schritt (ii):

    - das im Schritt (i) gebildete Konjugat von dem nicht umgesetzten Zielsteuerungsmittel und gegebenenfalls in der Lösung vorhandenen Aggregaten abtrennt oder

    - nur das Konjugat von Schritt (i) von der nicht umgesetzten Verbindung der Formel (I) und den Aggregaten, die sich gebildet haben können, abtrennt und in der Lösung das Zielsteuerungsmittel belässt, das gegebenenfalls nicht umgesetzt worden ist.
13. Verfahren nach einem der Ansprüche 10 bis 12, wobei das Zielsteuerungsmittel ein Ligand, ein Protein, ein Antikörper, insbesondere ein monoklonaler Antikörper, ein Fragment eines Proteins oder Antikörpers, ein Peptid, ein Oligonukleotid oder ein Oligosaccharid ist.
14. Verfahren nach Anspruch 10 bis 13, wobei die Reaktion bei einer Temperatur zwischen 20 und 40 °C erfolgt und/oder die Dauer der Reaktion zwischen 1 und 24 Std. variiert.
15. Verfahren nach einem der Ansprüche 10 bis 14, wobei nach dem Schritt (i) oder (ii) die Lösung des Konjugats einem Ultrafiltrations- und/oder Diafiltrationsschritt (iii) unterzogen wird.
16. Konjugat, das durch das Verfahren nach einem der Ansprüche 10 bis 15 erhältlich ist.
17. Konjugat nach Anspruch 16, wobei das Zielsteuerungsmittel ein Antikörper, vorzugsweise ein monoklonaler Antikörper, ist, gekennzeichnet durch ein mittleres DAR zwischen 1 und 10, vorzugsweise zwischen 1,5 und 7, wobei das DAR durch die Gleichung DAR ₌ c_D/c_A berechnet wird mit: wobei A_LO1 und A_LO2 für die Absorptionen einer wässrigen Lösung des Konjugats bei den Wellenlängen LO1 und L02 stehen, gemessen am entsprechenden Peak des SEC-Spektrums, e_{D LO1} bzw. e_{D LO2} für die molaren Absorptionskoeffizienten des Dimers Pyrrolo[1,4]benzodiazepin vor der Konjugation bei den zwei Wellenlängen LO1 und L02 stehen, e_{A LO1} bzw. e_{A LO2} für die molaren Absorptionskoeffizienten des nackten Antikörpers bei den zwei Wellenlängen LO1 und L02 stehen, LO1 = 280 nm und L02 = 320 nm.
18. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Herstellung eines Zielsteuerungsmittels, an das kovalent an der para-Position von M das Dimer der folgenden Formel gebunden ist:
19. Verwendung nach Anspruch 18, wobei das Zielsteuerungsmittel ein Antikörper, vorzugsweise ein monoklonaler Antikörper, ist.
20. Verwendung nach Anspruch 18 oder 19, wobei das Dimer folgende Formel hat:
21. Verwendung nach Anspruch 18 bis 20, wobei Y und Y' für eine (C₁-C₄)-Alkoxy-, insbesondere eine Methoxy-Gruppe stehen.
22. Zielsteuerungsmittel, an das kovalent an der para-Position von M das Dimer der folgenden Formel: nach der Umsetzung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 mit dem Zielsteuerungsmittel gebunden ist.
23. Zielsteuerungsmittel nach Anspruch 22, wobei das Dimer wie in einem der Ansprüche 20 oder 21 definiert ist.
24. Zielsteuerungsmittel nach Anspruch 23 mit einer Affinität für ein Antigen oder eine Gruppe von Antigenen auf Krebszellen oder mit einem Tumor assoziierten Stromazellen.
25. Zielsteuerungsmittel nach Anspruch 22 bis 24, bei dem es sich um einen Antikörper, vorzugsweise einen monoklonalen Antikörper handelt.
26. Konjugat-Lösung, die durch das Verfahren nach einem der Ansprüche 10 bis 15 erhältlich ist.
27. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 für die Verwendung als Antikrebsmittel.
28. Konjugat nach Anspruch 16 oder 17 für die Verwendung als Antikrebsmittel.
29. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 oder ein Konjugat nach Anspruch 16 oder 17 sowie mindestens einen Excipienten.
30. Verwendung einer Verbindung der Formel P₂ oder einer Verbindung der Formel: wobei L* ausgewählt ist aus:

    - ALK-SH,

    - O-ALK-NR₃-ALK-SH, wobei in den Formeln:

    ■ L, M, ALK, ALK', R₃, Z_b und R_b wie in einem der Ansprüche 1 bis 9 definiert sind,

    ■ E und E' unabhängig voneinander für eine Gruppe -OH oder eine Abgangsgruppe stehen,

    als Zwischenprodukt für die Herstellung einer Verbindung der Formel (I) nach einem der Ansprüche 1 bis 9.
31. Verwendung nach Anspruch 30, wobei die Abgangsgruppe ausgewählt ist aus einem Halogenatom, einer Mesylat-, Tosylat-, Nosylat-Gruppe oder -OPPh₃ ⁺.
32. Verwendung einer aus einer der folgenden ausgewählten Verbindung: wobei selbstverständlich sein sollte, dass die endständige Funktion -COOH durch eine endständige Funktion COO(C₁-C₆)-Alkyl, insbesondere -COOMe, ersetzt werden kann und dass die endständige Funktion -SH durch eine Disulfid-Funktion insbesondere -SSMe, ersetzt werden kann, als Zwischenprodukt zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) nach einem der Ansprüche 1 bis 9.
33. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Herstellung eines Antikrebsmittels.
34. Verwendung eines Konjugats nach Anspruch 16 oder 17 zur Herstellung eines Antikrebsmittels.