CN103004603A - 一种蝴蝶兰品种的植株再生方法 - Google Patents
一种蝴蝶兰品种的植株再生方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103004603A CN103004603A CN201210577538XA CN201210577538A CN103004603A CN 103004603 A CN103004603 A CN 103004603A CN 201210577538X A CN201210577538X A CN 201210577538XA CN 201210577538 A CN201210577538 A CN 201210577538A CN 103004603 A CN103004603 A CN 103004603A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bud
- days
- protocorm
- phalaenopsis
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 title claims abstract description 31
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 240000002292 Psychopsis papilio Species 0.000 title 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 19
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 22
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 9
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 9
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims description 4
- 235000020197 coconut milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 claims description 3
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 7
- 244000127818 Phalaenopsis amabilis Species 0.000 claims 6
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 claims 2
- 238000004080 punching Methods 0.000 claims 2
- ZKQDCIXGCQPQNV-UHFFFAOYSA-N Calcium hypochlorite Chemical class [Ca+2].Cl[O-].Cl[O-] ZKQDCIXGCQPQNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 claims 1
- 235000021015 bananas Nutrition 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 claims 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims 1
- 229960002523 mercuric chloride Drugs 0.000 claims 1
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 claims 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 claims 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims 1
- 241001505935 Phalaenopsis Species 0.000 abstract description 41
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003086 colorant Substances 0.000 abstract description 6
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 5
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 16
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 4
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 4
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 2
- 241001453636 Salvinia Species 0.000 description 2
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 235000020415 coconut juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 description 2
