HK1089685B - Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor - Google Patents

Claims (21)

1. Granulozyten-Kolonie stimulierender Faktor-Peptid umfassend die Gruppe: wobei

   D ein Element ausgewählt aus -OH und R¹-L-HN- ist;

   G ein Element ausgewählt aus R¹-L- und -C(O)(C₁-C₆)Alkyl ist;

   R¹ eine Struktur aufweist, die ein Element ist ausgewählt aus: wobei

   e, f und f' Ganzzahlen unabhängig ausgewählt aus 1 bis 2500 sind; und

   q, q' und q" Ganzzahlen unabhängig ausgewählt aus 1 bis 20 sind; und

   L ein Linker ist, der ein Element ausgewählt aus einer Bindung, substituiertem oder unsubstituiertem Alkyl und substituiertem oder unsubstituiertem Heteroalkyl ist,

   sodass wenn D gleich OH dann G gleich R¹-L- ist, und wenn G gleich -C(O)(C₁-C₆)Alkyl dann D gleich R¹-L-NH- ist.
2. Peptid gemäß Anspruch 1, wobei L-R¹ die Formel aufweist: wobei a eine Ganzzahl von 0 bis 20 ist.
3. Peptid gemäß einem der vorangehenden Ansprüche, wobei genannte Gruppe die Formel hat:
4. G-CSF Peptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei genannte Gruppe die Formel aufweist:
5. G-CSF Peptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei genannte Gruppe die Formel aufweist: wobei AA ein Aminosäurerest des genannten Peptids ist.
6. Peptid gemäß Anspruch 5, wobei genannter Aminosäurerest Serin oder Threonin ist.
7. Peptid gemäß Anspruch 5 oder Anspruch 6, das die Aminosäuresequenz von SEQ. ID. NR: 1 umfasst.
8. Peptid gemäß Anspruch 7, wobei genannter Aminosäurerest Threonin an Position 133 3 von SEQ. ID. NR: 1 ist.
9. Peptid gemäß einem der vorangehenden Ansprüche, das eine Aminosäuresequenz ausgewählt von SEQ. ID. NR: 1 und SEQ ID NR: 2 umfasst.
10. Peptid gemäß einem der vorangehenden Ansprüche, das eine Gruppe der Formel umfasst: wobei

    a, b, c, d, i, r, s, t, und u Ganzzahlen unabhängig ausgewählt aus 0 und 1 sind; q gleich 1 ist;

    e, f, g, und h Elemente unabhängig ausgewählt aus den Ganzzahlen aus 0 bis 6 sind;

    j, k, l, und m Elemente unabhängig ausgewählt aus den Ganzzahlen aus 0 und 100 sind;

    v, w, x, und y unabhängig ausgewählt sind aus 0 und 1, und mindestens einer von v, w, x und y gleich 1 ist;

    AA ein Aminosäurerest des genannten Peptids ist;

    Sia-(R) eine Gruppe der Formel ist:
11. Peptid gemäß Anspruch 10, wobei genannter Aminosäurerest ein Asparaginrest ist.
12. Peptid gemäß einem der vorangehenden Ansprüche wobei genanntes Peptid ein bioaktives Granulozyten-Kolonie stimulierender Faktor-Peptid ist.
13. Verfahren zur Herstellung eines G-CSF Peptid-Konjugates umfassend die Gruppe: wobei

    D ein Element ausgewählt aus -OH und R¹-L-HN- ist;

    G ein Element ausgewählt aus R¹-L- und -C(O)(C₁-C₆)Alkyl ist;

    R¹ eine Struktur aufweist, die ein Element ist ausgewählt aus: wobei

    e, f und f Ganzzahlen unabhängig ausgewählt aus 1 bis 2500 sind; und

    q, q' und q" Ganzzahlen unabhängig ausgewählt aus 1 bis 20 sind; und

    L ein Linker ist, der ein Element ausgewählt aus einer Verbindung, substituiertem und unsubstituiertem Alkyl und substituiertem oder unsubstituiertem Heteroalkyl ist,

    sodass wenn D gleich OH ist, G gleich R¹-L- ist, und wenn G gleich -C(O)(C₁-C₆)Alkyl ist, D gleich R¹-L-NH- ist,

    genanntes Verfahren umfassend:

    (a) Kontaktieren eines Substrates eines G-CSF Peptids mit einer PEG-Sialinsäure Donor Gruppe, die Formel aufweisend: mit einem Enzym, das genannte PEG-Sialinsäure auf eine Aminosäure oder einen Glycosylrest des genannten G-CSF-Peptids überträgt, unter Bedingungen, die geeignet für diese Übertragung sind.
14. Verfahren gemäß Anspruch 13, wobei L-R¹ die Formel hat: wobei a eine Ganzzahl aus 0 bis 20 ist.
15. Verfahren gemäß Anspruch 13 oder 14, ferner vor Schritt (a) umfassend:

    (b) Exprimieren des genannten Substrat Granulozyten-Kolonie stimulierender Faktor-Peptides in einem geeigneten Wirt.
16. Verfahren gemäß Anspruch 15, wobei genannter Wirt ausgewählt ist aus einer Insektenzelle und einer Säugerzelle.
17. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 13 bis 16, das ferner Formulieren des Peptids in eine pharmazeutische Formulierung umfasst.
18. Verwendung eines Peptids gemäß einem der Ansprüche1 bis 12, zur Herstellung von einem Medikament zur Stimulierung der entzündlichen Leukozytenproduktion in einem Säugetier.
19. Verwendung von einem Peptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 12, zur Herstellung von einem Medikament zur Behandlung von Infektionen.
20. Pharmazeutische Formulierung umfassend ein Peptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 12 und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger.
21. Peptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 12 zur therapeutischen Verwendung.