HK1162119B

HK1162119B - Animal models and therapeutic molecules

Info

Publication number: HK1162119B
Application number: HK12102592.4A
Authority: HK
Inventors: Allan Bradley; E-Chiang Lee; Qi LIANG; Wei Wang
Original assignee: Kymab Limited
Priority date: 2009-07-08
Filing date: 2010-07-07
Publication date: 2013-09-06

Claims

Nicht-menschlicher Säuger, dessen Genom umfasst:
(a) eine Vielzahl menschlicher IgH-V-Regionen, eine oder mehrere menschliche D-Regionen und eine oder mehrere menschliche J-Regionen stromaufwärts einer nicht-menschlichen konstanten Säuger-Wirts-Region; und

(b) optional eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Kappa-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Kappa-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Kappa-Wirts-Region und/oder eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Lambda-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Lambda-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Lambda-Wirts-Region,
wobei der nicht-menschliche Säuger in der Lage ist, ein Repertoire chimärer Antikörper, oder chimärer schwerer Ketten und optional chimärer leichter Ketten, zu produzieren, die eine nicht-menschliche konstante Säuger-Region und eine menschliche variable Region aufweisen; wobei das nicht-menschliche Säugergenom, in das DNA insertiert wird, endogene V(D)J-Regionen umfasst, die nicht deletiert wurden, wobei der nicht-menschliche Säuger ein Nager ist, und wobei die Insertion der menschlichen Schwerketten-DNA zwischen der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Region und der letzten, 3', nicht-menschlichen Säuger-J-Region erfolgt. oder nicht-menschlicher Säuger, dessen Genom umfasst:
(a) eine Vielzahl menschlicher Ig-Leichtketten-Kappa-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Kappa-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Kappa-Wirts-Region und/oder eine Vielzahl menschlicher Ig-Leichtketten-Lambda-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Lambda-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Lambda-Wirts-Region; und

(b) optional eine oder mehrere menschliche IgH-V-Regionen, eine oder mehrere menschliche D-Regionen und eine oder mehrere menschliche J-Regionen stromaufwärts einer nicht-menschlichen Säuger-Wirts-Konstante;
wobei der nicht-menschliche Säuger in der Lage ist, ein Repertoire chimärer Antikörper, oder chimärer leichter Ketten, und optional chimärer schwerer Ketten zu produzieren, die eine nicht-menschliche konstante Säuger-Region und eine menschliche variable Region aufweisen, wobei das nicht-menschliche Säugergenom, in das DNA insertiert wird, endogene V(D)J-Regionen umfasst, die nicht deletiert wurden, wobei der nicht-menschliche Säuger ein Nager ist, und wobei die Insertion der menschlichen Kappa- oder Lambda-Ketten-DNA zwischen der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Region und der letzten, 3', nicht-menschlichen Säuger-J-Region erfolgt.
Nicht-menschliche Säugerzelle, deren Genom umfasst
(a) eine Vielzahl menschlicher IgH-V-Regionen, eine oder mehrere menschliche D-Regionen und eine oder mehrere menschliche J-Regionen stromaufwärts einer nicht-menschlichen konstanten Säuger-Wirts-Region und

(b) optional eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Kappa-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Kappa-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Kappa-Wirts-Region und/oder eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Lambda-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Lambda-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Lambda-Wirts-Region,
wobei das nicht-menschliche Säugergenom, in das DNA insertiert wird, endogene V(D)J-Regionen umfasst, die nicht deletiert wurden, wobei der nicht-menschliche Säuger ein Nager ist, und wobei die Insertion der menschlichen Schwerketten-DNA zwischen der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Region und der letzten, 3', nicht-menschlichen Säuger-J-Region erfolgt. oder nicht-menschliche Säugerzelle, deren Genom umfasst
(a) eine Vielzahl menschlicher Ig-Leichtketten-Kappa-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Kappa-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Kappa-Wirts-Region und/oder eine Vielzahl menschlicher Ig-Leichtketten-Lambda-V-Regionen und eine oder mehrere menschliche Ig-Leichtketten-Lambda-J-Regionen stromaufwärts der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Lambda-Wirts-Region; und