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000012882 rooting medium Substances 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 235000017375 Brosimum guianense Nutrition 0.000 description 1
- 244000097582 Cecropia peltata Species 0.000 description 1
- 235000010884 Cecropia peltata Nutrition 0.000 description 1
- 239000005747 Chlorothalonil Substances 0.000 description 1
- 235000007516 Chrysanthemum Nutrition 0.000 description 1
- 244000189548 Chrysanthemum x morifolium Species 0.000 description 1
- 244000178870 Lavandula angustifolia Species 0.000 description 1
- 235000010663 Lavandula angustifolia Nutrition 0.000 description 1
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 241000736285 Sphagnum Species 0.000 description 1
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 1
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 235000021167 banquet Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- NNBFNNNWANBMTI-UHFFFAOYSA-M brilliant green Chemical compound OS([O-])(=O)=O.C1=CC(N(CC)CC)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](CC)CC)C=C1 NNBFNNNWANBMTI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- CRQQGFGUEAVUIL-UHFFFAOYSA-N chlorothalonil Chemical compound ClC1=C(Cl)C(C#N)=C(Cl)C(C#N)=C1Cl CRQQGFGUEAVUIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000001102 lavandula vera Substances 0.000 description 1
- 235000018219 lavender Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000008262 pumice Substances 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000010331 tianhuang Substances 0.000 description 1
- 239000010891 toxic waste Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
本发明公开了一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，属于蝴蝶兰栽培领域。选取蝴蝶兰品种植株上长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过茎尖2~3周的诱导培养，25~30天逐渐形成原球茎，不断分割进行继代加速繁殖，将1厘米高的幼苗移入壮苗培养基上培养3~6个月，20～25天诱导生根后长到8~10厘米高即可进行移栽，成活率高达95%以上；苗木成活后生长健壮，长势良好。本发明可以使优质蝴蝶兰品种在短时间内建立无菌株系进行大量产业化生产，并可以周年生产，繁殖速度快，为消费者提供各种颜色新、鲜、香、艳花朵造型一致的产品；为企业提供技术含量高的生产技术，使其植株大小一致，便于花期控制和产业化统一管理，降低企业生产成本，带来了巨大的经济效益。
Description
技术领域
本发明属于蝴蝶兰植株快速繁殖技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰品种的植株再生方法。
背景技术
蝴蝶兰又称蝶兰，属蝶科兰属，是一种多年生单茎性附生兰，原产于亚洲，主要分布在菲律宾、马来半岛及我国台湾省。蝴蝶兰属是著名的切花种类, 其株型美观茎短，叶大，花茎一至数枚，拱形，花大，花期持久其花形如彩蝶飞舞，色彩艳丽，因花形似蝶得名。其花姿优美，颜色华丽，为热带兰中的珍品，有“兰中皇后”之美誉，是兰科植物中栽培最广泛、最普及的种类之一. 全世界原生种约有70多种，经杂交选育的品种有530多个，但原生种的观赏性较差。商业上用于大规模生产的品种多为杂交种，其品种多，花期长，深受人们的喜爱。蝴蝶兰的学名按希腊文的原意为“好像蝴蝶般的兰花”。它固能吸收空气中的养分而生存，归入气生兰范畴，可说是热带兰花中的一个大族。它的植株非常奇特，既无匍匐茎，也无假球茎。每棵只长出数张活象汤匙般肥厚的阔叶，交互叠列在基部之上。白色粗大的气根则露在叶片周围，有的攀附在花盆的外壁，极富天然野趣。到了新春时节，一枝长达盈尺的花梗就从叶腋抽出，然后一朵接一朵地开放。每花均有5暮，中间嵌镶唇瓣。
