DE1263762B - Verfahren zur Herstellung von Steroidguanylhydrazonen - Google Patents

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Int. Cl.:

C 07c

Deutsche Kl.: 12 ο-25/02

Nummer: 1263 762

Aktenzeichen: F 42668IV b/12 ο

Anmeldetag: 20. April 1964

Auslegetag: 21. März 1968

Gegenstand des deutschen Patents 1 227 015 und der deutschen Patentanmeldung F 42053 IV b/12 ο (deutsche Auslegeschrift 1 257 139) sind Verfahren zur Herstellung von harzwirksamen Guanylhydrazonen von 20-Ketosteroiden.

Es wurde nun gefunden, daß man Verbindungen mit einer Herzwirkung auch erhält, wenn man Steroide, die in der 17-ständigen Seitenkette eine Keto- oder Aldehydgruppen enthalten, wobei die 20-Stellung ausgenommen ist, in ein Guanylhydrazon überführt.

Unter Steroiden, die in der 17-ständigen Seitenkette eine Keto- oder Aldehydgruppe enthalten, sollen hier gesättigte und ungesättigte nor-, homo- und cyclo-Verbindungen verstanden werden, die, was die sterischen Verhältnisse betrifft, an den Ringen A/B, ß/C und C/D eis- oder trans-verknüpft sein können, deren einzelne C-Atome des Steroidgerüsts durch Heteroatome, wie N, O oder S, ersetzt sein können, die in beliebiger Stellung durch Reste, wie OH, O-Alkyl, O-Acyl, O-Sulfonyl, Phosphoryl, Epoxy, O — NO, O — NO₂, NO, NO₂, CN, Halogen, Alkyl, Alkenyl, Alkinyl, Acyl, Cycloalkyl, Aryl, SH, S-Alkyl, S-Acyl, Amido oder Sulfonamido, substituiert sein oder in beliebigen Stellungen ankondensierte cycloaliphatische, aromatische oder heterocyclische Ringe haben können, und die in 17-Stellung des Steroidmoleküls eine gesättigte oder ungesättigte verzweigte oder unverzweigte Alkylkette beliebiger Länge mit einer Keto- oder Aldehydgruppe, ausgenommen in 20-Stellung, enthalten. Diese Kette kann durch Heteroatome, wie N, S oder O, unterbrochen und durch Substituenten, wie OH, O-Acyl, Cycloalkyl oder Aryl, substituiert sein.

Die neuen Verbindungen werden erfindungsgemäß hergestellt, indem man ein Steroid, das in der 17-ständigen Seitenkette eine Keto- oder Aldehydgruppe enthält, wobei die 20-Stellung ausgenommen ist, in an sich bekannter Weise entweder a) mit Aminoguanidin oder einem Salz desselben umsetzt oder b) mit einem S-Alkylisothiosemicarbazid reagieren und auf das Kondensationsprodukt Ammoniak einwirken läßt.

Die erfindungsgemäß herstellbaren Substanzen sind als solche oder in Form ihrer Salze mit nichttoxischen organischen oder anorganischen Säuren, z. B. Essigsäure, Propionsäure, Milchsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure, Zitronensäure, SaIicylsäure, Naphtharin-l,5-disuhOnsäure, Phosphorsäure oder Salzsäure, herzwirksam.

Geeignete Ausgangsmaterialien für das erfindungsgemäße Verfahren sind z. B.:

24-Keto-cholesterin, 3/3-Acetoxy-^d ^s-cholen-24-al,
3Ä,12«-Dihydroxy-cholan-24-al,

Verfahren zur Herstellung von
Steroidguanylhydrazonen

Anmelder:

Farbenfabriken Bayer Aktiengesellschaft,

5090 Leverkusen

Als Erfinder benannt:

Dr. Karlheinz Meyer,

Dr. Siegismund Schütz,

5600 Wuppertal-Elberfeld;

Dr. Kurt Stoepel, 5600 Wuppertal-Vohwinkel;

Dr. Hans-Günther Kroneberg,

5600 Wuppertal-Elberfeld

3/?-Formoxy-zl ⁵-cholen-24-al,
3/9-Hydroxy-24-keto-24-p-anisyl-/l⁶-cholen,
3^-Hydroxy-24-keto-24-phenyl-Zl⁶-cholen,
3-Acetoxy-bisnor-Zl⁵-cholenaldehyd,
3-Methoxy-bisnor-J⁵-cholenaldehyd,
3-Benzyloxy-bisnor-/l⁵-cholenaldehyd,
24-Keton des 28-nor-Cycloeucalenols,
24-Keton des 28-nor-Euphorbols,
3-Acetoxy-20-acetyl-Zl ⁵-pregnen,
16,22-Epoxynorcoprostan-3«-ol-25-on,
16,22-Epoxynorcoprostan-3«-acetoxy-25-on,
16,22-Epoxycholan-3«-acetoxy-24-al.

