MX2008003173A

MX2008003173A - Compuestos de bencimidazol-tiofeno como inhibidores de plk.

Info

Publication number: MX2008003173A
Application number: MX2008003173A
Authority: MX
Inventors: Kyle Allen Emmitte; Mui Cheung; James Michael Salovich
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 2005-09-06
Filing date: 2006-08-28
Publication date: 2008-03-18
Also published as: ATE452132T1; PL1937671T3; CA2621879A1; JP2009508816A; US20080214567A1; MA29816B1; AU2006287766B2; CR9786A; EP1937671A2; NZ566345A; PE20070518A1; WO2007030361A2; US20070270437A1; EP1937671B1; HRP20100122T1; KR20080047585A; DK1937671T3; CY1109916T1; AR055616A1; JO2578B1

Abstract

La presente invencion proporciona compuestos de bencimidazol-tiofeno, composiciones farmaceuticas que los contienen, procesos para la preparacion de los mismos, y su uso como agentes farmaceuticos (formulas A a H): (ver formulas A, B, C, D, E, F, G, H).

Description

COMPUESTOS DE BENCIMIDAZOL-TIOFENO COMO INHIBIDORES DE PLK ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a novedosos compuestos de bencimidazol-tiofeno.a formulaciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos, y al uso de estos compuestos en terapia. Las cinasas tipo Polo ("PLK") son cinasas de serina/treonina evolutivamente conservadas que tienen papeles críticos en la regulación de los procesos en el ciclo celular. La PLK tiene un papel en la entrada y salida de la mitosis en diversos organismos, desde la levadura hasta las células de mamífero. PLK incluye PLK1, PLK2, PLK3 y PLK4. La sobre-expresión de PLK1 parece estar fuertemente asociada con las células neoplásicas (incluyendo cánceres). Un estudio publicado ha mostrado altos niveles de expresión de ARN de PLK1 en >80 por ciento de los tumores pulmonares y de mama, con poca a ninguna expresión en el tejido normal adyacente. Varios estudios han demostrado correlaciones entre la expresión de PLK, el grado histológico, y el pronóstico de varios tipos de cáncer. Se encontraron correlaciones significativas entre los porcentajes de células positivas para PLK y el grado histológico de cáncer de ovario y endometrial (P<0.001). Estos estudios observaron que la PLK se expresa fuertemente en las células de carcinoma endometrial invasor, y que esto podría reflejar el grado de malignidad y proliferación en el carcinoma endometrial. Utilizando el análisis de reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa, se detectó una sobre-expresión de PLK en el 97 por ciento de carcinomas esofágicos y en el 73 por ciento de carcinomas gástricos, comparándose con los tejidos normales correspondientes. Además, los pacientes con altos niveles de sobre-expresión de PLK en el carcinoma de esófago, representaron un grupo de pronóstico significativamente más pobre que aquéllos con bajos niveles de sobre-expresión de PLK. En los cánceres de cabeza y cuello, se observó una expresión de ARNm elevada de PLK1 en la mayoría de los tumores; un análisis de Kaplan-Meier mostró que los pacientes con niveles moderados de expresión de PLK1 sobrevivieron durante más tiempo que aquéllos con altos niveles de expresión de PLK1. El análisis de los pacientes con carcinoma pulmonar no de células pequeñas mostró resultados similares relacionados con la expresión de PLK1. La Publicación del TCP Número WO2004/014899 a SmithKIine Beecham da a conocer novedosos compuestos de bencimidazol-tiofeno de la fórmula (I): en donde: R1 se selecciona a partir del grupo que consiste en H, alquilo, alquenilo, alquinilo, -C(0)R7, -C02R7, -C(0)NR7R8, -C(0)N(R7)OR8, -C(Q)N(R7)-R -OR8, -C(Q)N(R7)-Ph, -C(0)N(R7)-R2-Ph, -C(0)N(R7)C (O)R8, -C(0)N(R7)C02R8, -C(0)N(R7)C(0)NR7R8, -C(0)N(R7)S(0)2R8, -R2OR7, -R2-0-C(0)R7, -C(S)R7, -C(S)NR7R8, -C(S)N(R7)-Ph, -C(S)N(R7)-R2-Ph, -R2-SR7, -C( = NR7)NR7R8, -C(=NR7)N(R8)-Ph, -C( = NR7)N(R8)-R2-Ph, -R2-NR7R8, -CN, -OR7, -S(0)fR7, -S(0)2NR7R8, -S(0)2N(R7)-Ph, -S(0)2N(R7)-R2-Ph, -NR7R8, N(R7)-Ph, -N(R7)-R2-Ph, -N(R7)-S02R8 y Het; Ph es fenilo opcionalmente sustituido de 1 a 3 veces con un sustituyente seleccionado a partir del grupo que consiste en halógeno, alquilo, -OH, -R2-OH, -O-alquilo, -R2-0-alquilo, -NH2, -N(H)alquilo, -N(alquilo)2, -CN y -N3; Het es un heterociclo de 5 a 7 miembros que tiene 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos seleccionados a partir de N, O y S, o un heteroarilo de 5 a 6 miembros que tiene 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos seleccionados a partir de N, O y S, cada uno opcionalmente sustituido de 1 a 2 veces con un sustituyente seleccionado a partir del grupo que consiste en halógeno, alquilo, oxo, -OH, -R2-OH, -O-alquilo, -R2-0-alquilo, -NH2, -N(H)alquilo, -N(alquilo)2, -CN y -N3; Q1 es un grupo de la fórmula: -(R2)a-(Y1)b-(R2)c- 3; a, b y c son iguales o diferentes, y son cada uno independientemente 0 ó 1, y cuando menos uno de a o b es 1; n es 0, 1, 2, 3 ó 4; Q2 es un grupo de la fórmula: -(R2)aa-(Y2)bb-(R2)cc-R4; o dos grupos Q2 adyacentes se seleccionan a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, -OR7, -S(0)fR7 y -NR7R8 y, junto con los átomos de carbono con los que están enlazados, forman un cicloalquilo de 5 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 5 a 6 átomos de carbono, fenilo, heterociclo de 5 a 7 miembros que tiene 1 ó 2 heteroátomos seleccionados a partir de N, O, y S, o heteroarilo de 5 a 6 miembros que tiene 1 ó 2 heteroátomos seleccionados a partir de N, O, y S; aa, bb y ce son iguales o diferentes y son cada uno independientemente 0 ó 1; cada Y1 e Y2 es igual o diferente, y se selecciona independientemente a partir del grupo que consiste en -O-, -S(0)f, -N(R7)-. -C(O)-, -OC(O)-, -C02-, -C(0)N(R7)-, -C(0)N(R7)S(0)2-, -OC(0)N(R7)-, -OS(0)2-, -S(0)2N(R7)-, -S(0)2N(R7)C(0)-, -N(R7)S(0)2-, -N(R7)C(0)-, -N(R7)C02- y -N(R7)C(0)N(R7)-; cada R2 es igual o diferente, y se selecciona independientemente a partir del grupo que consiste en alquileno, alquenileno y alquinileno; cada R3 y R4 es igual o diferente, y cada uno se selecciona independientemente a partir del grupo que consiste en H, halógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, -C(0)R7, -C(0)NR7R8, -C02R7, -C(S)R7, -C(S)NR7R8, -C( = NR7)R8, -C( = NR7)NR7R8, -CR7=N-OR7, -OR7, -S(0),R7, -S(0)2NR7R8, -NR7R8, -N(R7)C(0)R8, -N(R7)S(0)2R8, -N02, -CN, -N3, y un grupo de la fórmula (ii): -R "6) 'e , en donde: el Anillo A se selecciona a partir del grupo que consiste en cicloalquilo de 5 a 10 átomos de carbono, cicloalquenilo de 5 a 10 átomos de carbono, arilo, heterociclo de 5 a 10 miembros que tiene 1, 2 ó 3 heteroátomos seleccionados a partir de N, O y S, y heteroarilo de 5 a 10 miembros que tiene 1, 2 ó 3 heteroátomos seleccionados a partir de N, O y S; cada d es 0 ó 1 ; e es 0, 1, 2, 3 ó 4; cada R6 es igual o diferente, y se selecciona independientemente a partir del grupo que consiste en H, halógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, Ph, Het, -CH(OH)-R2-OH, -C(0)R7, -C02R7, -C02-R2-Ph, -C02-R2-Het, -C(0)NR7R8, -C(0)N(R7)C(0)R7, -C(0)N(R7)C02R7, -C(0)N(R7)C- (0)NR7R8, -C(0)N(R7)S(0)2R7, -C(S)R7, -C(S)NR7R8, -C(=NR7)R8, -C( = NR7)NR7R8, -CR7=N-OR8, =0, -OR7, -OC(0)R7, -OC(0)Ph, -OC(0)Het, -OC(0)NR7R8, -0-R2-S(0)2R7, -S(0)fR7, -S(0)2NR7R8, -S(0)2Ph, -S(0)2Het, -NR7R8, -N(R7)C(0)R8, -N(R7)C02R8, -N(R7)-R2-C02R8, -N(R7)C(0)NR7R8, -N(R7)-R2-C(0)NR7R8, -N(R7)C(0)Ph, -N(R7)C(0)Het, -N(R7)Ph, -N(R7)Het, -N(R7)C(0)NR7-R2-NR7R8, -N(R7)C(0)N(R7)Ph, -N(R7)C(0)N(R7)Het, -N(R7)C(0)N(R7)-R2-Het, -N(R7)S(0)2R8, -N(R7)-R2-S(0)2R8, -N02, -CN y -N3; en donde, cuando se define Q1 en donde b es 1 y c es 0, R3 no es halógeno, -C(0)R7, -C(0)NR7R8, -C02R7, -C(S)R7, -C(S)NR7R8, -C( = NR7)R8, -C( = NR7)NR7R8, -CR7=N-OR7, -OR7, -S(0)fR7, -S(0)2NR7R8, -NR7R8, -N(R7)C(0)R8, -N(R7)S(0)2R8, -N02, -CN o -N3; en donde, cuando se define Q2 en donde bb es 1 y ce es 0, R4 no es halógeno, -C(0)R7, -C(0)NR7R8, -C02R7, -C(S)R7, -C(S)NR7R8, -C( = NR7)R8, -C( = NR7)NR7R8, -CR7=N-OR7, -OR7, -S(0)fR7, -S(0)2NR7R8, -NR7R8, -N(R7)C(0)R8, -N(R7)S(0)2R8, -N02, -CN o -N3; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste en H, halógeno, alquilo, cicloalquilo, OR7, -S(0),R7, -NR7R8, -NHC(0)R7, -NHC(0)NR7R8 y -NHS(0)2R7; f es 0, 1 ó 2; y cada R7 y cada R8 son iguales o diferentes, y se seleccionan cada uno independientemente a partir del grupo que consiste en H, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y cicloalquenilo; en donde, cuando R1 es -C02CH3 y n es 0, Q1 no es -OH; o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato o derivado fisiológicamente funcional de los mismos. También se dan a conocer composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos, procesos para su preparación, y métodos para el tratamiento de las condiciones mediadas por PLK utilizando estos compuestos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporciona un compuesto seleccionado a partir de: en donde * indica un átomo de carbono quiral; y sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En otro aspecto, se proporciona un compuesto enantioméricamente enriquecido seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G, y H, en donde la estereoquímica del átomo de carbono quiral es R. En un tercer aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En una modalidad, la composición farmacéutica comprende además un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. En un cuarto aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de una condición mediada por PLK en un mam ífero que lo necesite. El método comprende administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C , D, E , F, G y H , y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En un quinto aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de un neoplasma susceptible en un mamífero que lo necesite. El método comprende administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H , y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. El neoplasma susceptible se puede seleccionar a partir del grupo que consiste en cáncer de mama, cáncer de colon , cáncer de pulmón, incluyendo cáncer pulmonar de células pequeñas y cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, cáncer endometrial , cáncer gástrico, melanoma, cáncer de ovario, cáncer pancreático, carcinoma de células escamosas, carcinoma de cabeza y cuello, carcinoma esofágico, carcinoma hepatocelular, y malignidades hematológicas, tales como leucemias agudas y linfomas agresivos. En un sexto aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer de mama en un mam ífero que lo necesite. El método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H , y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En un séptimo aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de ovario en un mamífero que lo necesite. El método comprende administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En un octavo aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer pulmonar no de células pequeñas en un mamífero que lo necesite. El método comprende administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E , F, G y H , y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En un noveno aspecto de la invención , se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de próstata en un mamífero que lo necesite. El método comprende administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D , E, F, G y H , y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En un décimo aspecto de la invención , se proporciona un método para el tratamiento de una malignidad hematológica en un mamífero que lo necesite. El método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En otro aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada. El método comprende poner en contacto la célula con una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para inhibir la proliferación de una célula. El método comprende poner en contacto la célula con una cantidad de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para inhibir la mitosis en una célula. El método comprende administrar a la célula una cantidad de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo. En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en terapia. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en el tratamiento de una condición mediada por PLK en un mamífero que lo necesite. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en el tratamiento de un neoplasma susceptible en un mamífero. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en el tratamiento de cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, o una malignidad hematológica en un mamífero. En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en la inhibición de la proliferación de una célula. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en la inhibición de la mitosis en una célula. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición mediada por PLK en un mamífero. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un neoplasma susceptible en un mamífero. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, o una malignidad hematológica en un mamífero. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada en un mamífero.