其生长习性喜高温、高湿、半阴环境，越冬温度不低于18度。由于蝴蝶兰原产于热带雨林地区，本性喜暖畏寒。生长适温为15～20℃，冬季10C以下就会停止生长，低于5℃容易死亡。在岭南各地如要进行批量生产，必须要有防寒设施，实行保护性栽培。如果家庭小量种植，在遇冷时立即移入室内便可以安全过冬。对它的繁殖大多采用细胞组织培养，经试管育成幼苗移栽，大约经过两年左右便可开花。有些母株当花期结束后，有时花梗上的腋芽也会生长发育成为子株，当它长出根时可从花梗上切下进行分株繁殖。其盆栽的植料不宜用泥土，而要采用水苔、浮石、桫椤屑、木炭碎等，或者直接把幼苗固定在渺楞板（又称蛇木）上，让它自行附着生长。这种栽培方法乃系仿照它在原始时的生态环境。当它开花时把整块板子挂在墙上观赏，确实别有一番韵味。蝴蝶兰的气根颇多，其根尖翠绿，相当敏感，要细心加以保护，切不可触动损伤，否则，就好像打坏了人的嘴巴，要正常进食就困难了。蝴蝶兰喜欢潮湿和半阴的环境，要求空间经常保持湿度50％～70％，盆内不能淋水过多。如果种于家居阳台，在晴日最好每天洒湿地面三四次，让它的植株能吸收蒸发的水分。在夏秋季节不能让阳光直射。但早上的朝阳对它生长最好，应充分加以利用。如果春季阴雨天过多，晚上要用光管给它增加光照，以利日后开花。蝴蝶兰对病虫害的抵抗力较弱，经常会发生叶斑病和根腐病，可采用农药百菌清或达仙冲1000倍溶液喷射，每隔七八天喷1次，连喷3次。这些药液沾在叶上留有白色痕迹，可不必抹去，以利于继续发挥杀菌作用。
蝴蝶兰的花色鲜艳夺目，既有纯白、鹅黄。绊红、也有淡紫、橙赤和蔚蓝。有不少品种兼备双色或三色，有的好像绣上图案的条纹，有的又有如喷了均匀的彩点，每枝开花七八朵，多的十二三朵，可连续观赏六七十天。当全部盛开时，仿佛一群列队而出的蝴蝶正在轻轻飞翔，它那种飘逸的闲情，真令人产生一种如诗如画，似梦似幻的感觉。其中以开黄花的较为名贵，有个称为“天皇”的黄花品种，堪称为“超级巨星”，讨价甚昂。至于蓝花品种亦较为珍稀，1952年与1953年的国际洋兰博览会上，台湾送展的蝴蝶兰连续两年获得金牌奖杯。1989年香港举办的第14次兰花展览，胡炳炽先生送展的一棵白瓣红唇的蝴蝶兰获得全场的总冠军奖。这些杰出的殊荣为蝴蝶兰的开拓奠定了坚实的基础。如今，欧美各国人士对蝴蝶兰的消费量不断增加，举凡高级宴会都少不了蝴蝶兰作摆设。各种花色的蝴蝶兰所代表的含义也不一样，白蝴蝶兰代表爱情纯洁、友谊珍贵，红心蝴蝶兰代表鸿运当头、永结同心，红色蝴蝶兰代表仕途顺畅、幸福美满，条点蝴蝶兰代表事事顺心、心想事成，黄蝴蝶兰代表事业发达、生意兴隆，迷你蝴蝶兰代表快乐天使、风华正茂。
兰花在我国古代便与梅、竹、菊并称为四大名花，喻为“四君子”。兰中皇后——蝴蝶兰更是以卓越的风姿，迷煞了无数骚客文雅之士。为家居增添无限色彩和生机，同时又改善了小环境空气质量，吸收有毒废气，释放怡人的清新空气，平添无限动感活力。通过兰展，又陶冶了不少人的心性，使人不觉间拒污恶秽、洁身自好，从其丰姿又体会出丛生固本，团结自强，从而达到无私奉献，播馨香于人间的良好氛围。固亦常成为文豪大师的钟爱，常见于文墨、流传百世。蝴蝶兰同时也是一种极具有商业价值的“三高产品”，其具有广泛的药用及食用价值，但由于现在人们对其研究和栽培的认识，兰类植物的神秘和价值远远没有被人们认可，鉴于此，本发明通过对各种花色蝴蝶兰品种的植株再生及产业化关键技术开发的研究，为我国兰业发展提供技术支持。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，解决现有技术中植株繁殖速度慢、种子发芽率低，病毒病严重，植株生长周期不一致，开花时间参差不齐，不能大批量控制花期，直接影响兰花品质和销售数量及价格，同时还影响储藏和运输。本发明所采取的措施是可以使优质蝴蝶兰品种在短时间内建立无菌株系进行大量产业化生产，并可以周年生产，繁殖速度快，为消费者提供各种颜色新、鲜、香、艳花朵造型一致的产品；为企业提供技术含量高的生产技术，使其植株大小一致，便于花期控制和产业化统一管理，为降低企业生产成本和提供品质优秀产品站稳市场销售量带来了巨大的经济效益。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，选取蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过茎尖2~3周的诱导培养，生长点开始呈绿色，茎叶先开始生长，然后生长点的基部开始肥大，25~30天逐渐形成原球茎，形成的原球茎通过不断分割，进行继代加速繁殖直到获得所需数量为止，将1厘米高的新形成的幼苗移入较大的培养容器壮苗培养基上培养3~6个月，20～25天诱导生根后长到8~10厘米高即可进行移栽。具体包括以下步骤：
（1）取材方法：选取从台湾引进的无病虫害的若干花色蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料；
（2）培养基的配制：
芽诱导培养基：MS +1.0mg/L BA +1.0mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +50 g/L椰子汁+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
丛芽诱导培养基：1/2MS +3.0mg/L BA +0.5mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +150 g/L椰子汁+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
芽增殖培养基：1/2MS+2.0mg/L BA +0.3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +100 g/L香蕉汁+1-3 g/L Hyponex1+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