Beispiel 1

1,65 g 3-Hydroxy-bisnor-/J⁵-cholenaldehyd werden in 20 ml absolutem Methanol gelöst und mit einer Lösung von 750 mg Amino-guanidin-hydrogencarbonat in methanolischer Salzsäure versetzt. Die klare Reaktionslösung wird unter N₂ bei Raumtemperatur Stunden gerührt und anschließend in trockenen Äther eingetropft. Der farblose, kristalline Niederschlag wird abgesaugt und einmal aus Methanol— Äther umgelöst. Das Guanylhydrazonhydrochlorid des 3-Hydroxy-bisnor-/l^s-cholenaldehyds schmilzt bei 27O⁰C.

Beispiel 2

8,5 g Lanosterin, gelöst in 300 ml Essigester und ml Pyridin, werden bei -23⁰C ozonisiert (101 O₂ je

809 519/694

3 4

Stunde Strömungsgeschwindigkeit; Dauer 60 Minuten Bei Nebennierensteroiden und bei Progesteron

= 1440 mg O₃). Nach Herauswaschen des Pyridine wurden zwar bereits Wirkungen auf den Herzmuskel mittels Wasser wird die Lösung mit 1 g Pd/CaCO₃ und gefunden (vgl. Journ. Pharmacol, exp. Therapie, 131 Wasserstoff bei Raumtemperatur hydriert. Der Kata- [1961], S. 56 und 124 [1958], S. 59, sowie Can. Journ. lysator wird sodann abfiltriert und die Lösung bis zur 5 Med. Sei. 30 [1952], S. 325).

Trockene im Vakuum- eingeengt. Es verbleibt ein Die positiv inotropen Wirkungen dieser Verbin-

schmieriger, hellgelber Rückstand, der das als Aus- düngen am Herzen oder bestimmten Herzmuskelabgangsverbindung dienende 25,26,27-Trisnor-/! ^s-lano- schnitten (Vorhof, Papillarmuskel) sind jedoch sehr sten-24-al enthält und der in 150 ml absolutem Metha- schwach und nur in relativ hohen Konzentrationen und nol gelöst wird. Nach Zusatz von 2 g Aminoguanidin- io unter besonderen experimentellen Bedingungen nachhydrogencarbonat in methanolischer HCl fällt eine zuweisen. Infolgedessen steht bei ihrer therapeutischen farblose, kristalline Substanz aus. Die Suspension wird Verwendung die spezifische Hormonwirkung auf den etwa 60 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der ab- Elektrolytstoffwechsel oder die Uterusschleimhaut im gesaugte Niederschlag ist nicht das gewünschte Pro- Vordergrund. Die pharmakologisch zwar nachweisdukt. Das Filtrat wird in Äther eingerührt. Es fällt nur 15 bare und offenbar vorteilhafte Herzwirkung tritt bei eine geringe Menge bräunlich flockige Substanz aus. der praktischen Anwendung nicht in Erscheinung. Die Ätherlösung wird bis zur Trockene eingeengt, es Demgegenüber hat es sich nun gezeigt, daß durch die verbleibt eine halbfeste, gelbe Substanz, welche aus erfindungsgemäße Einführung eines Guanylhydrazon-Methanol—Äther umgefällt wird und für die Analyse restes in die 17-ständige Seitenkette des Steroidmolenoch zweimal mit Aceton ausgekocht wird. Das hell· 20 küls diese bei den Ausgangssubstanzen bestenfalls angelbe, kristalline Hydrochlorid des 25,26,27-Trisnor- . gedeutete Herzwirkung erheblich verstärkt und quali- Δ ⁸-lanosten-24-guanylhydrazons hat einen Festpunkt tativ und quantitativ derart günstig verändert wird, von 264⁰C. _; daß eine Verwendung der Verfahrensprodukte als

Für die Herstellung der Ausgangsverbindung wird Arzneimittel für die Therapie von Herzerkrankungen im Rahmen der vorliegenden Erfindung kein Schutz 25 möglich ist.

begehrt. Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen

τ, . -ίο zeigten bei pharmakologischen Untersuchungen spezi-

^{e 1 s} P * fische Herzwirkungen im Sinne eines die Kontraktions-

5,2 g 3«,12«-Diformoxy-Zl⁵-cholen-24-al werden in kraft der Herzmuskulatur steigernden Effekts.
20 ml absolutem Methanol gelöst und mit einer Lösung 30 Diese positiv inotrope Herzmuskelwirkung konnte von 1,6 g Amino-guanidin-H₂CO₃ in methanolischer am isolierten spontan schlagenden Herzvorhofpräparat HCl versetzt. Die hellgelbe Lösung rührt man 60 Stun- des Meerschweinchens nachgewiesen werden. Methode den bei Raumtemperatur. Beim Eintropfen der Lösung s. Holtz, P. u. E. Westermann, Naunynin trockenen Äther entsteht eine zähe, dunkelgelbe Schmiedebergs Arch. exp. Path. u. Pharmak., 225 Substanz, welche durch wiederholtes Anreiben mit 35 (1955), S. 421, sowie G. Kroneberg und K. S t ο e Äther zur Kristallisation gebracht wurde. Die Sub- (1955), S. 421, sowie G. Kroneberg und K. S t ο e stanz wurde konzentriert in Wasser gelöst und mit pel, Naunyn-Schmiedebergs Arch. exp. Path. u. konzentrierter NaOH-LÖsung versetzt. Der flockige Pharmak., 249 (1964), S. 394.