En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para la preparación de un medicamento para inhibir la proliferación de una célula. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para la preparación de un medicamento para inhibir la mitosis en una célula. En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto seleccionado a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, y las sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo, para utilizarse en el tratamiento de un neoplasma susceptible, tal como cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, y malignidades hematológicas, en un mamífero. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Como se utiliza en la presente, "compuesto(s) de la invención" o "compuesto(s) seleccionado(s) a partir de A, B, C, D, E, F, G y H", significa los compuestos seleccionados a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, o , los compuestos enantioméricamente enriquecidos seleccionados a partir de A, B, C, D, E, F, G y H, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos. Como se utiliza en la presente, "compuesto(s) seleccionado(s) a partir de A-1, B-1, C-1, D-1, E-1, F-1, G-1 y H-1", significa los compuestos seleccionados a partir de A-1, B-1, C-1, D-1, E-1, F-1, G-1 y H-1, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos. Como se utiliza en la presente, el término "opcionalmente" significa que los eventos subsiguientemente descritos pueden ocurrir o no, e incluye tanto los eventos que ocurren como los eventos que no ocurren. Los compuestos de la invención existen en formas estereoisoméricas (por ejemplo, contienen uno o más átomos de carbono quirales o asimétricos). El término "quiral" se refiere a una molécula que no se puede sobreponer en su imagen de espejo. El término "aquiral" se refiere a una molécula que se puede sobreponer en su imagen de espejo. El término "estereoisómeros" se refiere a los compuestos que tienen una constitución química común, pero que difieren en la configuración de los átomos o grupos en el espacio. Los estereoisómeros pueden ser isómeros ópticos o isómeros geométricos. Los isómeros ópticos incluyen tanto enantiómeros como diaestereómeros. Un "enantiómero" es uno de un par de isómeros ópticos que contienen un átomo de carbono quiral cuya configuración molecular tiene formas izquierda y derecha (quirales). Es decir, "enantiómero" se refiere a cada uno de un par de isómeros ópticos de un compuesto que son imágenes de espejo uno del otro que no se pueden sobreponer. Un "diaestereómero" es uno de un par de isómeros ópticos de un compuesto con dos o más centros de asimetría y cuyas moléculas no son imágenes de espejo una de la otra. La nomenclatura de un centro quiral es gobernada por el sistema (R)-(S) . El que un compuesto particular sea designado como el enantiómero "R" o "S" de acuerdo con el sistema, depende de la naturaleza de los átomos o grupos que estén enlazados con el átomo de carbono quiral . Los enantiómeros difieren en su comportamiento hacia la luz polarizada en el plano, es decir, su actividad óptica. Se dice que un enantiómero que gira la luz polarizada en el plano en una dirección de las manecillas del reloj es dextrógiro, y se designa mediante el símbolo "d" o "(+)" para la rotación positiva. Se dice que u n enantiómero que gira la luz polarizada en el plano en la dirección contraria a la de las manecillas del reloj es levógiro, y se designa mediante el símbolo "I" o "(-)" para la rotación negativa. No hay correlación alguna entre la configuración de los enantiómeros y la dirección en la que giran la luz polarizada en el plano. Tampoco hay una correlación necesaria entre la designación (R) y (S) y la dirección de rotación de la luz polarizada en el plano. La actividad óptica, o la dirección de rotación de la luz polarizada en el plano, de un enantiómero de un compuesto de la invención, se puede determinar empleando técnicas convencionales. Los términos "racemato" y "mezcla racémica" , como se utilizan en la presente, se refieren a una mezcla de los isómeros ópticos (R) y (S) (por ejemplo, enantiómeros) de un compuesto en igual proporción, es decir, 50:50. El término "enantioméricamente enriquecido", como se utiliza en la presente, se refiere a las preparaciones que comprenden una mezcla de isómeros ópticos en donde la cantidad de un enantiómero es más alta que la cantidad del otro. Por consiguiente, "enantioméricamente enriquecidos" se refiere a mezclas de isómeros ópticos en donde la proporción del enantiómero es mayor de 50:50. Un compuesto enantioméricamente enriquecido comprende más del 50 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. Por ejemplo, la 5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}-3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxamida enantioméricamente enriquecida, se refiere a una composición que comprende más del 50 por ciento en peso del enantiómero (R) en relación con el enantiómero (S) del compuesto. En una modalidad, un compuesto enantioméricamente enriquecido comprende cuando menos el 75 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. En otra modalidad, un compuesto enantioméricamente enriquecido comprende cuando menos el 80 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. En una modalidad particular, un compuesto enantioméricamente enriquecido comprende cuando menos el 85 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. El término "enantioméricamente puro", como se utiliza en la presente, se refiere a los compuestos enantioméricamente enriquecidos que comprenden cuando menos el 90 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. En una modalidad, un compuesto enantioméricamente puro comprende cuando menos el 95 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. En una modalidad particular, un compuesto enantioméricamente puro comprende cuando menos el 99 por ciento en peso de un enantiómero en relación con el otro. La presente invención proporciona compuestos seleccionados a partir de: en donde * indica un átomo de carbono quiral; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de los mismos. En una modalidad particular, los compuestos A, B, C, D, E, F, G y H están enantioméricamente enriquecidos, en donde la estereoquímica del átomo de carbono quiral es R. En otra modalidad, los compuestos A, B, C, D, E, F, G y H son enantioméricamente puros, en donde la estereoquímica del átomo de carbono quiral es R.

Por consiguiente, en una modalidad preferida, la presente invención proporciona compuestos enantioméricamente enriquecidos y enantioméricamente puros seleccionados a partir de: 5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxamida; 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1H-bencimidazol-1 -il}-2-tiofen-carboxamida; 5-{6-[(4-metil-piperazin-1 -il)-metil]-1 H-bencimidazol-1 - i I >- 3 -{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxamida; 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-tiofen-2-carboxamida; 5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxamida; 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-t6-(4-piperidinil-oxi)-1H- bencimidazol-1 -il]-2-tiofen-carboxamida; 5-{6-[(1-metil-4-piperidinil)-oxi]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxamida; y 3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(1 -metil-4-piperidinil)-oxi]-1 H-bencimidazol-1 -il}-2-tiofen-carboxamida; y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de las mismas. Será apreciado por los expertos en la materia que los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato de los mismos. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la presente invención (o las formas enantioméricamente enriquecidas o puras de las mismas) incluyen las sales convencionales formadas a partir de los ácidos o bases inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables, así como las sales de amonio cuaternario. Los ejemplos más específicos de las sales de ácido adecuadas incluyen las sales de ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, perclórico, fumárico, acético, propiónico, succínico, glicól ico , fórmico, láctico, maleico, tartárico, cítrico, pamoico, malónico, hidroxi-maleico, fenil-acético, glutámico, benzoico, salicílico, fumárico, toluen-sulfónico, metan-sulfónico (mesilato), naftalen-2-sulfónico, bencen-sulfónico hidroxi-naftoico, yodhídrico, málico, esteroico, tánico, y similares. Otros ácidos, tales como el ácido oxálico, aunque por sí mismos no son farmacéuticamente aceptables, pueden ser útiles en la preparación de sales útiles como intermediarios en la obtención de los compuestos de la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables. Los ejemplos específicos de las sales básicas adecuadas incluyen las sales de sodio, litio, potasio, magnesio, aluminio, calcio, zinc, N,N'-dibencil-etilen-diamina, cloro-procaína, colina, dietanolamina, etilen-diamina, N-metil-glucamina y procaína.

El término "solvato", como se utiliza en la presente, se refiere a un complejo de una estequiometría variable formado por un soluto (un compuesto de la invención o una forma enantioméricamente enriquecida o pura del mismo), y un solvente. A manera de ejemplo, los solventes incluyen agua, metanol, etanol, o ácido acético. Los procesos para la preparación de las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de los compuestos de la invención son convencionales en la técnica. Véase, por ejemplo, Burger's Medicinal Chemistry And Drug Discovery, 5a Edición, Volumen 1: Principies And Practice.

Como será aparente para los expertos en este campo, en los procesos descritos más adelante para la preparación de los compuestos de la invención, ciertos intermediarios, de una manera alternativa, pueden estar en la forma de sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del compuesto. Estos términos, como se aplican a cualquier intermediario empleado en el proceso de la preparación de los compuestos de la invención, tienen los mismos significados que se observan anteriormente con respecto a los compuestos de la invención. Los procesos para la preparación de las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de estos intermediarios son conocidos en la técnica, y son análogos al proceso para la preparación de las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de los compuestos de la invención. Los compuestos de la presente invención son típicamente inhibidores de PLK. Un inhibidor de PLK significa un compuesto que exhibe una plC50 mayor de 6 en el ensayo de inhibición de PLK descrito más adelante en los ejemplos, o una IC50 menor de 10 µM en el ensayo de Inhibición del Crecimiento con Azul de Metileno o Cell-Titre Glo descrito más adelante en los ejemplos; de una manera más particular, un inhibidor de PLK es un compuesto que exhibe una plC50 mayor de 7, o una IC50 menor de 1 µM empleando los métodos descritos en los ejemplos que se encuentran más adelante. La presente invención proporciona además compuestos de la invención para utilizarse en terapia médica en un animal, por ejemplo un mamífero, tal como un ser humano. En particular, la presente invención proporciona compuestos para utilizarse en el tratamiento de una condición mediada por PLK. La presente invención también proporciona compuestos para utilizarse en el tratamiento de un neoplasma susceptible. El término "neoplasma susceptible" se define más adelante. En particular, la presente invención proporciona compuestos para utilizarse en el tratamiento de una variedad de tumores sólidos, incluyendo, pero no limitándose a, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, y malignidades hematológicas, incluyendo, pero no limitándose a, leucemias agudas (mieloides y linfoides), y linfomas agresivos. La presente invención proporciona compuestos para utilizarse en e tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada. La presente invención también proporciona compuestos para utilizarse en la inhibición de la proliferación de una célula. La presente invención también proporciona compuestos para utilizarse en la inhibición de la mitosis en una célula. La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de varias condiciones o enfermedades, todos los cuales comprenden I paso de administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención. Como se utiliza en la presente, el término "tratamiento" se refiere a aliviar la condición especificada, eliminar o reducir los síntomas de la condición, hacer más lento o eliminar el progreso de la condición, y prevenir o demorar la recurrencia de la condición en un sujeto previamente afligido.