生根培养基：1/2 MS + 0.5mg/L IBA +0.3mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac，pH值为5.6；
（3）材料处理：将带有侧芽的无病虫害的若干花色蝴蝶兰花梗剪成2~3cm的节段，用自来水冲洗，再在饱和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡时要不断搅动；浸泡后的花梗侧芽在自来水下滴冲1小时后沥干，在超净工作台内以质量浓度为75%的酒精消毒摇荡3~5秒钟后倒出酒精，加入质量分数为0.1%的氯化汞溶液处理8~12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3~4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分；
（4）诱导培养：将经严格消毒后的花梗用手术刀切成1芽1段材料接种在芽诱导培养基中；
（5）培养条件：培养室温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500～2000lx；
（6）丛芽诱导培养：将上述诱导培养、生长健壮的诱导芽切成0.5cm的小块，分别接种在从芽诱导培养基中；13~15天后茎尖开始膨大，呈浅绿半球状，3个月后诱导原球茎体；
（7）增殖培养：将上述诱导培养生长良好的原球茎体切割成小块，分别接种在芽增殖培养基中继代培养；50~60天继代一次，增殖倍数为10~13，将原球茎放在含低浓度细胞分裂素的培养基上继续培养60天后陆续长出小芽，成为完整的原球茎；95天后，大部分长成2~3片叶的小苗；一个花梗侧芽萌发形成小苗，再利用小苗的叶片诱导原球茎继代增殖，试管苗出瓶种植生长性状稳定，通过原球茎增殖的方法极大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰的产业化生产；
（8）诱导生根：当丛生芽长至2cm高时，将芽分割成单株，转移到不同的生根培养基中；
（9）小苗移栽：当试管苗长至3～4cm高，有3～5条根，5～7片叶片，长度2～3cm时，就可进行炼苗，将试管苗放在自然光下炼苗5～7天，打开瓶盖先进行炼苗2～3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，用干净的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持温度25~30℃，空气湿度为85%，25~30天，当新叶、新根长出时，喷施质量分数为0.3%~0.5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率达95%。
本发明的有益效果在于：本发明可以使优质蝴蝶兰品种在短时间内建立无菌株系进行大量产业化生产，并可以周年生产，繁殖速度快，为消费者提供各种颜色新、鲜、香、艳花朵造型一致的产品；为企业提供技术含量高的生产技术，使其植株大小一致，便于花期控制和产业化统一管理，为降低企业生产成本和提供品质优秀产品站稳市场销售量带来了巨大的经济效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
（1）取材方法：选取从台湾引进的无病虫害的若干花色蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料；
（2）培养基的配制：
芽诱导培养基：MS +1.0mg/L BA +1.0mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +50 g/L椰子汁+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
丛芽诱导培养基：1/2MS +3.0mg/L BA +0.5mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +150 g/L椰子汁+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
芽增殖培养基：1/2MS+2.0mg/L BA +0.3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +100 g/L香蕉汁+1-3 g/L Hyponex1+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
生根培养基：1/2 MS + 0.5mg/L IBA +0.3mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac，pH值为5.6；
（3）材料处理：将带有侧芽的无病虫害的若干花色蝴蝶兰花梗剪成2~3cm的节段，用自来水冲洗，再在饱和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡时要不断搅动；浸泡后的花梗侧芽在自来水下滴冲1小时后沥干，在超净工作台内以质量浓度为75%的酒精消毒摇荡3~5秒钟后倒出酒精，加入质量分数为0.1%的氯化汞溶液处理8~12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3~4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分；
（4）诱导培养：将经严格消毒后的花梗用手术刀切成1芽1段材料接种在芽诱导培养基中；
（5）培养条件：培养室温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500～2000lx；
（6）丛芽诱导培养：将上述诱导培养、生长健壮的诱导芽切成0.5cm的小块，分别接种在从芽诱导培养基中；13~15天后茎尖开始膨大，呈浅绿半球状，3个月后诱导原球茎体；
