HK1090093B - Method of selecting patients suitable for wt1 vaccine - Google Patents

Claims (16)

1. In vitro-Verfahren zur Auswahl eines Patienten, welcher stark auf einen WT1-Impfstoff reagiert, umfassend die folgenden Schritte (a) und (b):

   (a) Messung der Häufigkeit des Vorhandenseins oder der Menge von WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen in einer biologischen Probe, welche CTL-Vorläuferzellen aus einer Testperson enthält; und

   (b) Vergleich des in (a) gemessenen Werts mit dem einer gesunden Person und Auswertung der Empfindlichkeit auf den WT1-Impfstoff, wobei als Indikator verwendet wird, dass die Häufigkeit des Vorhandenseins oder die Menge von WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen aus (a) das 1,5-fache oder mehr als der Wert einer gesunden Person ist.
2. Verfahren gemäß Anspruch 1, wobei die Empfindlichkeit auf einen WT1-Impfstoff die Diagnose von Krebs ermöglicht.
3. Verfahren gemäß Anspruch 1 oder 2, wobei die Messung der Häufigkeit des Vorhandenseins oder der Menge der WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen durch ein beliebiges aus dem HLA-Monomer-Verfahren, HLA-Dimer-Verfahren, HLA-Tetramer-Verfahren, HLA-Pentamer-Verfahren, ELISPOT-Verfahren, der Echtzeit-RT-PCR-Technik und dem Grenzverdünnungs-Verfahren durchgeführt wird.
4. Verfahren gemäß Anspruch 3, wobei die Messung durch ein HLA-Tetramer-Verfahren durchgeführt wird.
5. Verfahren gemäß Anspruch 4, welches die folgenden Schritte (a), (b) und (c) umfasst:

   (a) Inkontaktbringen eines HLA-Tetramers, welches ein von WT1 abgeleitetes Tumorantigenpeptid enthält, mit einer biologischen Probe, welche CTL-Vorläuferzellen von einer Testperson enthält;

   (b) Messung der Häufigkeit des Vorhandenseins oder der Menge von WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen, welche an das HLA-Tetramer gebunden sind; und

   (c) Vergleich des in (b) gemessenen Werts mit dem Wert einer gesunden Person und Auswertung der Empfindlichkeit auf den WT1-Impfstoff, wobei der in (b) gemessene Wert das 1,5-fache oder mehr als der Wert einer gesunden Person ist.
6. Verfahren gemäß Anspruch 5, wobei die Empfindlichkeit auf den WT1-Impfstoff die Diagnose von Krebs ermöglicht.
7. Verfahren zur Identifizierung eines Zielmoleküls des WT1-Impfstoffs, welches spezifisch für einen Patienten ist, umfassend die folgenden Schritte (a), (b) und (c):

   (a) Anwendung jedes der mehrfachen Zielmoleküle des WT1-Impfstoffs auf eine biologische Probe, welche CTL-Vorläuferzellen aus einem Testpatienten enthält;

   (b) Messung der Häufigkeit des Vorhandenseins oder der Menge von WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen in den jeweiligen biologischen Proben aus (a) und Vergleich der Ergebnisse miteinander; und

   (c) Identifizierung des Zielmoleküls, welches in (b) den höchsten Wert zeigte, als das Zielmolekül des WT1-Impfstoffs, welches bei dem Testpatienten wirksam ist.
8. Identifizierungsverfahren gemäß Anspruch 7, wobei die Messung der Häufigkeit des Vorhandenseins oder der Menge der WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen durch ein beliebiges aus dem HLA-Monomer-Verfahren, HLA-Dimer-Verfahren, HLA-Tetramer-Verfahren, HLA-Pentamer-Verfahren, ELISPOT-Verfahren, der Echtzeit-RT-PCR-Technik und dem Grenzverdünnungs-Verfahren durchgeführt wird.
9. Identifizierungsverfahren gemäß Anspruch 8, wobei die Messung durch ein HLA-Tetramer-Verfahren durchgeführt wird.
10. Identifizierungsverfahren gemäß Anspruch 9, welches die folgenden Schritte (a), (b) und (c) umfasst:

    (a) Inkontaktbringen jedes der mehrfachen HLA-Tetramere, welche verschiedene, von WT1 abgeleitete Tumorantigenpeptide enthalten, mit einer biologischen Probe, welche CTL-Vorläuferzellen aus einem Testpatienten enthält;

    (b) Messung der Häufigkeit des Vorhandenseins oder der Menge von WT1-spezifischen CTL-Vorläuferzellen, welche an die jeweiligen HLA-Tetramere gebunden sind, und Vergleich der Ergebnisse miteinander; und

    (c) Identifizierung des von WT1 abgeleiteten Tumorantigenpeptids, das in dem HLA-Tetramer enthalten ist, welches in (b) den höchsten Wert zeigte, als das von WT1 abgeleitete Tumorantigenpeptid, welches bei dem Testpatienten wirksam ist.
11. Verfahren gemäß Anspruch 5, 6 oder 10, wobei der Schritt (b) durch die Messung des Anteils der an das HLA-Tetramer gebundenen Zellen unter den CD8-positiven oder CD8/CD3-positiven CTL-Vorläuferzellen oder CTLs durchgeführt wird.
12. Verfahren gemäß Anspruch 1 oder 2, wobei die CTL-Vorläuferzellen CTL-Vorläuferzellen vom Effektor-Typ sind.
13. Verfahren gemäß Anspruch 12, welches die folgenden Schritte (a), (b) und (c) umfasst:

    (a) Inkontaktbringen eines HLA-Tetramers, welches ein von WT1 abgeleitetes Tumorantigenpeptid, einen Anti-CD8-Antikörper, einen Anti-CD45RA-Antikörper und einen Anti-CD27-Antikörper umfasst, mit einer biologischen Probe, welche CTL-Vorläuferzellen aus einer Testperson enthält;

    (b) Messung des Anteils der CD45RA-positiven und CD27-negativen CTL-Vorläuferzellen vom Effektor-Typ unter den CTL-Vorläuferzellen, die positiv für CD8 oder CD8/CD3 und positiv für die Bindung an ein HLA-Tetramer sind; und

    (c) Vergleich des in (b) gemessenen Ergebnisses mit dem Ergebnis einer gesunden Person und Auswertung der Empfindlichkeit auf einen WT1-Impfstoff, wobei der in (b) gemessene Wert das 1,5-fache oder mehr als der Wert einer gesunden Person ist.
14. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 4 bis 6 und 9 bis 12, wobei das HLA-Antigen als Bestandteil eines HLA-Tetramers ein HLA-A24-Antigen oder ein HLA-A2-Antigen ist.
15. Verfahren gemäß Anspruch 14, wobei das von WT1 abgeleitete Tumorantigenpeptid aus den folgenden Peptiden ausgewählt ist:

    Cys Met Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEQ ID NO: 2);

    Cys Tyr Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEQ ID NO: 3); und

    Arg Tyr Pro Ser Cys Gln Lys Lys Phe (SEQ ID NO: 5).
16. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 15, welches mittels Durchflusscytometrie durchgeführt wird.