Como se utiliza en la presente, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" significa una cantidad de un compuesto de la invención que es suficiente, en el sujeto al que se administre, para provocar la respuesta biológica o médica de un cultivo celular, tejido, sistema, animal (incluyendo humano), que esté siendo buscada, por ejemplo, por un investigador o clínico. Por ejemplo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención para el tratamiento de una condición mediada por PLK es una cantidad suficiente para tratar la condición mediada por PLK en el sujeto. De una manera similar, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención para el tratamiento de un neoplasma susceptible es una cantidad suficiente para tratar el neoplasma susceptible en el sujeto. En una modalidad de la presente invención, la cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención es una cantidad suficiente para inhibir la mitosis celular. En una modalidad de la presente invención, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención es una cantidad suficiente para regular, modular, enlazar, o inhibir PLK. La cantidad terapéuticamente efectiva precisa de un compuesto de la invención dependerá de un número de factores, incluyendo, pero no limitándose a, la edad y el peso del sujeto que se esté tratando, el trastorno preciso que requiera tratamiento y su severidad, la naturaleza de la formulación, y la vía de administración, y finalmente estará a la discreción del médico o veterinario que atienda. Típicamente, un compuesto de la invención se dará para tratamiento en el intervalo de 0.1 a 200 miligramos/kilogramo de peso corporal del receptor (animal) por día o por dosis o por ciclo de tratamiento, y más usualmente en el intervalo de 1 a 100 miligramos/kilogramo de peso corporal por día o por dosis o por ciclo de tratamiento. Las dosificaciones aceptables pueden ser de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 2,000 miligramos por día, por dosis, o por ciclo de tratamiento, y de preferencia de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 500 miligramos por día, por dosis, o por ciclo de tratamiento. Como un aspecto, la presente invención proporciona métodos para regular, modular, enlazar, o inhibir la PLK, para el tratamiento de las condiciones mediadas por PLK, en particular PLK1. "Regular, modular, enlazar, o inhibir la PLK" se refiere a regular, modular, enlazar, o inhibir la actividad de PLK, en particular de PLK1, así como regular, modular, enlazar, o inhibir la sobre-expresión de PLK, en particular de PLK1. Estas condiciones incluyen ciertos neoplasmas (incluyendo cánceres y tumores) que se hayan asociado con PLK, en particular PLK1, y las condiciones caracterizadas por una proliferación celular ¡napropiada. La presente invención proporciona un método para el tratamiento de una condición mediada por PLK, en particular PLK1, el cual comprende administrar al animal una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la invención. Este método y otros métodos de la presente invención son útiles para el tratamiento de un animal, tal como un mamífero, y en particular seres humanos. Las condiciones que son mediadas por PLK son conocidas en la técnica, e incluyen, pero no se limitan a, neoplasmas y condiciones caracterizadas por una proliferación celular inapropiada. La presente invención también proporciona un método para el tratamiento de un neoplasma susceptible (cáncer o tumor) en un animal, tal como un mamífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, cuyo método comprende administrar al animal una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la invención. "Neoplasma susceptible", como se utiliza en la presente, se refiere a los neoplasmas que son susceptibles al tratamiento con un inhibidor de PLK. Los neoplasmas que se han asociado con PLK, y por consiguiente, que son susceptibles al tratamiento con un inhibidor de PLK, son conocidos en este campo, e incluyen los tumores y cánceres tanto primarios como metastásicos. Por ejemplo, los neoplasmas susceptibles dentro del alcance de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer de pulmón (incluyendo cáncer pulmonar de células pequeñas y cáncer pulmonar no de células pequeñas), cáncer de próstata, cáncer endometrial, cáncer gástrico, melanoma, cáncer de ovario, cáncer pancreático, carcinoma de células escamosas, carcinoma de cabeza y cuello, carcinoma esofágico, carcinoma hepatocelular, y malignidades hematológicas incluyendo, pero no limitándose a, leucemias agudas y linfomas agresivos . En una modalidad particular, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de cáncer de mama en un animal, tal como un mam ífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención. En otra modalidad particular, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de cáncer de ovario en un animal , tal como un mam ífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención. En otra modalidad particular, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de cáncer pulmonar no de células pequeñas en un animal , tal como un mamífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención. En otra modalidad particular, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de cáncer de próstata en un animal , tal como un mamífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, mediante la admi nistración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención. En otra modalidad particular, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de leucemia aguda, incluyendo leucemia mieloide aguda y leucemia linfoide aguda, en un animal , tal como un mam ífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención . En otra modalidad particular, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de linfoma agresivo en un animal , tal como un mam ífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite, mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de oun compuesto de la presente invención. Los compuestos de la invención se pueden utilizar solos en el tratamiento de los neoplasmas susceptibles, o se pueden utilizar para proporcionar efectos aditivos o sinérgicos con uno o más compuestos diferentes de la invención, o en combinación con ciertas quimioterapias existentes y/u otras terapias anti-neoplásicas. En adición, los compuestos de la invención se pueden utilizar para restablecer la efectividad de uno o más compuestos diferentes de la invención, ciertas quimioterapias existentes, y/u otras terapias anti-neoplásicas. Como se utiliza en la presente, "terapias anti-neoplásicas" incluye, pero no se limita a, quimioterapia citotóxica, terapia hormonal , inhibidores de cinasa dirigidos, anticuerpos monoclonales terapéuticos, cirugía, y terapia de radiación. La presente invención también proporciona un método para el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada en un animal, tal como un mam ífero (por ejemplo, un ser humano) que lo necesite. El método comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención . "Proliferación celular inapropiada" significa la proliferación celular resultante de un crecimiento celular inapropiado, una proliferación celular resultante de una división celular excesiva, una proliferación celular resultante de la división celular a una velocidad acelerada, una proliferación celular resultante de una sobrevivencia celular inapropiada, y/o una proliferación celular en una célula normal que se presente a una velocidad normal, que no obstante sea indeseada. Las condiciones caracterizadas por una proliferación celular inapropiada incluyen, pero no se limitan a, neoplasmas, trastornos proliferativos de los vasos sanguíneos, trastornos fibróticos, trastornos proliferativos de las células mesangiales, y enfermedades inflamatorias/inmuno-mediadas. Los trastornos proliferativos de los vasos sanguíneos incluyen artritis y restenosis. Los trastornos fibróticos incluyen cirrosis hepática y ateroesclerosis. Los trastornos proliferativos de las células mesangiales incluyen glomerulonefritis, nefroesclerosis maligna, y glomerulopatías. Los trastornos inflamatorios/inmuno-mediados incluyen soriasis, sanado crónico de heridas, rechazo de trasplante de órganos, síndromes de microangiopatía trombótica, y enfermedades neurodegenerativas. La osteoartritis y otras enfermedades dependientes de la proliferación de los osteoclastos de la resorción ósea excesiva son ejemplos de las condiciones caracterizadas por una proliferación celular inapropiada en donde se presenta la proliferación celular en las células normales a una velocidad normal, pero no obstante es indeseada. La presente invención también proporciona un método para inhibir la proliferación de una célula, cuyo método comprende poner en contacto la célula con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la proliferación de la célula. En una modalidad particular, la célula es una célula neoplásica. En una modalidad particular, la célula es una célula inapropiadamente proliferativa. El término "célula inapropiadamente proliferativa", como se utiliza en la presente, se refiere a las células que crecen de una manera inapropiada (anormalmente), las células que se dividen excesivamente o a una velocidad acelerada, las células que sobreviven inapropiadamente (anormalmente), y/o las células normales que se proliferan a una velocidad normal pro para las cuales es indeseada la proliferación. Las células neoplásicas (incluyendo las células de cáncer) son un ejemplo de las células inapropiadamente proliferativas, pero no son las únicas células inapropiadamente proliferativas. La PLK es esencial para la mitosis celular, y de conformidad con lo mismo, se cree que los compuestos de la invención son efectivos para inhibir la mitosis. "Inhibir la mitosis" se refiere a inhibir la entrada en la fase M del ciclo celular, inhibir el progreso normal de la fase M del ciclo celular una vez que se ha entrado en la fase M, e inhibir la salida normal de la fase M del ciclo celular. Por consiguiente, los compuestos de la presente invención pueden inhibir la mitosis mediante la inhibición de la entrada de la célula en la mitosis, mediante la inhibición del progreso de la célula a través de la mitosis, o mediante la inhibición de la salida de la célula de la mitosis. Como un aspecto, la presente invención proporciona un método para inhibir la mitosis en una célula, cuyo método comprende administrar a la célula una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la mitosis. En una modalidad particular, la célula es una célula neoplásica. En una modalidad particular, la célula es una célula inapropiadamente proliferativa. La presente invención también proporciona el uso de un compuesto de la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición mediada por PLK en un animal, tal como un mamífero (por ejemplo, un ser humano). La presente invención proporciona además el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un neoplasma susceptible en un animal. En particular, la presente invención proporciona el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un cáncer de mama en un animal. La presente invención también proporciona el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de cáncer de ovario en un animal. La presente invención proporciona el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de cáncer pulmonar no de células pequeñas en un animal. La presente invención también proporciona el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de cáncer de próstata en un animal. La presente invención proporciona el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de leucemia aguda (incluyendo leucemia mieloide aguda y leucemia linfoide aguda) en un animal. La presente invención proporciona el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de linfoma agresivo en un animal . La presente invención proporciona además el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para inhibir la proliferación de una célula. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto para la preparación de un medicamento para inhibir la mitosis en una célula. Aunque es posible que, para utilizarse en terapia, se pueda administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención como el producto qu ímico en bruto, típicamente se presenta como el ingrediente activo de una composición o formulación farmacéutica. De conformidad con lo anterior, la invención proporciona además una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención. La composición farmacéutica puede comprender además uno o más vehículos, diluyentes, y/o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los veh ículos, diluyentes, y/o excipientes deben ser aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y no perjudiciales para el receptor de los mismos. De conformidad con otro aspecto de la invención, también se proporciona un proceso para la preparación de una formulación farmacéutica, el cual incluye mezclar un compuesto de la invención con uno o más vehículos, diluyentes, y/o excipientes farmacéuticamente aceptables. Las formulaciones farmacéuticas se pueden presentar en una forma de dosis unitaria conteniendo una cantidad previamente determinada del ingrediente activo por dosis unitaria. Esta unidad puede contener una dosis terapéuticamente efectiva del compuesto de la invención, o una fracción de una dosis terapéuticamente efectiva, de tal manera que se puedan administrar múltiples formas de dosificación unitaria en un tiempo dado para alcanzar la dosis terapéuticamente efectiva deseada. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son aquéllas que contienen una dosis o sub-dosis diaria, como se menciona anteriormente en la presente, o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo. Adicionalmente, estas formulaciones farmacéuticas se pueden preparar mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de la farmacia. Las formulaciones farmacéuticas se pueden adaptar para su administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo por la vía oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual, o transdérmica), vaginal, o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa, o intradérmica). Estas formulaciones se pueden preparar mediante cualquier método conocido en la técnica de la farmacia, por ejemplo, poniendo en asociación el ingrediente activo con los vehículos o excipientes.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración oral pueden presentarse como unidades separadas, tales como cápsulas o tabletas; polvos o granulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o cremas comestibles; o emulsiones líquidas de aceite en agua, o emulsiones líquidas de agua en aceite. Por ejemplo, para la administración oral en la forma de una tableta o cápsula, el componente de fármaco activo se puede combinar con un vehículo inerte oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua, y similares. Los polvos se preparan triturando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado, y mezclando con un vehículo farmacéutico similarmente triturado, tal como un carbohidrato comestible, como por ejemplo, almidón o manitol. También puede haber agentes saborizantes, conservadores, dispersantes y colorantes presentes. Las cápsulas se hacen mediante la preparación de una mezcla en polvo como se describe anteriormente, y se rellenan en vainas de gelatina formadas. Antes de la operación de llenado, a la mezcla en polvo se le pueden agregar derrapantes y lubricantes, tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, o polietilenglicol sólido. También se puede agregar un agente desintegrante o solubilizante, tal como ágar-ágar, carbonato de calcio, o carbonato de sodio, para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiera la cápsula. Más aún, cuando se desee o sea necesario, también se pueden incorporar en la mezcla aglutinantes adecuados, lubricantes, agentes desintegrantes, y agentes colorantes. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas, tales como acacia, tragacanto, o alginato de sodio, carboxi-metil-celulosa, polietilenglicol, ceras, y similares. Los lubricantes utilizados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio, y similares. Los desintegrantes incluyen, sin limitación, almidón, metil-celulosa, ágar, bentonita, goma de xantano, y similares. Las tabletas se formulan, por ejemplo, mediante la preparación de una mezcla en polvo, se granula o se forma una pasta, se agrega un lubricante y desintegrante, y se comprime en tabletas. Una mezcla en polvo se prepara mediante la mezcla del compuesto, adecuadamente triturado, con un diluyente o una base como se describe anteriormente, y opcionalmente, con un aglutinante, tal como carboxi-metil-celulosa, un alginato, gelatina, o polivinilpirrolidona, un retardante de solución tal como parafina, un acelerador de resorción tal como una sal cuaternaria, y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín, o difosfato de calcio. La mezcla en polvo se puede granular mediante humectación con un aglutinante, tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de acadia, o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos, y forzando esto a través de un tamiz. Como una alternativa a la granulación, la mezcla en polvo se puede pasar a través de la máquina formadora de tabletas, y el resultado es el de pedazos imperfectamente formados que se rompen en granulos. Los granulos se pueden lubricar para prevenir la adhesión a los dados formadores de tabletas por medio de la adición de ácido esteárico, una sal de estearato, talco, o aceite mineral. Entonces la mezcla lubricada se comprime en tabletas. Los compuestos de la presente invención también se pueden combinar con un veh ículo inerte de flujo libre, y se pueden comprimir en tabletas directamente sin pasar a través de los pasos de granulación o formación de pasta. Se puede proporcionar un recubrimiento protector transparente u opaco consistente en un recubrimiento sellador de shellac, un recubrimiento de azúcar o de material polimérico, y un recubrimiento pulido de cera. Se pueden agregar materiales de tinte a estos recubrimientos para distinguir diferentes dosificaciones unitarias. Se pueden preparar fluidos orales, tales como soluciones, jarabes, y el íxires, en una forma unitaria de dosificación , de tal manera que una cantidad dada contenga una cantidad previamente determinada del ingrediente activo. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa adecuadamente saborizada, mientras que los elíxires se preparan mediante el uso de un veh ículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones se pueden formular mediante la dispersión del compuesto en un vehículo no tóxico. También se pueden agregar solubilizantes y emulsionantes, tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y éteres de sorbitol de polioxietileno, conservadores, aditivos de sabor tales como aceite de menta, o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales, y similares. Cuando sea apropiado, las formulaciones unitarias de dosificación para administración oral se pueden microencapsular. La formulación también se puede preparar para prolongar o sostener la liberación, como por ejemplo, mediante recubrimiento o empotramiento del material en partículas en polímeros, cera, o similares. Los compuestos de la invención también se pueden administrar en la forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes, y vesículas multilamelares. Los liposomas se pueden formar a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearil-amina, o fosfatidil-colinas. Los compuestos de la invención también se pueden suministrar mediante el uso de anticuerpos monoclonales como vehículos individuales a los que se acoplan las moléculas del compuesto. Los compuestos también se pueden acoplar con polímeros solubles como vehículos de fármaco dirigibles. Estos polímeros pueden incluir péptidos, polivinil-pirrolidona, copolímero de pirano, poli-hidroxi-p ropi I -metacri I -amida-fenol, pol i -h id roxi-eti I -aspartam ida-fenol, o poli-etilen-oxido-poli-lisina sustituida con residuos de palmitoílo. Adicionalmente, los compuestos se pueden acoplar con una clase de polímeros biodegradables útiles para lograr la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo poli-ácido láctico, poli-épsilon-caprolactona, poli-ácido hidroxi-butírico, poli-ortoésteres, poliacetales, poli-dihidropiranos, poli-ciano-acrilatos, y copolímeros de bloques reticulados o antipáticos de hidrogeles . Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración transdérmica se pueden presentar como parches separados pretendidos para permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un período de tiempo prolongado . Por ejemplo, el ingrediente activo se puede suministrar a partir del parche mediante iontoforesis, como se describe en general en Pharmaceutical Research, 3(6) : 31 8 ( 1986) . Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica se pueden formular como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, rocíos, aerosoles, o aceites. Para el tratamiento de los ojos u otros tejidos externos, por ejemplo la boca y la piel , las formulaciones de preferencia se aplican como un ungüento o crema tópica. Cuando se formula en un ungüento, el ingrediente activo se puede emplear con una base de ungüento paraf ínica o miscible con agua. De una manera alternativa, el ingrediente activo se puede formular en una crema con una base de crema de aceite en agua o con una base de agua en aceite. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica a los ojos incluyen gotas para los ojos, en donde el ingrediente activo se disuelve o se suspende en un veh ículo adecuado, en especial un solvente acuoso. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica en la boca incluyen grageas, pastillas, y enjuagues bucales. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración rectal se pueden presentar como supositorios o como enemas. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal en donde el vehículo es un sólido, incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partículas, por ejemplo, en el intervalo de 20 a 500 mieras, que se administra de la manera en que se toma una aspiración, es decir, mediante inhalación rápida a través del pasaje nasal desde un recipiente del polvo sostenido cerca de la nariz. Las formulaciones adecuadas en donde el vehículo es un líquido, para administrarse como un rocío nasal o como gotas nasales, incluyen soluciones acuosas u oleosas de ingrediente activo. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración mediante inhalación incluyen polvos en partículas finas o nieblas, que se pueden generar por medio de diferentes tipos de aerosoles presurizados de dosis medida, nebulizadores, o insufladores. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal se pueden presentar como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas, o formulaciones en aerosol . Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden contener antioxidantes, reguladores del pH , bacteriostáticos, y solutos que hagan a la formulación isotónica con la sangre del receptor pretendido; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las formulaciones se pueden presentar en recipientes de una sola dosis o de múltiples dosis, por ejemplo ampolletas y frascos sellados, y se pueden almacenar en una condición secada por congelación (liofilizada) que solamente requiera de la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de usarse. Las soluciones y suspensiones para inyección extemporánea se pueden preparar a partir de polvos, granulos, y tabletas estériles. Se debe entender que, en adición a los ingredientes particularmente mencionados en lo anterior, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica, teniendo consideración del tipo de formulación en cuestión , por ejemplo, aquéllas adecuadas para administración oral pueden incluir agentes saborizantes. En los métodos de tratamiento y usos anteriormente descritos, un compuesto de la invención se puede emplear solo, en combinación con uno o más compuestos diferentes de la invención , o en combinación con otros agentes terapéuticos, y/o en combinación con otras terapias anti-neoplásicas. En particular, en los métodos para el tratamiento de las condiciones mediadas por PLK, y en los métodos para el tratamiento de neoplasmas susceptibles, se prevé la combinación con otros agentes quimioterapéuticos, así como la combinación con terapia qui rúrgica y terapia de radiación . El término "quimioterapéutico" , como se utiliza en la presente, se refiere a cualquier agente químico que tenga un efecto terapéutico en el sujeto al que se administre. Los agentes "quimioterapéuticos" incluyen, pero no se limitan a, agentes anti-neoplásicos, analgésicos, y anti-eméticos. Como se utilizan en la presente, "agentes anti-neoplásicos" incluyen agentes tanto citostáticos como citotóxicos, tales como, pero no limitándose a, quimioterapia citotóxica, terapia hormonal, inhibidores de cinasa dirigidos, y anticuerpos monoclonales terapéuticos. Las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención, por consiguiente, comprenden la administración de cuando menos un compuesto de la invención, y el uso de cuando menos otro método para el tratamiento de cáncer. En una modalidad, las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención comprenden la administración de cuando menos un compuesto de la invención y cuando menos otro agente quimioterapéutico. En una modalidad particular, la presente invención comprende la administración de cuando menos un compuesto de la invención y cuando menos un agente anti-neoplásico. Como un aspecto adicional , la presente invención proporciona los métodos de tratamiento y usos como se describen anteriormente, los cuales comprenden administrar un compuesto de la invención junto con cuando menos un agente quimioterapéutico. En una modalidad particular, el agente quimioterapéutico es un agente anti-neoplásico. En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición farmacéutica como se describe anteriormente, la cual comprende además cuando menos otro agente quimioterapéutico, más particularmente el agente quimioterapéutico es un agente anti-neoplásico. Típicamente, se puede utilizar cualquier agente quimioterapéutico que tenga actividad contra un neoplasma susceptible que se esté tratando, en combinación con los compuestos de la invención , en el entendido de que el agente particular sea clínicamente compatible con la terapia empleando un compuesto de la invención. Los agentes anti-neoplásicos típicos útiles en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, agentes anti-microtúbulos, tales como diterpenoides y alcaloides vinca; complejos de coordinación de platino; agentes alquilantes tales como mostazas de nitrógeno, oxazafosforinas, sulfonatos de alquilo, nitroso-ureas, y triazenos; agentes antibióticos, tales como antraciclinas , actinomicinas, y bleomicinas ; inhibidores de topoisomerasa II , tales como epipodofilotoxinas; anti-metabolitos, tales como análogos de purina y pirimidina, y compuestos anti-folato; inhibidores de topoisomerasa I tales como camptotecinas; hormonas y análogos hormonales; inhibidores de sendas de transducción de señales; inhibidores de angiogénesis no de cinasa de tirosina receptor; agentes inmunoterapéuticos; agentes pro-apoptóticos; e inhibidores de la señalización del ciclo celular. Los agentes anti-microtúbulos y anti-mitóticos son agentes específicos de fase activos contra los microtúbulos de las células tumorales durante la fase M o de mitosis del ciclo celular. Los ejemplos de los agentes anti-microtúbulos incluyen, pero no se limitan a, diterpenoides y alcaloides vinca. Los ejemplos de los diterpenoides incluyen, pero no se limitan a, paclitaxel y su análogo docetaxel. Los ejemplos de los alcaloides vinca incluyen, pero no se limitan a, vinblastina, vincristina, y vinorelbina. Los complejos de coordinación de platino son agentes anti-neoplásicos no específicos de fase, los cuales son interactivos con el ADN. Los complejos de platino entran a las células tumorales, sufren acuación y forman enlaces cruzados intra- e inter-cadenas con el ADN, provocando efectos biológicos adversos al tumor. Los ejemplos de los complejos de coordinación de platino incluyen, pero no se limitan a, oxaliplatina, cisplatina, y carboplatina. Los agentes alquilantes son agentes anti-neoplásicos no específicos de fase y electrófilos fuertes. Típicamente, los agentes alquilantes forman enlaces covalentes, mediante alquilación, con el ADN a través de las fracciones nucleofílicas de la molécula de ADN, tales como los grupos fosfato, amino, e hidroxilo. Esta alquilación altera la función del ácido nucleico conduciendo a la muerte celular. Los ejemplos de los agentes alquilantes incluyen, pero no se limitan a, mostazas de nitrógeno, tales como ciclofosfamida, melfalano, y clorambucil; sulfonatos de alquilo, tales como busulfano; nitroso-ureas, tales como carmustina; y triazenos tales como dacarbazina. Los agentes quimioterapéuticos antibióticos son agentes no específicos de fase, los cuales se enlazan o se intercalan con el ADN. Típicamente, esta acción da como resultado complejos de ADN estables o el rompimiento de la cadena, que altera la función ordinaria de los ácidos nucleicos, conduciendo a la muerte celular. Los ejemplos de los agentes anti-neoplásicos antibióticos incluyen, pero no se limitan a, actinomicinas tales como dactinomicina, antraciclinas tales como daunorrubicina y doxorrubicina; y bleomicinas. Los inhibidores de topoisomerasa II incluyen, pero no se limitan a, epipodofilotoxinas. Las epipodofilotoxinas son agentes anti-neoplásicos específicos de fase derivados a partir de la planta de mandragora. Las epipodofilotoxinas típicamente afectan a las células en las fases S y G2 del ciclo celular, mediante la formación de un complejo ternario con la topoisomerasa II y el ADN, provocando rompimientos de la cadena del ADN. Los rompimientos de la cadena se acumulan, y sigue la muerte celular. Los ejemplos de las epipodofilotoxinas incluyen, pero no se limitan a, etoposida y teniposida. Los agentes neoplásicos anti-metabolitos son agentes anti-neoplásicos específicos de fase que actúan en la fase S (síntesis del ADN) del ciclo celular, mediante la inhibición de la síntesis del ADN, o mediante la inhibición de la síntesis de la base de purina o pirimidina, y limitando de esta manera la síntesis del ADN. En consecuencia, la fase S no procede y sigue la muerte celular. Los ejemplos de los agentes anti-neoplásicos anti-metabolitos incluyen, pero no se limitan a, fluorouracilo, metotrexato, citarabina, mercapto-purina, y tioguanina. Las camptotecinas, incluyendo camptotecina y derivados de camptotecina, están disponibles o en desarrollo como inhibidores de topoisomerasa I. Se cree que la actividad citotóxica de las camptotecinas está relacionada con su actividad inhibidora de la topoisomerasa I. Los ejemplos de las camptotecinas incluyen, pero no se limitan a, irinotecano, topotecano, y las diferentes formas ópticas de la 7-(4-metil-piperazino-metilen)-10,11 -etilendioxi-20-camptotecina. Las hormonas y los análogos hormonales son compuestos útiles para el tratamiento de cánceres en donde haya una relación entre las hormonas y el crecimiento y/o la falta de crecimiento del cáncer. Los ejemplos de las hormonas y análogos hormonales que se cree que son útiles en el tratamiento de neoplasmas incluyen, pero no se limitan a, adrenocorticosteroides, tales como prednisona y prednisolona, que son útiles en el tratamiento de linfoma maligno y leucemia aguda en los niños; aminoglutetimida y otros inhibidores de aromatasa, tales como anastrozol, letrazol, vorazol, y exemestano, útiles en el tratamiento de carcinoma adrenocortical y carcinoma de mama dependiente de hormonas que contenga receptores de estrógeno; progrestinas, tales como acetato de megestrol, útiles en el tratamiento de cáncer de mama dependiente de hormonas y carcinoma endometrial; estrógenos, andrógenos, y anti-andrógenos, tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona, y 5a-reductasas tales como finasterida y dutasterida, útiles en el tratamiento de carcinoma prostático e hipertrofia prostética benigna; anti-estrógenos tales como tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, y yodoxifeno, útiles en el tratamiento de carcinoma de mama dependiente de hormonas; y hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) y análogos de la misma, tales como acetato de goserelina y leuprolida, que estimulan la liberación de la hormona leutinizante (LH) y/u hormona estimulante de folículos (FSH), con uso de corto plazo o intermitente, pero conducen a la supresión de la hormona leutinizante y de la hormona estimulante de folículos con el uso a largo plazo indicado para el tratamiento de carcinoma prostático y carcinoma de mama dependiente de hormonas. Los inhibidores de la senda de transducción de señales son los inhibidores que bloquean o inhiben un proceso químico que provoca un cambio intracelular Como se utiliza en la presente, este cambio es la proliferación, sobrevivencia, angiogénesis, o diferenciación celular. Los inhibidores de la transducción de señales útiles en la presente invención incluyen a los inhibidores de las cinasas de tirosina receptoras, las cinasas de tirosina no receptoras, los bloqueadores del dominio SH2/SH3, las cinasas de serina/treonina, las cinasas de fosfatidil-inositol-3, la señalización de mio-inositol, y los oncogenes Ras. Varias cinasas de proteína tirosina catalizan la fosforilación de los residuos de tirosilo específicos en diferentes proteínas involucradas en la regulación del crecimiento celular. Estas cinasas de proteína se pueden clasificar ampliamente como cinasas receptoras o no receptoras. Las cinasas de tirosina receptoras son proteínas transmembrana que tienen un dominio de enlace de ligando extracelular, un dominio transmembrana, y un dominio de cinasa de tirosina. Las cinasas de tirosina receptoras están involucradas en la regulación del crecimiento celular, y algunas veces se denominan como receptores del factor de crecimiento. Se ha demostrado que una activación inapropiada o incontrolada de muchas de estas cinasas, es decir, una actividad de cinasa receptora aberrante del factor de crecimiento, por ejemplo, mediante sobre-expresión o mutación, da como resultado un crecimiento celular incontrolado. De conformidad con lo anterior, la actividad aberrante de estas cinasas se ha ligado con un crecimiento de tejido maligno. En consecuencia, los inhibidores de estas cinasas podrían proporcionar métodos de tratamiento de cáncer. Los receptores del factor de crecimiento incluyen, por ejemplo, el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR, ErbB2, y ErbB4), el receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR), el receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), la cinasa de tirosina con dominios tipo inmunoglobulina y de homología con el factor de crecimiento epidérmico (TIE-2), el receptor del factor de crecimiento de insulina-l (IGF-I), el factor estimulante de colonias de macrófagos (cfms), BTK, ckit, cmet, los receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), los receptores Trk (TrkA, TrkB, y TrkC), los receptores de efrina (Eph), y el proto-ongogén RET. Están en desarrollo varios inhibidores de los receptores del factor de crecimiento, e incluyen antagonistas de ligandos, anticuerpos, inhibidores de cinasa de tirosina, oligonucleótidos anti-sentido, y aptámeros. Los receptores del factor del crecimiento y los agentes que inhiben la función de los receptores del factor de crecimiento se describen, por ejemplo, en Kath, John C, Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6): 803-818; Shawver y colaboradores, DDT, Volumen 2, Número 2, Febrero 1997; y Lofts, F. J. y colaboradores, "Growth Factor Receptors as Targets", New Molecular Targets for Cáncer Chemotherapy, Ed. Workman, Paul and Kerr, David, CRC Press 1994, Londres. Las cinasas de tirosina que no son cinasas receptoras del factor de crecimiento, se denominan como cinasas de tirosina no receptoras. Las cinasas de tirosina no receptoras útiles en la presente invención, que son objetivos, u objetivos potenciales de los fármacos anti-neoplásicos incluyen cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (cinasa de adhesión focal), cinasa de tirosina de Brutons, y Bcr-Abl. Estas cinasas no receptoras y agentes que inhiben la función de la cinasa de tirosina no receptora se describen en Sinh, S. y Corey, S. J. (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465 - 80; y Bolen, J. B., Brugge, J. S. (1997) Annual Review of Immunology. 15: 371-404. Los bloqueadores del dominio SH2/SH3 son agentes que alteran el enlace del dominio SH2 o SH3 en una variedad de enzimas o proteínas adaptadoras, incluyendo la subunidad p-85 de PI3-K, las cinasas de la familia Src, las moléculas adaptadoras (She, Crk, Nck, Grb2) y Ras-GAP. Los dominios SH2/SH3 como objetivos de los fármacos contra el cáncer se discuten en Smithgall, T. E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods.34(3):125-32.