（7）增殖培养：将上述诱导培养生长良好的原球茎体切割成小块，分别接种在芽增殖培养基中继代培养；50~60天继代一次，增殖倍数为10~13，将原球茎放在含低浓度细胞分裂素的培养基上继续培养60天后陆续长出小芽，成为完整的原球茎；95天后，大部分长成2~3片叶的小苗；一个花梗侧芽萌发形成小苗，再利用小苗的叶片诱导原球茎继代增殖，试管苗出瓶种植生长性状稳定，通过原球茎增殖的方法极大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰的产业化生产；
（8）诱导生根：当丛生芽长至2cm高时，将芽分割成单株，转移到不同的生根培养基中；
（9）小苗移栽：当试管苗长至3～4cm高，有3～5条根，5～7片叶片，长度2～3cm时，就可进行炼苗，将试管苗放在自然光下炼苗5～7天，打开瓶盖先进行炼苗2～3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，用干净的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持温度25~30℃，空气湿度为85%，25~30天，当新叶、新根长出时，喷施质量分数为0.3%~0.5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率达95%。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (2)
1.一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，其特征在于：选取蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过茎尖2~3周的诱导培养，生长点开始呈绿色，茎叶先开始生长，然后生长点的基部开始肥大，25~30天逐渐形成原球茎，形成的原球茎通过不断分割，进行继代加速繁殖直到获得所需数量为止，将1厘米高的新形成的幼苗移入较大的培养容器壮苗培养基上培养3~6个月，20～25天诱导生根后长到8~10厘米高即可进行移栽。
2.根据权利要求1所述的蝴蝶兰品种的植株再生方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）取材方法：选取从台湾引进的无病虫害的若干花色蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料；
（2）培养基的配制：
芽诱导培养基：MS +1.0mg/L BA +1.0mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +50 g/L椰子汁+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
丛芽诱导培养基：1/2MS +3.0mg/L BA +0.5mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +150 g/L椰子汁+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
芽增殖培养基：1/2MS+2.0mg/L BA +0.3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac +100 g/L香蕉汁+1-3 g/L Hyponex1+1-3 g/L Peptone，pH值为5.6；
生根培养基：1/2 MS + 0.5mg/L IBA +0.3mg/L NAA +6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5 g/L Ac，pH值为5.6；
（3）材料处理：将带有侧芽的无病虫害的若干花色蝴蝶兰花梗剪成2~3cm的节段，用自来水冲洗，再在饱和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡时要不断搅动；浸泡后的花梗侧芽在自来水下滴冲1小时后沥干，在超净工作台内以质量浓度为75%的酒精消毒摇荡3~5秒钟后倒出酒精，加入质量分数为0.1%的氯化汞溶液处理8~12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3~4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分；
（4）诱导培养：将经严格消毒后的花梗用手术刀切成1芽1段材料接种在芽诱导培养基中；
（5）培养条件：培养室温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500～2000lx；
（6）丛芽诱导培养：将上述诱导培养、生长健壮的诱导芽切成0.5cm的小块，分别接种在从芽诱导培养基中；13~15天后茎尖开始膨大，呈浅绿半球状，3个月后诱导原球茎体；
（7）增殖培养：将上述诱导培养生长良好的原球茎体切割成小块，分别接种在芽增殖培养基中继代培养；50~60天继代一次，增殖倍数为10~13，将原球茎放在含低浓度细胞分裂素的培养基上继续培养60天后陆续长出小芽，成为完整的原球茎；95天后，大部分长成2~3片叶的小苗；一个花梗侧芽萌发形成小苗，再利用小苗的叶片诱导原球茎继代增殖，试管苗出瓶种植生长性状稳定，通过原球茎增殖的方法极大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰的产业化生产；
（8）诱导生根：当丛生芽长至2cm高时，将芽分割成单株，转移到不同的生根培养基中；
