HK1070669B - Growth hormone fusion protein - Google Patents

Claims (21)

1. Ein Fusionsprotein, umfassend eine translationale im-Rahmen-Fusion von:

   i) einer modifizierten Bindungsdomäne des Wachstumshormons, wobei die Modifikation die Substitution des Aminosäurerestes Glycin 120 in Figur 12 für Arginin oder Lysin ist; und

   ii) einem Teil des Wachstumhormonrezeptors [GHR], umfassend die C-terminale SD100 Domäne von GHR.
2. Ein Fusionsprotein gemäß Anspruch 1, wobei die Substitution Glycin 120 für Arginin ist.
3. Ein Fusionsprotein nach Anspruch 1 oder 2, wobei der Teil des Wachstumshormonrezeptors (GHR) die extrazelluläre Domäne von GHR ist.
4. Ein Fusionsprotein nach irgendeinem der Ansprüche 1-3, wobei die modifizierte Bindungsdomäne von GH mittels eines Linkers mit der GH Bindungsdomäne von GHR verknüpft ist.
5. Ein Fusionsprotein nach Anspruch 4, wobei der Linker ein Polypeptid ist, welches 5 bis 30 Aminosäurereste umfasst.
6. Ein Fusionsprotein nach Anspruch 5, wobei der Linker 10 bis 20 Aminosäurereste umfasst.
7. Ein Fusionsprotein nach Anspruch 4 oder 5, wobei der Linker wenigstens eine Kopie des Peptids Gly Gly Gly Gly Ser umfasst.
8. Ein Nukleinsäuremolekül, das für ein Fusionspolypeptid nach irgendeinem der Ansprüche 1-7 kodiert.
9. Ein Vektor, umfassend das Nukleinsäuremolekül nach Anspruch 8.
10. Ein Vektor nach Anspruch 9, wobei der Vektor ein Expressionsvektor ist, angepasst für eine rekombinante Expression.
11. Ein Fusionsprotein nach irgendeinem der Ansprüche 1-7 zur Verwendung als Arzneimittel.
12. Ein Fusionsprotein nach irgendeinem der Ansprüche 1-7 zur Verwendung bei der Behandlung eines Zustandes, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:

    Gigantismus; Akromegalie; Krebs; Wilm's Tumor, osteogenes Sarkom, Brust-, Colon-, Prostata-, Schilddrüsenkrebs; diabetische Retinopathie; diabetische Nephropathie; diabetische Komplikationen und jegliche Erkrankungen mit GH Erhöhung.
13. Ein Fusionsprotein nach Anspruch 12 zur Verwendung bei der Behandlung von Akromegalie.
14. Eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend ein Fusionsprotein gemäß irgendeinem der Ansprüche 1-7.
15. Eine Zelle, die mit der Nukleinsäure oder Vektor gemäß irgendeinem der Ansprüche 8-10 transformiert oder transfiziert ist.
16. Eine Zelle nach Anspruch 15, wobei die Zelle eine eukaryontische Zelle ist, welche ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: einem Schleimpilz, Dictyostelium spp, einer Hefezelle, Saccharomyces cerevisae, Pichia spp; einer Säugerzelle, Ovarialzelle des chinesischen Hamsters; einer Pflanzenzelle; eine Insektenzelle, Spodoptera spp.
17. Eine Zelle nach Anspruch 15, wobei die Zelle eine prokaryontische Zelle ist.
18. Ein Verfahren zum Herstellen eines Fusionsproteins nach irgendeinem der Ansprüche 1-7, umfassend:

    i) zur Verfügung stellen einer Zelle nach irgendeinem der Ansprüche 15-17;

    ii) Inkubieren der Zelle unter Bedingungen, die zur Produktion des Fusionsproteins führen; und gegebenenfalls

    iii) Isolieren des Fusionsproteins aus der Zelle oder dem Zellkulturmedium.
19. Ein Verfahren nach Anspruch 18, wobei das Fusionsprotein zur Verfügung gestellt wird mit einem Sekretionssignal, um die Reinigung des Fusionsproteins aus der Zelle zu erleichtern.
20. Ein Verfahren nach Anspruch 19, wobei das Fusionsprotein zur Verfügung gestellt wird mit einem Affinitätsmarker, um die Reinigung des Fusionsproteins aus der Zelle oder dem Zellkulturmedium zu erleichtern.
21. Ein Fusionsprotein nach Anspruch 1, welches eines translationale im-Rahmen-Fusion umfasst von:

    i) einem modifizierten Wachstumshormon, wobei die Modifikation eine Substitution ist von : Histidin 18 mit Asparaginsäure, Histidin 21 mit Asparagin, Glycin 120 mit Arginin, Arginin 167 mit Asparagin, Lysin 168 mit Alanin, Asparaginsäure 171 mit Serin, Lysin 172 mit Arginin, Glutaminsäure 174 mit Serin und Isoleucin 179 mit Threonin; und

    ii) einem Teil des Wachstumshormonrezeptors [GHR], umfassend die C-terminale SD100 Domäne von GHR.