Los inhibidores de las cinasas de serina/treonina, incluyendo los bloqueadores de la cascada de cinasa MAP, que incluyen a los bloqueadores de las cinasas Raf (Rafk), las cinasas reguladas por mitógeno o extracelulares (MEKs), y las cinasas reguladas extracelulares (ERKs); y los bloqueadores de los miembros de la familia de cinasa C de proteína de los subtipos de PKCs (alfa, beta, gamma, épsilon, mu, lambda, iota, zeta), la familia de cinasa IkB (IKKa, IKKb), las cinasas de la familia PKB, los miembros de la familia de cinasa Akt, y las cinasas receptoras TGF-beta. Estas cinasas de serina/treonina y sus inhibidores se describen en Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K. (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P. Samani, A., y Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60: 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cáncer Surveys, 27: 41-64; Philip, P.A., y Harris, A. L. (1995), Cáncer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. y colaboradores, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; y Martinez-Lacaci, L. y colaboradores, Int. J. Cáncer (2000), 88(1), 44-52. Los inhibidores de los miembros de la familia de cinasa de fosfatidil-inositol-3, incluyendo los bloqueadores de cinasa-PI3, ATM, DNA-PK, y Ku, también son útiles en combinación con la presente invención. Estas cinasas se discuten en Abraham, R.T. (1996), Current Opinión in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, C. E., Lim, D. S. (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology, 29 (7): 935-8; y Zhong, H. y colaboradores, Cáncer Res, (2000) 60(6), 1541-1545. También son útiles en combinación con la presente invención los inhibidores de la señalización de mio-inositol, tales como los bloqueadores de fosfolipasa C y los análogos de mio-inositol. Estos inhibidores de señales se describen en Powis, G., y Kozikowski A. (1994), New Molecular Targets for Cáncer Chemotherapy, ed., Paul Workman y David Kerr, CRC Press 1994, Londres. Otro grupo de inhibidores de la senda de transducción de señales útiles en combinación con la presente invención son los inhibidores del oncogén Ras. Estos inhibidores incluyen los inhibidores de farnesil-transferasa, geranil-geranil-transferasa, y proteasas CAAX, así como los oligonucleótidos anti-sentido, ribozimas, e inmunoterapia. Se ha demostrado que estos inhibidores bloquean la activación de Ras en las células que contienen Ras muíante de tipo silvestre, actuando de esta manera como agentes contra la proliferación. La inhibición del oncogén Ras se discute en Scharovsky, O. G., Rozados, V. R., Gervasoni, S. I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science, 7(4) 292-8; Ashby, M. N. (1998), Current Opinión in Lipidology. 9(2) 99-102; y BioChim. Biophys. Acta (1989) 1423(3): 19-30. Como se mencionó anteriormente, los anticuerpos para el enlace del ligando de cinasa receptora también pueden servir como inhibidores de la transducción de señales. Este grupo, de inhibidores de la senda de transducción de señales incluye el uso de anticuerpos humanizados para el dominio de enlace de ligando extracelular de las cinasas de tirosina receptoras. Por ejemplo, el anticuerpo específico de EGFR Imclone C225 (véase Green, M. C. y colaboradores, Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cáncer Treat. Rev. (2000), 26(4), 269-286); el anticuerpo Herceptin® ErbB2 (véase Tyrosine Kinase Signaling in Breast Cáncer: ErbB Family Receptor Tyrosine Kinases, Breast Cáncer Res., 2000, 2(3), 176-183); y el anticuerpo específico de VEGFR2 2CB (véase Brekken, R. A. y colaboradores, Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a Monoclonal Anti-VEGF Antibody Blocks Tumor Growth in Mice, Cáncer Res. (2000) 60, 5117-5124). Los inhibidores de angiogénesis de cinasa receptora también pueden encontrar uso en la presente invención. Los inhibidores de VEGFR y TIE2 relacionados con angiogénesis se discuten anteriormente con respecto a los inhibidores de la transducción de señales (ambos receptores son cinasas de tirosina receptoras). Se pueden utilizar otros inhibidores en combinación con los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, los anticuerpos anti-VEGF que no reconocen al VEGFR (la cinasa de tirosina receptora), pero que se enlazan con el ligando; los inhibidores de moléculas pequeñas de integrina (alfav beta3) que inhiben la angiogénesis; la endostatina y la angiostatina (cinasas de tirosina no receptoras) también pueden ser útiles en combinación con los inhibidores de PLK. Los agentes utilizados en los regímenes inmunoterapéuticos también pueden ser útiles en combinación con los compuestos de la invención. Los agentes utilizados en los regímenes pro-apoptóticos (por ejemplo, los oligonucleótidos anti-sentido bcl-2) también se pueden utilizar en la combinación de la presente invención. Los miembros de la familia de proteínas Bcl-2 bloquean la apoptosis. Por consiguiente, el aumento de bcl-2 se ha ligado con la quimio-resistencia. Los estudios han demostrado que el. factor de crecimiento epidérmico (EGF) estimula los miembros anti-apoptóticos de la familia bcl-2 (es decir, mcl-1). Por consiguiente, las estrategias diseñadas para disminuir la expresión de bcl-2 en los tumores, han demostrado un beneficio clínico, y ahora están en los estudios en Fase ll/lll, es decir, el oligonucleótido anti-sentido G3139 bcl-2 de Genta. Estas estrategias pro-apoptóticas, empleando las estrategias de oligonucleótidos anti-sentido para bcl-2, se discuten en Water J. S. y colaboradores, J. Clin. Oncol. 18: 1812-1823 (2000); y Kitada S. y colaboradores, Antisense Res. Dev.4: 71-79 (1994). Los inhibidores de la señalización del ciclo celular inhiben las moléculas involucradas en el control del ciclo celular. Las cinasas dependientes de ciclina (CDKs) y sus ciclinas de interacción, controlan el progreso a través del ciclo celular eucariótico. La activación e inactivación coordinada de diferentes complejos de ciclina/CDK es necesaria para el progreso normal a través del ciclo celular. Están en desarrollo varios inhibidores de la señalización del ciclo celular. Por ejemplo, los ejemplos de las cinasas dependientes de ciclina, incluyendo CDK2, CDK4, y CDK6, y los inhibidores para las mismas, se describen, por ejemplo, en Rosania y colaboradores, Exp. Opin. Ther. Patents 10(2): 215-230 (2000). En una modalidad, los métodos de la presente invención comprenden administrar al animal un compuesto de la invención en combinación con un inhibidor de la senda de transducción de señales, en particular gefitinib (IRESSA®). Los métodos y usos empleando estas combinaciones pueden comprender la administración del compuesto de la invención y el otro agente quimioterapéutico/anti-neoplásico, ya sea en secuencia en cualquier orden, o bien de una manera simultánea en composiciones farmacéuticas separadas o combinadas. Cuando se combinan en la misma formulación, se apreciará que los dos compuestos deben ser estables y compatibles uno con el otro, y con los otros componentes de la formulación, y se pueden formular para su administración. Cuando se formulan por separado, se pueden proporcionar en cualquier formulación conveniente, de una manera tal como se conoce para estos compuestos en la técnica. Cuando se utiliza un compuesto de la invención en combinación con un agente quimioterapéutico, la dosis de cada compuesto puede ser diferente de aquélla cuando se utiliza solo el compuesto. Las dosis apropiadas serán fácilmente apreciadas por los expertos en este campo. La dosis apropiada de los compuestos de la invención y los otros agentes terapéuticamente activos, y los tiempos de administración relativos, se seleccionarán con el objeto de lograr el efecto terapéutico combinado deseado, y están dentro de la experiencia y discreción del clínico que atienda. Los compuestos de la invención se pueden preparar convenientemente mediante los métodos descritos en los ejemplos que se encuentran más adelante. La presente invención también proporciona los compuestos radiomarcados de la invención y los compuestos biotinilados de la invención, y las versiones enlazadas con soporte sólido de los mismos . Los compuestos radiomarcados de la invención y los compuestos biotinilados de la invención se pueden preparar empleando técnicas convencionales. Por ejemplo, los compuestos radiomarcados de la invención se pueden preparar mediante la reacción del compuesto de la invención con gas de tritio en la presencia de un catalizador apropiado, para producir los compuestos radiomarcados de la invención. En una modalidad, los compuestos están tritiados.