Niederschlag wird in Butanol aufgenommen, das Die positiv inotrope Grundwirkung von Herzmit-

Lösungsmittel abgezogen, der Rückstand in metha- 4° teln wird nach neueren Untersuchungen von nolischer HCl gelöst und in Äther gerührt. Das hell- K. Repke und H. J. Portius, Experientia, 19 gelbe, kristalline Hydrochlorid des 3<x,12a-Dihydroxy- (1963), S. 452, auf die Hemmung der Transport-ATPase Δ ^s-cholen-24-guanylhydrazons sintert ab 95⁰C. in der Herzmuskelzelle zurückgeführt. Diese Hemm

wirkung konnte bei den erfindungsgemäß hergestellten

Beispiel4 ^4S Verbindungen ebenfalls nachgewiesen werden. Gewin

nung der K⁺-, Na⁺-, Mg⁺⁺-aktivierbaren Transport-

1,7 g 3-Hydroxy-bisnor-Zl⁵-cholenaldehyd werden in ATPase aus Meerschweinchenherzen nach T. K ο η ο 25 ml absolutem Äthanol gelöst, mit einer Lösung von und S. P. C ο 11 ο w i c k, Arch. Biochem. Biophys., 0,7 g S-Methyl-isothiosemicarbazid-hydrochlorid in 93 (1961), S. 520 bis 533. Bestimmung der Enzymmethanolischer Salzsäure versetzt und 24 Stunden 5° aktivität nach J. V. Auditore, Proc. Soc. exp. unter Stickstoff bei Raumtemperatur gerührt. Dann Biol. Med., 110 (1962), S. 595 bis 597. Angabe der tropft man in trockenen Äther ein, saugt den Nieder- Wirksamkeit eines Präparats in Prozent Hemmung der schlag ab und wäscht mit Äther nach. Ausgangsaktivität.

1,5 g Hydrochlorid des 3-Hydroxy-bisnor-zl^s-cho-

len-22-(S-methyl-isothiosemicarbazons), Fp. 165 bis 55 , , .

68⁰C (Zersetzung). Untersuchungsergebnisse:

Diese Substanz wird in 30 ml Äthanol gelöst, mit 3-Hydroxy-23,24-bisnor-ZI«-cholen-

70 ml erner alkoholischen Ammoniaklosung versetzt 22-guanylhydrazon-hydrochlorid

und 12 Stunden unter Ruckfluß erhitzt. Dann dampft

man im Vakuum zur Trockene ein, verreibt den Rück- 60 Tc-xrzität Maus:
stand mit wenig Wasser und trennt das Unlösliche ab. 12 bis 16 mg/kg i. v.

Dieses wird nach dem Trocknen in wenig Äthanol ge- _TT , „ , , . ,

löst, mit ätherischer Salzsäure bis zur eben sauren Herzvorhof, Meerschweinchen:
Reaktion versetzt und die Lösung in Äther eingerührt. ?^osativ ™*«>pe Herzmuskelwirkuog ab Konzen-

Der farblose, kristalline Niederschlag wird abgesaugt 65 Nationen von 10"⁶ g/ml. Umschlag zu negativ und einmal aus Methanol-Äther umgelöst. inotroper Wirkung mit Herzmuskelkontraktur bei

0,8 g Hydrochlorid des 3-Hydroxy-bisnor-zl ⁵-cholen- Konzentrationen von 10-* g/ml.

22-guanylhydrazons, Fp. 267 bis 69° C. . ATPase-Hemmung: 1 · IO-⁵ m — 61% Hemmung.

Claims (1)

1. 5 6

   3,12-Dihydroxy-Zi ^B-cholen-24-guanylhydrazon- Patentanspruch:

   hydrochlorid Verfahren zur Herstellung von Steroidguanyl-

   hydrazonen, dadurch gekennzeichnet,

   Toxizität Maus: daß man ein Steroid, das in der 17-ständigen Seiten-

   30 bis 40 mg/kg i. v. 5 kette eine Keto- oder Aldehydgruppe enthält, wobei die 20-Stellung ausgenommen ist, in an sich

   Herzvorhof Meerschweinchen: bekannter Weise entweder a) mit Aminoguanidin Positiv inotrope Herzmuskelwirkung ab Konzen- oder einem Salz desselben umsetzt oder b) mit trationen von 3 · 10~^e g/ml. Umschlag zu negativ einem S-Alkylisothiosemicarbazid reagieren und inotroper Wirkung mit Herzmuskelkontraktur bei io auf das Kondensationsprodukt Ammoniak einKonzentrationen von 10~^s g/ml. wirken läßt.

   809 519/694· 3.68 © Bundesdruckerei Berlin