(b) optional eine oder mehrere menschliche IgH-V-Regionen, eine oder mehrere menschliche D-Regionen und eine oder mehrere menschliche J-Regionen stromaufwärts einer nicht-menschlichen konstanten Wirts-Region,
wobei das nicht-menschliche Säugergenom, in das DNA insertiert wird, endogene V(D)J-Regionen umfasst, die nicht deletiert wurden, wobei der nicht-menschliche Säuger ein Nager ist, und wobei die Insertion der menschlichen Kappa- oder Lambda-Ketten-DNA zwischen der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Region und der letzten, 3', nicht-menschlichen Säuger-J-Region erfolgt.
Säuger oder Zelle nach Anspruch 1 oder 2, dessen/deren Genom insertierte DNA einer menschlichen variablen Region aus einer menschlichen schweren und einer menschlichen leichten Kette umfasst, worin es
(a) eine Vielzahl menschlicher IgH-V-Regionen, eine oder mehrere menschliche D-Regionen und eine oder mehrere menschliche J-Regionen stromaufwärts einer nicht-menschlichen konstanten Wirts-Region gibt, und wobei die Insertion der menschlichen Leichtketten-DNA stromaufwärts einer nicht-menschlichen konstanten Säuger-Leichtketten-Region erfolgt, so dass eine chimäre leichte Kette in der Zelle produziert werden kann.
Zelle oder nicht-menschlicher Säuger nach Ansprüchen 1-3, wobei der Säuger eine Maus ist oder die Zelle eine Mauszelle ist und wobei die Insertion der menschlichen Schwerketten-DNA in einem Mausgenom zwischen den Koordinaten 114.667.091 und 114.665.190 des Mauschromosoms 12 erfolgt (Koordinaten beziehen sich auf NCBI m37, April 2007 ENSEMBL Release 55.37h für den Mausstamm C57BL/6J).
Zelle oder Säuger nach Ansprüchen 1-3, wobei das Zell- oder Säugergenom zum Verhindern oder Reduzieren der Expression vollständig wirtsspezies-spezifischer Antikörper modifiziert ist, optional wobei das nicht-menschliche Säugergenom durch Inversion der ganzen oder eines Teils der nicht-menschlichen Säuger-VDJ-Region, oder VJ-Region, modifiziert ist.
Zelle nach einem der Ansprüche 2-5, die eine ES-Zelle, hämatopoetische Stammzelle oder iPS-Zelle ist, die in der Lage ist, sich zu einem nicht-menschlichen Säuger zu entwickeln, oder in der Lage ist, zu Geweben und Organen eines nicht-menschlichen Säugers beizutragen, wobei der Säuger in der Lage ist, ein Repertoire von Antikörpern oder Antikörperketten zu produzieren, die chimär sind, wobei die chimären Antikörper oder Ketten eine nicht-menschliche konstante Säuger-Region und eine menschliche variable Region aufweisen.
Zelle nach einem der Ansprüche 2-5, die eine Antikörper-produzierende Zelle ist.
Zelle oder Säuger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, die/der insertierte DNA einer menschlichen variablen Region aus mindestens einer menschlichen schweren und einer menschlichen leichten Kette umfasst.
Zelle oder Säuger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei das Genom der Zelle keine DNA einer konstanten Region aus einer anderen Zelle oder einem anderen Organismus umfasst.
Zelle oder Säuger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, die/der eine Ratten-Wechselsequenz umfasst.
Zelle nach einem der Ansprüche 2-10, die immortalisiert ist.
Zelle nach Anspruch 11, die eine Antikörper-produzierende Zelle ist, die entweder durch Fusion an eine Tumorzelle zum Bereitstellen einer Antikörperproduzierenden Zelle und Zelllinie oder durch direkte zelluläre Immortalisation immortalisiert wurde.
Verfahren zum Produzieren eines Antikörpers oder einer schweren oder leichten Kette eines Antikörpers, der spezifisch für ein gewünschtes Antigen ist, wobei das Verfahren die Immunisierung eines nicht-menschlichen Säugers nach einem der vorhergehenden Ansprüche mit dem gewünschten Antigen und die Rückgewinnung des Antikörpers oder der Antikörperkette oder die Rückgewinnung einer Zelle, die den Antikörper oder die schwere oder leichte Kette produziert, umfasst.
Nicht-menschlicher Säuger, Zelle oder Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3 oder 5-13, wobei der nicht-menschliche Säuger oder die nicht-menschliche Zelle eine Maus bzw. Mauszelle ist.
Verfahren zum Produzieren eines vollständig humanisierten Antikörpers oder einer Antikörperkette, welches das Immunisieren eines nicht-menschlichen Säugers nach einem der Ansprüche 1, 3-5, 8-10 und 14 und anschließend das Ersetzen der nicht-menschlichen konstanten Säuger-Region eines Antikörpers oder einer chimären Antikörperkette, die spezifisch mit dem Antigen reagiert, durch eine menschliche konstante Region, optional mittels gentechnischer Herstellung der für den Antikörper oder die chimäre Antikörperkette kodierenden Nucleinsäure, umfasst.