Los compuestos radiomarcados de la invención y los compuestos biotinilados de la invención son útiles en los ensayos para la identificación de los compuestos que inhiban PLK, para la identificación de los compuestos para el tratamiento de una condición mediada por PLK, para la identificación de los compuestos para el tratamiento de una condición mediada por PLK, para el tratamiento de los neoplasmas susceptibles para el tratamiento de las condiciones caracterizadas por una proliferación inapropiada, para la inhibición de la proliferación de una célula, y para la inhibición de la mitosis en una célula. De conformidad con lo anterior, la presente invención proporciona un método de ensayo para identificar tales compuestos, cuyo método comprende el paso de enlazar específicamente el compuesto radiomarcado de la invención o el compuesto biotinilado de la invención con la proteína objetivo o los homogenatos celulares. De una manera más específica, los métodos de ensayo adecuados incluirán ensayos de enlace de competencia. Los compuestos radiomarcados de la invención y los compuestos biotinilados de la invención, y sus versiones enlazadas con soporte sólido, se pueden emplear en los ensayos de acuerdo con los métodos convencionales en este campo. Los siguientes ejemplos se pretenden solamente para ilustración, y no pretenden limitar el alcance de la invención de ninguna manera, siendo la invención definida por las siguientes reivindicaciones. Las siguientes abreviaturas, como se emplean en los ejemplos, tienen los significados mencionados: g Gramo(s). mg Miligramo(s). mol Mol(es). mmol Milimol(es). N Normal. L Litro(s). mL Mililitro(s). µL Microlitro(s). h Hora(s). min Minuto(s). °C Grados Centígrados. HCl Ácido clorhídrico. DCM Dicloro-metano. MeOH Metanol. EtOAc Acetato de etilo. MgS0 Sulfato de magnesio. NaHC03 Bicarbonato de sodio. K2C03 Carbonato de potasio. Na2S04 Sulfato de sodio. N2 Nitrógeno. H2 Hidrógeno. XANTPHOS (4,5-bis-(difenil-fosfino)-9,9-dimetil-xanteno) es un catalizador comercialmente disponible, de Aldrich. Los reactivos están comercialmente disponibles o se preparan de acuerdo con los procedimientos de la literatura. En las siguientes estructuras, "Me" se refiere al grupo -CH3. Ejemplo del Intermediario 1: 5-amino-3-(((1 R)-1-f2 -(tri fluoro -metil)-fenill-etil)-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo Paso A - 5-nitro-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo Una pasta de trifenil-fosfina soportada por polímero (62.36 gramos, 2.21 milimoles/gramo, 137.8 milimoles) en dicloro-metano (1.0 litro) se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se enfrió a 0°C. Se agregó 3-hidroxi-5-nitro-2- tiofen-carboxilato de metilo (20.00 gramos, 98.44 milimoles), el cual se puede preparar de una manera análoga al procedimiento de la literatura (Barker, J. M.; Huddleston, P. R.; Wood, M. L.; Burkitt, S.A. Journal of Chemical Research (Mini-impresión) 2001, 1001-1022), seguido por (1 S)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]etanol (26.20 gramos, 137.8 milimoles) y azo-dicarboxilato de diterbutilo (31.73 gramos, 137.8 milimoles). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 21.25 horas, y entonces se filtró a través de un embudo fritado y se concentró. El residuo se trató con HCl 4 N en 1,4-dioxano (300 mililitros), y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se apagó entonces mediante la adición de hidróxido de sodio 3 N (300 mililitros) y NaHC03 acuoso saturado (200 mililitros). La mezcla se extrajo con dicloro-metano (250 mililitros, 3 veces). Las fracciones orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron sobre gel de sílice. La purificación mediante cromatografía en columna (del 0 al 25 por ciento de EtOAc:hexanos) proporcionó 36.08 gramos (98 por ciento) del compuesto del título como un aceite amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): d 7.82 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 7.68 (d, 1 H, J = 7.8 Hz), 7.59 (t, 1 H, J = 7.4 Hz), 7.46 (s, 1 H), 7.42 (t, 1 H, J = 7.6 Hz), 5.77 (q, 1 H, J = 6.1 Hz), 3.94 (s, 3H), 1.74 (d, 3H, J = 6.1 Hz). Paso B - 5-amino-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo A un matraz equipado con una sonda de temperatura, un agitador mecánico superior, un condensador de reflujo, y un embudo de adición, se le agregaron polvo de hierro (26.84 gramos, 480.6 milimoles) y ácido acético (130 mililitros). La pasta de hierro/ácido acético se agitó mecánicamente y se calentó a una temperatura interna de 50°C. Al embudo de adición se le agregó una solución de 5-nitro-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (36.08 gramos, 96.13 milimoles) en ácido acético (160 mililitros). La solución del embudo de adición se agregó entonces por goteo a la pasta de hierro/ácido acético, a una velocidad tal que se mantuviera la temperatura interna a <60°C (tiempo de adición total de 2.5 horas). La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con dicloro-metano (500 mililitros), y entonces se apagó mediante la adición de hidróxido de sodio 6 N (750 mililitros) y NaHC03 acuoso saturado (200 mililitros). Toda la mezcla de reacción se filtró entonces a través de un cojín de Celite para remover el material insoluble, enjuagando el Celite con dicloro-metano adicional (250 mililitros). Las fracciones acuosas y orgánicas se separaron. La fracción acuosa se extrajo con EtOAc (400 mililitros, 2 veces). Las fracciones orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron para proporcionar 30.66 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un sólido color naranja. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): 57.89 (d, 1 H, J = 7.7 Hz), 7.62 (d, 1 H, J = 7.7 Hz), 7.56 (t, 1H, J = 7.7 Hz), 7.36 (t, 1H, J = 7.7 Hz), 5.72 (s, 1H), 5.65 (q, 1 H, J = 6.3 Hz), 4.26 (br s, 2H), 3.80 (s, 3H), 1.66 (d, 3H, J = 6.3 Hz); MS (APCI): 368.00 [M + Na] + . Ejemplo del Intermediario 2: S-amino-S-ífíl R)-1 -(2-cloro-feniD-etil- oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo Paso A - 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-nitro-2-tiofen-carboxilato de metilo El 3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-nitro-2-tiofen-carboxilato de metilo se preparó a partir del 3-hidroxi-5-nitro-2-tiofen-carboxilato de metilo y (1 S)-1 -(2-cloro-fenil)-etanol mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo del Intermediario 1, Paso A. H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 7.96 (s, 1 H), 7.65 (dd, 1 H, J = 1.7, 7.8 Hz), 7.47 (dd, 1 H, J = 1.5, 7.7 Hz), 7.40 (dt, 1H, J = 1.3, 7.5 Hz), 7.34 (dt, 1H, J = 1.9, 7.5 Hz), 5.98 (q, 1H, J = 6.0 Hz), 3.85 (s, 3H), 1.59 (d, 3H, J = 6.2 Hz). Paso B - 5-amino-3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo El 5-amino-3-{[(1 R)-1 -(2-c ~loirofsenil)etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo se preparó a partir del 3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-nitro-2-tiofen-carboxilato de metilo mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo del Intermediario 1, Paso B. H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 7.54 (dd, 1 H, J = 1.8, 7.9 Hz), 7.45 (dd, 1H, J = 1.4, 7.7 Hz), 7.37 (dt, 1H, J = 1.4, 7.7 Hz), 7.31 (dt, 1H, J = 1.8, 7.6 Hz), 6.76 (br s, 2H), 5.57 (q, 1H, J = 6.2 Hz), 5.49 (s, 1 H), 3.63 (s, 3H), 1.51 (d, 3H, J = 6.4 Hz); MS (ESI): 334.03 [M + Na]+.