（9）小苗移栽：当试管苗长至3～4cm高，有3～5条根，5～7片叶片，长度2～3cm时，就可进行炼苗，将试管苗放在自然光下炼苗5～7天，打开瓶盖先进行炼苗2～3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，用干净的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持温度25~30℃，空气湿度为85%，25~30天，当新叶、新根长出时，喷施质量分数为0.3%~0.5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率达95%。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210577538XA CN103004603A (zh) | 2012-12-27 | 2012-12-27 | 一种蝴蝶兰品种的植株再生方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210577538XA CN103004603A (zh) | 2012-12-27 | 2012-12-27 | 一种蝴蝶兰品种的植株再生方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103004603A true CN103004603A (zh) | 2013-04-03 |
Family
ID=47954134
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210577538XA Pending CN103004603A (zh) | 2012-12-27 | 2012-12-27 | 一种蝴蝶兰品种的植株再生方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103004603A (zh) |
Cited By (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103734008A (zh) * | 2013-12-26 | 2014-04-23 | 柳州赛特生物科技研发中心 | 一种蝴蝶兰组织培育快速繁殖用液体培养基及相应培养方法 |
| CN103782911A (zh) * | 2014-02-07 | 2014-05-14 | 福建省亚热带植物研究所 | 一种蝴蝶兰体细胞胚发生同步化调控方法 |
| CN103798136A (zh) * | 2013-12-11 | 2014-05-21 | 柳州赛特生物科技研发中心 | 一种蝴蝶兰专用组织培养培养基 |
| CN103843567A (zh) * | 2014-03-10 | 2014-06-11 | 上海市农业科学院 | 一种利用根诱导原球茎快速繁殖国兰的方法及其培养基 |
| CN104067943A (zh) * | 2014-07-18 | 2014-10-01 | 内蒙古农业大学 | 蝴蝶兰无菌根扩繁的方法 |
| CN104082148A (zh) * | 2014-07-18 | 2014-10-08 | 内蒙古农业大学 | 蝴蝶兰无菌花梗再生扩繁的方法 |
| CN104429950A (zh) * | 2014-11-14 | 2015-03-25 | 佛山市顺德区今日景艺生物科技有限公司 | 金边蝴蝶兰培养基及培养方法 |
| CN104686362A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-06-10 | 芜湖东源新农村开发股份有限公司 | 一种蝴蝶兰的组培方法 |
| CN105104212A (zh) * | 2015-10-15 | 2015-12-02 | 山西梅芝园艺有限公司 | 一种使用激素含量控制蝴蝶兰高增殖合格率的方法 |
| CN105875414A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-08-24 | 陈春满 | 一种促使蝴蝶兰类原球茎体快速增殖培养蝴蝶兰的方法 |
| CN105993954A (zh) * | 2016-05-31 | 2016-10-12 | 徐振飞 | 一种蝴蝶兰生根壮苗方法 |
| CN106942062A (zh) * | 2017-04-26 | 2017-07-14 | 江苏农林职业技术学院 | 一种蝴蝶兰无菌培养株根端组培方法 |
| CN107996269A (zh) * | 2018-01-09 | 2018-05-08 | 中国科学院华南植物园 | 一种促进被锯伤檀香树成活的方法 |
| CN108541590A (zh) * | 2018-03-26 | 2018-09-18 | 上海数儒生物科技有限公司 | 一种大白兰花侧芽组织细胞萃取方法 |
| CN109258377A (zh) * | 2018-11-14 | 2019-01-25 | 贵州省植物园（贵州省园林科学研究所、贵州省植物研究所） | 一种豆瓣兰种质创制的方法 |
| CN109699429A (zh) * | 2019-01-22 | 2019-05-03 | 深圳市荣燊花木有限公司 | 一种蝴蝶兰的培育方法 |
| CN110250002A (zh) * | 2019-07-15 | 2019-09-20 | 上海师范大学 | 蝴蝶兰原球茎诱导及转基因方法 |
| CN111758567A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-10-13 | 福建农林大学 | 一种采用共生菌剂的蝴蝶兰单芽繁殖方法 |
| CN112931203A (zh) * | 2021-02-05 | 2021-06-11 | 中国农业大学 | 一种快速解除唐菖蒲种球休眠的方法 |
| CN114287344A (zh) * | 2022-01-07 | 2022-04-08 | 赵英 | 一种蝴蝶兰的组织培养基及其繁殖方法 |
