HK1164921B - Stem cell growth media and methods of making and using same - Google Patents

Claims (15)

1. Formulation de milieu complet, comprenant les composants suivants :

   albumine, un vecteur de fer, glutamine, hyaluronidase, facteur FGF (facteur de croissance des fibroblastes), un sel ou un élément minéral, et acides aminés essentiels,

   présentant une osmolarité d'à peu près 220 à 330 mOsm/L,

   et comprenant en outre un substrat.
2. Formulation de milieu complet, conforme à la revendication 1, dans laquelle le substrat comprend une molécule d'adhérence.
3. Formulation de milieu complet, conforme à la revendication 2, dans laquelle la molécule d'adhérence est une ou plusieurs des laminines et de la fibronectine.
4. Formulation de milieu complet, conforme à la revendication 3, dans laquelle le substrat comprend un protéoglycane.
5. Formulation de milieu complet, conforme à la revendication 4, dans laquelle le protéoglycane est produit par des cellules nourricières.
6. Formulation de milieu complet, conforme à la revendication 4, dans laquelle le protéoglycane est de l'acide hyaluronique, de la chondroïtine ou un chondroïtine-sulfate, ou une mucine.
7. Formulation de milieu complet, conforme à la revendication 6, dans laquelle le protéoglycane est une mucine choisie parmi les suivantes : mucine-1, mucine-2, mucine-3, mucine-4, mucine-5AC, mucine-5B, mucine-6, mucine-7, mucine-8 et mucine-9.
8. Récipient contenant une formulation de milieu complet, conforme à l'une des revendications 1 à 7.
9. Culture de cellules, comprenant une formulation de milieu complet, conforme à l'une des revendications 1 à 7, et des cellules de mammifère, à l'exclusion des cellules souches totipotentes humaines.
10. Culture de cellules conforme à la revendication 9, dans laquelle les cellules de mammifère sont :

    i) des cellules primaires, secondaires ou passées de mammifère, ou des cellules immortalisées,

    ii) ou des cellules souches de mammifère.
11. Culture de cellules, comprenant une formulation de milieu complet, conforme à l'une des revendications 1 à 7, et

    i) des cellules souches tissulaires, germinales ou adultes,

    ii) des cellules souches multipotentes,

    iii) des cellules souches totipotentes non-humaines,

    iv) ou des cellules souches pluripotentes,

    à l'exclusion des cellules souches totipotentes humaines.
12. Procédé de culture de cellules, comportant :

    i) le fait de faire croître ou de faire incuber des cellules dans une formulation de milieu complet, conforme à l'une des revendications 1 à 7, pendant un laps de temps qui permet aux cellules d'augmenter en nombre de 25 %, 50 %, 75 % ou 100 % ou plus ;

    ii) le fait de faire incuber des cellules dans une formulation de milieu complet, conforme à l'une des revendications 1 à 7, durant au moins environ 30, 60, 90, 120 ou 240 minutes ou plus ;

    iii) ou le fait de faire incuber des cellules dans une formulation de milieu complet, conforme à l'une des revendications 1 à 7, durant au moins environ 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 12, 16, 20, 24, 36 ou 48 heures ou plus ;

    à l'exclusion des cellules souches totipotentes humaines.
13. Procédé conforme à la revendication 12, dans lequel les cellules comprennent :

    i) des cellules de mammifère,

    ii) des cellules primaires, secondaires ou passées de mammifère, ou des cellules immortalisées,

    iii) des cellules souches tissulaires, germinales ou adultes,

    iv) des cellules souches multipotentes,

    v) des cellules souches totipotentes non-humaines,

    vi) ou des cellules souches pluripotentes.
14. Procédé conforme à la revendication 13, dans lequel, dans le cas (iii), les cellules souches ou une majorité des cellules souches présentes dans le milieu survivent ou prolifèrent sans se différencier beaucoup, ou dans lequel, dans le cas (iii), les cellules souches ou une majorité des cellules souches présentes dans le milieu survivent ou prolifèrent sans se différencier beaucoup, pendant plusieurs passages.
15. Procédé conforme à la revendication 13, dans lequel, dans les cas (iv), (v) et (vi), les cellules souches survivent ou prolifèrent sans se différencier beaucoup.