Ejemplo 1 : 5-(6-í(metil-sulfonil)-met¡H-1 H-bencimidazol-1 -il)-3- (((1R)-1 -r2-(trifluoro-metil)-fenil1-etil)-oxi)-2-tiofen-carboxamida Ruta 1: Paso A 5-(hidroxi-metil)-2-n ¡tro- fenol A una mezcla del ácido 3-hidroxi-4-nitro-benzoico (5.0 gramos, 27.3 milimoles) en 1 ,2-dicloro-etano (100 mililitros) se le agregó borato de trimetilo (4.9 mililitros, 43.7 milimoles), seguido por dietil-eterato de trifluoruro de boro (5.5 mililitros, 43.7 milimoles). Entonces se agregó lentamente por goteo un complejo de borano-piridina (4.1 mililitros, 41.0 milimoles). La reacción se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente, luego se enfrió a 0°C, y se apagó con metanol (10 mililitros). La mezcla se concentró al vacío, y el residuo se absorbió en tolueno (200 mililitros), luego se extrajo con hidróxido de sodio acuoso 1 N (100 mililitros, 3 veces). Las capas acuosas combinadas se ajustaron a un pH de 1.0 mediante la adición de HCl 12 N, y luego se extrajeron con EtOAc (250 mililitros, 3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre MgS0 y se concentraron al vacío, para dar 4.55 gramos (98 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 10.87 (s, 1H), 7.85 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 7.08 (s, 1H), 6.88 (dd, 1H, J = 1.19, 8.51 Hz), 5.43 (s, 1 H), 3.33 (s, 2H). Paso B - Pivalato de 3-hidroxi-4-nitro-bencilo Una mezcla de 5-(hidroxi-metil)-2-nitro-fenol (11.35 gramos, 67.15 milimoles) y 3-(2,2-dimetil-propanoil)-1 ,3-tiazolidina-2-tiona (15.0 gramos, 73.89 milimoles), que se puede preparar de una manera análoga al procedimiento de la literatura (Yamada, S. Tetrahedron Letters 1992, 33, 2171-2174), se agitó en tolueno (670 mililitros) a 100°C durante 40 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente. La reacción se concentró al vacío hasta un volumen de aproximadamente 200 mililitros, y la pasta acuosa resultante se filtró a través de de un papel filtro, lavando el sólido con tolueno frío. El filtrado entonces se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 0 al 20 por ciento de EtOAc/hexanos, para dar 11.09 gramos (65 por ciento) del compuesto del título como un aceite amarillo transparente. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 11.05 (s, 1 H), 7.87 (d, 1H, J = 8.42 Hz), 7.06 (s, 1H), 6.90 (dd, 1 H, J = 1.46, 8.42 Hz), 5.09 (s, 2H), 1.18 (s, 9H). Paso C - Pivalato de 4-nitro-3-{[(trifluorometil)-sulfonil]-oxi}-bencilo A una solución enfriada (0°C) y agitada de pivalato de 3-hidroxi-4-nitro-bencilo (11.11 gramos, 43.9 milimoles) y N-fenil-trifluoro-metan-sulfonimida (16.51 gramos, 46.2 milimoles) en dicloro-metano (220 mililitros) se le agregó lentamente N,N-di-isopropil-etil-amina (15.5 mililitros, 88.9 milimoles). La reacción se agitó durante 45 minutos a 0°C, y luego durante 45 minutos a temperatura ambiente. La reacción entonces se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente del 5 al 20 por ciento de EtOAc/hexanos para dar 16.87 gramos (99 por ciento) del compuesto del título como un sólido grisáceo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.36 (d, 1H, J = 8.42 Hz), 7.75-7.69 (m, 2H), 5.27 (s, 2H), 1.19 (s, 9H).