| CN118177083A (zh) * | 2024-05-15 | 2024-06-14 | 广州市名卉景观科技发展有限公司 | 一种小茴紫朵丽蝶的组织培养快速繁殖方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS638A (ja) * | 1986-06-16 | 1988-01-05 | シグノ−ド コ−ポレ−シヨン | ジツパ付き袋の充填・切り離し装置 |
| JPH0638A (ja) * | 1992-06-19 | 1994-01-11 | Shikoku Chem Corp | コチョウラン苗の培養方法 |
| EP0800762B1 (en) * | 1996-04-03 | 2001-09-05 | Sapporo Breweries Ltd. | Method for producing phalaenopsis clone plants through root tip culture |
| CN1994068A (zh) * | 2006-12-27 | 2007-07-11 | 李�杰 | 一种通过花梗节芽诱导花梗快速繁殖蝴蝶兰的方法 |
| CN101061789A (zh) * | 2006-12-27 | 2007-10-31 | 李�杰 | 一种通过叶片快速繁殖蝴蝶兰的方法 |
| CN102283110A (zh) * | 2010-09-29 | 2011-12-21 | 深圳市农科植物克隆种苗有限公司 | 一种通过叶片诱导丛生芽快速繁殖蝴蝶兰方法 |
-
2012
- 2012-12-27 CN CN201210577538XA patent/CN103004603A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS638A (ja) * | 1986-06-16 | 1988-01-05 | シグノ−ド コ−ポレ−シヨン | ジツパ付き袋の充填・切り離し装置 |
| JPH0638A (ja) * | 1992-06-19 | 1994-01-11 | Shikoku Chem Corp | コチョウラン苗の培養方法 |
| EP0800762B1 (en) * | 1996-04-03 | 2001-09-05 | Sapporo Breweries Ltd. | Method for producing phalaenopsis clone plants through root tip culture |
| CN1994068A (zh) * | 2006-12-27 | 2007-07-11 | 李�杰 | 一种通过花梗节芽诱导花梗快速繁殖蝴蝶兰的方法 |
| CN101061789A (zh) * | 2006-12-27 | 2007-10-31 | 李�杰 | 一种通过叶片快速繁殖蝴蝶兰的方法 |
| CN102283110A (zh) * | 2010-09-29 | 2011-12-21 | 深圳市农科植物克隆种苗有限公司 | 一种通过叶片诱导丛生芽快速繁殖蝴蝶兰方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 唐树梅主编: "《热带兰》", 31 January 2003, 中国农业出版社 * |
| 王青连主编: "《植物组织培养》", 31 July 2007, 中国农业出版社 * |
Cited By (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103798136B (zh) * | 2013-12-11 | 2016-04-13 | 柳州赛特生物科技研发中心 | 一种蝴蝶兰专用组织培养培养基 |
| CN103798136A (zh) * | 2013-12-11 | 2014-05-21 | 柳州赛特生物科技研发中心 | 一种蝴蝶兰专用组织培养培养基 |
| CN103734008A (zh) * | 2013-12-26 | 2014-04-23 | 柳州赛特生物科技研发中心 | 一种蝴蝶兰组织培育快速繁殖用液体培养基及相应培养方法 |
| CN103734008B (zh) * | 2013-12-26 | 2016-04-13 | 广西森仙源生物科技有限公司 | 一种蝴蝶兰组织培育快速繁殖用液体培养基及相应培养方法 |
| CN103782911A (zh) * | 2014-02-07 | 2014-05-14 | 福建省亚热带植物研究所 | 一种蝴蝶兰体细胞胚发生同步化调控方法 |
| CN103782911B (zh) * | 2014-02-07 | 2016-03-30 | 福建省亚热带植物研究所 | 一种蝴蝶兰体细胞胚发生同步化调控方法 |
| CN103843567A (zh) * | 2014-03-10 | 2014-06-11 | 上海市农业科学院 | 一种利用根诱导原球茎快速繁殖国兰的方法及其培养基 |
| CN104067943A (zh) * | 2014-07-18 | 2014-10-01 | 内蒙古农业大学 | 蝴蝶兰无菌根扩繁的方法 |
| CN104082148A (zh) * | 2014-07-18 | 2014-10-08 | 内蒙古农业大学 | 蝴蝶兰无菌花梗再生扩繁的方法 |
| CN104082148B (zh) * | 2014-07-18 | 2016-08-17 | 内蒙古农业大学 | 蝴蝶兰无菌花梗再生扩繁的方法 |
| CN104429950A (zh) * | 2014-11-14 | 2015-03-25 | 佛山市顺德区今日景艺生物科技有限公司 | 金边蝴蝶兰培养基及培养方法 |
| CN104429950B (zh) * | 2014-11-14 | 2016-08-24 | 佛山市顺德区今日景艺生物科技有限公司 | 金边蝴蝶兰培养基及培养方法 |