Paso D - 5-[(5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-2-nitro-fenil)-amino]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo Una mezcla del pivalato 4-nitro-3-{[(trifluoro-metil)-sulfonil]-oxi}-bencilo (1.0 gramos, 2.60 milimoles), 5-amino-3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (1.34 gramos, 3.88 milimoles), tetraquis-(trifenil-fosfina)-paladio(0) (150 miligramos, 0.13 milimoles), trifenil-fosfina (68 miligramos, 0.26 milimoles) y K2C03 (900 miligramos, 6.5 milimoles), se agitó en tolueno (5.2 mililitros) a 100°C durante 2 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de Celite, lavando con EtOAc y dicloro-metano. El filtrado se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente del 5 al 25 por ciento de EtOAc/hexano para dar 1.26 gramos (84 por ciento) del compuesto del título como un aceite color rojo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 9.75 (s, 1H), 8.09 (d, 1 H, J = 8.6 Hz), 7.89 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.69-7.78 (m, 2H), 7.52 (t, 1H, J = 7.59 Hz), 7.34 (s, 1 H), 7.01 (dd, 1 H, J = 1.46, 8.60 Hz), 6.62 (s, 1 H), 5.70- 5.75 (m, 1 H), 5.07 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.58 (d, 3H, J = 6.22 Hz), 1.13 (s, 9H).

Paso E - 5-[(2-amino-5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-fenil)-amino]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo Una mezcla de 5-[(5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-2-nitro-fenil)-amino]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (2.42 gramos, 4.17 milimoles) y platino (sulfurado, al 5 por ciento en peso sobre carbón) (811 miligramos, 0.21 milimoles) en EtOAc (30 mililitros) se agregó a un matraz de reacción de alta presión. La reacción se purgó con vacío y gas de N2, luego se aplicó gas de H2 a 50 psi (3.5 kg/cm2) durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite, lavando con EtOAc. El filtrado se concentró al vacío para dar 2.27 gramos (99 por ciento) del compuesto del título como un sólido bronceado. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.62 (s, 1 H), 7.84 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.72 (dd, 2 H, J = 7.60, 13.09 Hz), 7.50 (t, 1 H, J = 7.60 Hz), 7.01 (d, 1 H, J - 1.46 Hz), 6.88 (dd, 1 H, J = 1.74, 8.15), 6.68 (d, 1 H, J = 8.24 Hz), 5.83 (s, 1 H), 5.59-5.65 (m, 1 H), 4.97 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.55 (d, 3H, J = 6.23 Hz), 1.11 (s, 9H); MS (ESI): 551 [M + H]+.