| CN104686362A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-06-10 | 芜湖东源新农村开发股份有限公司 | 一种蝴蝶兰的组培方法 |
| CN105104212A (zh) * | 2015-10-15 | 2015-12-02 | 山西梅芝园艺有限公司 | 一种使用激素含量控制蝴蝶兰高增殖合格率的方法 |
| CN105993954A (zh) * | 2016-05-31 | 2016-10-12 | 徐振飞 | 一种蝴蝶兰生根壮苗方法 |
| CN105875414A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-08-24 | 陈春满 | 一种促使蝴蝶兰类原球茎体快速增殖培养蝴蝶兰的方法 |
| CN106942062A (zh) * | 2017-04-26 | 2017-07-14 | 江苏农林职业技术学院 | 一种蝴蝶兰无菌培养株根端组培方法 |
| CN107996269A (zh) * | 2018-01-09 | 2018-05-08 | 中国科学院华南植物园 | 一种促进被锯伤檀香树成活的方法 |
| CN108541590A (zh) * | 2018-03-26 | 2018-09-18 | 上海数儒生物科技有限公司 | 一种大白兰花侧芽组织细胞萃取方法 |
| CN109258377A (zh) * | 2018-11-14 | 2019-01-25 | 贵州省植物园（贵州省园林科学研究所、贵州省植物研究所） | 一种豆瓣兰种质创制的方法 |
| CN109699429A (zh) * | 2019-01-22 | 2019-05-03 | 深圳市荣燊花木有限公司 | 一种蝴蝶兰的培育方法 |
| CN110250002A (zh) * | 2019-07-15 | 2019-09-20 | 上海师范大学 | 蝴蝶兰原球茎诱导及转基因方法 |
| CN111758567A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-10-13 | 福建农林大学 | 一种采用共生菌剂的蝴蝶兰单芽繁殖方法 |
| CN112931203A (zh) * | 2021-02-05 | 2021-06-11 | 中国农业大学 | 一种快速解除唐菖蒲种球休眠的方法 |
| CN114287344A (zh) * | 2022-01-07 | 2022-04-08 | 赵英 | 一种蝴蝶兰的组织培养基及其繁殖方法 |
| CN118177083A (zh) * | 2024-05-15 | 2024-06-14 | 广州市名卉景观科技发展有限公司 | 一种小茴紫朵丽蝶的组织培养快速繁殖方法 |
| CN118177083B (zh) * | 2024-05-15 | 2024-08-13 | 广州市名卉景观科技发展有限公司 | 一种小茴紫朵丽蝶的组织培养快速繁殖方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103004603A (zh) | 一种蝴蝶兰品种的植株再生方法 | |
| CN102119624B (zh) | 一种多花茎观赏凤梨的生产方法 | |
| CN104082148B (zh) | 蝴蝶兰无菌花梗再生扩繁的方法 | |
| CN104012417B (zh) | 小木漆高效快速扩繁方法 | |
| CN102090337A (zh) | 一种鹿角杜鹃的快繁方法 | |
| CN104585037A (zh) | 一种酒瓶兰组织培养快速繁殖方法 | |
| CN106613988B (zh) | 瓶内塑型快速培育难扦插繁殖的拟石莲属商品小盆栽方法 | |
| CN104521482A (zh) | 一种茉莉花单主干形盆栽培育方法 | |
| CN1284448C (zh) | 秋石斛兰优质种苗组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103004604B (zh) | 一种万代兰品种的繁育方法 | |
| CN102754560A (zh) | 优质滁菊穴盘扦插育苗的方法 | |
| CN1282409C (zh) | 文心兰优质种苗快速繁殖方法 | |
| CN103718969B (zh) | 一种诗琳通含笑离体培养再生植株方法 | |
| CN105900837B (zh) | 一种通过悬浮培养快速繁育铁兰种苗的方法 | |
| CN104604735B (zh) | 一种美国红叶紫薇的组培快繁方法 | |
| CN104488722B (zh) | 一种南美叉柱花的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN102090310B (zh) | 紫罗兰无土栽培基质 | |
| Pant et al. | Cattleya orchids: A mini review | |
| CN1303870C (zh) | 大岩桐栽培方法 | |
| CN107027461A (zh) | 一次摘心快速培育微型月季盆花的方法 | |
| CN109349109A (zh) | 高山杜鹃红粉佳人的瓶内整形方法 | |
| CN104620981B (zh) | 一种米老排成年优良单株的离体植株再生方法 | |
| CN102763598B (zh) | 利用体细胞胚繁育文山兜兰苗的方法 | |
| CN102696485A (zh) | 一种达摩兰快速繁殖方法 | |
| CN101869059A (zh) | 花叶香桃木的组织培养方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130403 |