Paso F - 5-(6-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-1 H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una mezcla de 5-[(2-amino-5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-fenil)-amino]-3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)tiofen-2-carboxilato de metilo (2.27 gramos, 4.13 milimoles) en orto-formato de trietilo (10 mililitros, 60.2 milimoles) y dicloro-metano (3 mililitros) se le agregó p-toluen-sulfonato de piridinio (100 miligramos, 0.4 milimoles). La reacción se agitó a 40°C durante 1 hora, y luego se enfrió a temperatura ambiente. Toda la mezcla de reacción se cargó sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/hexanos, para dar 2.0 gramos (86 por ciento) del compuesto del título como un sólido bronceado claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.65 (s, 1H), 7.99 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.75- 7.80 (m, 2H), 7.72 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.63 (s, 1 H), 7.53 (t, 1H, J = 7.60 Hz), 7.40 (s, 1 H), 7.35 (d, 1H, J = 8.42 Hz), 5.96 (q, 1H, J = 6.10 Hz), 5.21 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 1.65 (d, 3H, J = 6.23 Hz), 1.16 (s, 9H); MS (ESI): 561 [M + H] + . Paso G - 5-[6-(hidroxi-metil)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2- (trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una solución agitada de 5-(6-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-1H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (5.21 gramos, de un lote diferente empleando un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso F, 9.30 milimoles) en metanol (24 mililitros) se le agregó hidróxido de sodio 0.5 M en metanol (24.0 mililitros, 12 milimoles). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas, entonces se apagó con ácido acético (2 mililitros). La mezcla se diluyó con diclorometano (350 mililitros) y una solución de salmuera acuosa medio-saturada (150 mililitros). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (250 mililitros). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS0 y se concentraron al vacío para dar 4.40 gramos (99 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.58 (s, 1H), 7.99 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.69- 7.81 (m, 3H), 7.51-7.58 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (d, 1H, J = 8.42), 5.96 (q, 1 H, J = 6.10 Hz), 5.30 (t, 1 H, J = 5.77 Hz) 4.62 (d, 2H, J = 5.86 Hz), 3.83 (s, 3H), 1.65 (d, 3H, J = 6.23 Hz); MS (ESI): 477 [M + H]+. Paso H - 5-[6-(cloro-metil)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2- (trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una solución agitada de 5-[6-(hidroxi-metil)-1 H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (1.47 gramos, 3.08 milimoles) y trifenil-fosfina (1.05 gramos, 4.01 milimoles) en dicloro-metano (30 mililitros) se le agregó N-cloro-succinimida (0.53 gramos, 4.01 milimoles). La reacción se calentó entonces a reflujo, y se agitó durante 20 minutos, y luego se enfrió a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con diclorometano (400 mililitros) y una solución de salmuera acuosa medio-saturada (150 mililitros). La capa acuosa se extrajo entonces con dicloro-metano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se concentraron al vacío, y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente del 10 al 60 por ciento de EtOAc/hexanos, para dar 1.4 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.65 (s, 1 H), 7.99 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.72-7.81 (m, 3H), 7.69 (s, 1H), 7.54 (t, 1 H, J = 7.69 Hz), 7.43 (d, 1H, J = 8.42), 7.38 (s, 1H), 5.97 (q, 1H, J = 6.10 Hz), 4.91 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.66 (d, 3H, J = 6.23 Hz); MS (ESI): 495 [M + H] + . Paso I - 5-{6-[(tiometil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una mezcla agitada de 5-[6-(cloro-metil)-1 H-bencimidazol-1 -il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (200 miligramos, 0.40 milimoles) en N,N-dimetil-formamida (2.5 mililitros), se le agregó tiometóxido de sodio (37 miligramos, 0.52 milimoles). La reacción se agitó durante 30 minutos, entonces se diluyó con EtOAc, se lavó con agua (5 veces), salmuera, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacío, y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente del 0 al 60 por ciento de EtOAc/hexanos, para dar 147 miligramos (72 por ciento) del compuesto del título como un sólido blanco. MS (ESI): 507 [M + H] + . Paso J - 5-{6-[(tiometil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxamida Una mezcla de 5-{6-[(tiometil)-metil]-1 H-bencimidazol-1 - ¡ I > - 3 -({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (144.0 miligramos, 0.28 milimoles) y amoníaco 7N en metanol (18 mililitros, 126.0 milimoles) se agregó a un matraz de reacción de vidrio de alta presión. El matraz se selló, luego se calentó a 80°C durante aproximadamente 16 horas. El matraz se enfrió a temperatura ambiente, se abrió, y la mezcla de reacción se concentró al vacío, luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 0 al 3 por ciento de metanol/dicloro-metano con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 130 miligramos (93 por ciento) del compuesto del título como un sólido color dorado. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.49 (s, 1H), 7.93 (d, 1H, J = 7.68 Hz), 7.85 (br s, 1H), 7.80-7.75 (m, 2H), 7.69 (d, 1H, J = 8.23 Hz), 7.56 (t, 1 H, J = 7.68 Hz), 7.39 (s, 1 H), 7.29 (d, 1 H, J = 8.42 Hz), 7.15 (br s, 1 H), 7.08 (s, 1H), 5.94 (m, 1H), 3.79 (s, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.75 (d, 3H, J = 6.22 Hz); MS (ESI): 492 [M + H]+. Paso K - 5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxamida A una solución enfriada (-10°C) y agitada de 5-{6-[(tiometil)- metil]- 1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxamida (76 miligramos, 0.15 milimoles) en diclorometano (3.0 mililitros), se le agregó ácido m-cloro-peroxi-benzoico (70 miligramos, 0.31 milimoles). La reacción se agitó durante 30 minutos, se calentó a temperatura ambiente, y se agitó durante 15 minutos, y entonces se concentró al vacío. El residuo se diluyó con cloroformo y se lavó con NaHC03 acuoso saturado, agua, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacío, y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente del 0 al 5 por ciento de metanol/dicloro-metano, con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 78 miligramos (96 por ciento) del compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.57 (s, 1H), 7.95 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.85 (br s, 1H), 7.80-7.73 (m, 3H), 7.69 (s, 1H), 7.55 (t, 1 H, J = 7.69 Hz), 7.38 (d, 1 H, J = 8.42 Hz), 7.19 (s, 1H), 7.12 (br s, 1H), 5.95-5.89 (m, 1H), 4.61-4.58 (m, 2H), 2.89 (s, 3H), 1.75 (d, 3H, J = 6.04 Hz); MS (ESI): 524 [M + H] + . Ruta 2: Paso A - 5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo Una mezcla de 5-[6-(cloro-metil)-1 H-bencimidazol-1-il]-3-({(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (4.53 gramos, de un lote diferente empleando un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso H, 9.17 milimoles), sal sódica del ácido metan-sulfónico (2.81 gramos, 27.5 milimoles) y etanol (40.0 mililitros), se agregó a un matraz de reacción de vidrio de alta presión. El matraz se selló, luego se calentó a 85°C durante aproximadamente 16 horas. El matraz se enfrió a temperatura ambiente, se abrió, y la mezcla de reacción se concentró al vacío, entonces se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 5 al 35 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 4.54 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.67 (s, 1H), 8.01 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.82-7.70 (m, 4H), 7.53 (t, 1H, J = 7.69 Hz), 7.45 (s, 1H), 7.40 (d, 1H, J = 8.42 Hz), 5.95 (m, 1H), 4.63 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 1.65 (d, 3H, J = 6.204 Hz); MS (ESI): 539 [M + H]+. Paso B - 5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2- (trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxamida Una mezcla de 5-{6-[(metil-sulfonil)-metil]-1 H-bencimidazol-1 - il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (4.53 gramos, 8.42 milimoles) y amoníaco 7N en metanol (250.0 mililitros, 1.75 moles) se agregó a un matraz de reacción de vidrio de alta presión. El matraz se selló, y luego se calentó a 85°C durante aproximadamente 36 horas. El matraz se enfrió a temperatura ambiente, se abrió, y la mezcla de reacción se combinó con un segundo lote de 5-{6- [(metil-sulfonil)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (4.11 gramos, 7.63 milimoles), que también se había tratado con amoníaco 7N en metanol (200.0 mililitros, 1.40 moles) en un matraz de reacción de vidrio de alta presión a 85°C durante aproximadamente 36 horas, y luego se enfrió a temperatura ambiente y se abrió. Las mezclas de reacción combinadas se concentraron al vacío, y luego se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 0 al 5 por ciento de metanol/dicloro-metano, con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 7.47 gramos (89 por ciento) del compuesto del título como un sólido grisáceo. MS (ESI): 524 [M + H] + . Ejemplo 2: 3(f(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil-oxi)-5-(6-[(metil-sulfonil)-metill-1 H-bencimidazol-1 -il)-2-tiofen-carboxamida Paso A - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(tiometil)-metil]- 1 H-bencimidazol-1 -il}-tiofen-2-carboxilato de metilo El compuesto del título se preparó a partir del 5-[6-(cloro-metil)-1H-bencimidazol-1-il]-3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso I. MS (ESI): 473 [M + H] + . Paso B - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(tiometil)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -ilj-tiofen-2-carboxamida El compuesto del título se preparó a partir del 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(tiometil)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}-tiofen-2-carboxilato de metilo, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso J. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.53 (s, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 7.71-7.66 ! (m, 2H),7.49 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.45-7.35 (m, 3H), 7.29 (d, 1 H, J = 8.42 Hz), 7.16-7.11(m, 2H), 6.01-5.95 (m, 1H), 3.82 (s, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.73 (d, 3H, J = 6.41 Hz); MS (ESI): 458 [M + H]+. Paso C - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(metil-sulfonil)- metil]-1H-bencimidazol-1-il}-2-tiofen-carboxamida El compuesto del título se preparó a partir de la 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(tiometil)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-tiofen-2-carboxamida mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso K. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.61 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.79 (d, 1H, J = 8.24 Hz), 7.73 (s, 1 H), 7.70-7.67 (m, 1 H), 7.49-7.47 (m, 1 H), 7.44-7.33 (m, 3H), 7.26 (s,1 H), 7.12 (s, 1H), 5.97-5.93 (m, 1H), 4.64-4.60 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 1.73 (d, 3H, J = 6.41 Hz); MS (ESI): 490 [M + H] + . Ejemplo del Intermediario 3: 5-(6-bromo-1H-bencimidazol-1-il)-3-hidroxi- 2-tiofen-carboxilato de metilo Paso A - 5-(6-bromo-1H-bencimidazol-1-il)-3-{[(1,1-dimetil-etil)-(dimetil)-silil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo A una mezcla de 5-bromo-1 H-bencimidazol (43.78 gramos, 222.0 milimoles) en cloroformo (800 mililitros) se le agregó N-metil-imidazol (44.5 mililitros, 560.0 milimoles), seguido por 2-cloro-3-oxo-2,3-dihidro-2-tiofen-carboxilato de metilo (44.8 gramos, 233.0 milimoles). La reacción se agitó durante 20 horas a temperatura ambiente, luego se agregó N-metil-imidazol (18.0 mililitros, 226.0 milimoles), seguido por cloruro de terbutil-dimetil-sililo (36.8 gramos, 245.0 milimoles). La reacción se agitó durante 1 hora, entonces se apagó con metanol, y se vertió en dicloro-metano y agua. La capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (3 veces). Los orgánicos combinados entonces se secaron sobre Na2S04, se concentraron, y se pasaron por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 50 al 75 por ciento de EtOAc al 25 por ciento en hexano/hexano para dar 25.18 gramos (24 por ciento) del compuesto del título. MS (ESI): 467 [M + H] + . Paso B - 5-(6-bromo-1 H-bencimidazol-1 -il)-3-hidroxi-2-tiofen-carboxilato de metilo A una solución agitada de 5-(6-bromo-1 H-bencimidazol-1 - í I ) - 3 -{[(1 ,1-dimetil-etil)-(dimetil)-silil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo (25.18 gramos, 53.9 milimoles) en tetrahidrofurano (540.0 mililitros) se le agregó fluoruro de tetrabutil-amonio 1.0 M en tetrahidrofurano (60.0 mililitros, 60.0 milimoles). La reacción se agitó durante 1.5 horas, y luego se agregó NH4CI acuoso saturado (200 mililitros). La pasta resultante se agitó durante 15 minutos, y luego se diluyó con agua (750 mililitros) y EtOAc (1.0 litro). La capa acuosa se separó, y su pH se ajustó a 3.0 mediante la adición de HCl acuoso 1M. La capa acuosa se extrajo entonces con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con HCl acuoso 0.1 M, salmuera, se secaron sobre MgS04 y se concentraron al vacío, para dar 19.4 gramos (100 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. MS (ESI): 353 [M + H]+. Ejemplo 3: 5-(6-f(4-metil-piperazin-1 -il)-met¡p-1 H-bencimidazol- 1 -i 11-3-1(1 R)-1 -r2-(trifluoro-metil)-fenill-etoxi)-tiofen-2-carboxamida Ruta 1: Paso A - 5-(6-bromo-1H-bencimidazol-1-il)-3-{(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de 3-metilo Una pasta de trifenil-fosfina soportada por polímero (53.0 gramos, 2.04 milimoles/gramo, 108 milimoles), (1 S)-1 -[2-(trifluoro- metil)-fenil]-etanol (15.4 gramos, 81.0 milimoles), y 5-(6-bromo-1 H-bencimidazol-1 -il)-3-hidroxi-tiofen-2-carboxilato de metilo (Ejemplo del Intermediario 3) (19.0 gramos, 53.9 milimoles) en dicloro-metano (750 mililitros) se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Entonces la pasta se trató con azo-dicarboxilato de diterbutilo (24.8 gramos, 108 milimoles). La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas, y luego se vertió a través de de un papel filtro, lavando los sólidos de resina con dicloro-metano y metanol. El filtrado se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 5 al 50 por ciento de EtOAc/hexano para dar 23.8 gramos (84 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.63 (s, 1 H), 7.97 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.80-7.71 (m, 3H), 7.65 (d, 1 H, J = 1.65 Hz), 7.57-7.48 (m, 2H), 7.35 (s, 1 H), 5.99 (q, 1H, J = 5.98 Hz), 3.83 (s, 3H), 1.65 (d, 3H, J = 6.04 Hz); MS (ESI): 525 [M + H] + . Paso B - 3-{(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-5-(6-vinil-1 H-bencimidazol-1 -il)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una mezcla de 5-(6-bromo-1 H-bencimidazol-1 -il)-3-{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de 3-metilo (23.8 gramos, 45.4 milimoles), vinil-trifluoro-borato de potasio (7.25 gramos, 54.5 milimoles), y trietil-amina (6.3 mililitros, 45.4 milimoles), agitada a temperatura ambiente en propanol normal (230 mililitros), se le agregó un complejo de [1 ,1 '-bis-(difenil-fosfino)-ferroceno]-dicloro-paladio(ll) / dicloro-metano (750 miligramos, 0.91 milimoles). La mezcla se calentó entonces a reflujo, y se agitó durante 3 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua, y se extrajo con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se concentraron al vacío, y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 10 al 40 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 17.06 gramos (80 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.59 (s, 1H), 7.98 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.80-7.71 (m, 3H), 7.59 (s, 1 H), 7.56-7.52 (m, 2H), 7:39 (s, 1 H), 6.85 (dd, 1 H, J = 10.98 y 17.75 Hz), 6.00 (q, 1H, J = 6.10 Hz), 5.86 (d, 1H, J = 17.56 Hz), 5.31 (d, 1H, J = 10.98 Hz), 3.83 (s, 3H), 1.65 (d, 3H, J = 6.04 Hz); MS (ESI): 473 [M + H] + . Paso C - 5-[6-(1,2-dihidroxi-etil)-1H-bencimidazol-1-il]-3-{(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo A una solución agitada de 3-{(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]- etoxi}-5-(6-vinil-1H-bencimidazol-1 -il)-tiofen-2-carboxilato de metilo (17.06 gramos, 36.1 milimoles) en 360 mililitros de acetona/agua (3:1), se le agregó N-óxido de 4-metil-morfolina (5.1 gramos, 43.4 milimoles), seguida por una solución al 2.5 por ciento en peso de tetróxido de osmio en 2-metil-2-propanol (10.0 mililitros, 0.8 milimoles). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, y luego se apagó con sulfito de sodio acuoso (saturado). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS0 , se concentraron al vacío, y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 1 al 8 por ciento de metanol/dicloro-metano con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 16.72 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.59 (d, 1H, J = 1.46 Hz), 7.98 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.80-7.68 (m, 3H), 7.59-7.52 (m, 2H), 7.36-7.31 (m, 2H), 5.95 (q, 1 H, J = 6.10 Hz), 5.37 (t, 1 H, J = 3.66 Hz), 4.76-4.64 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.46-3.42 (m, 2H), 1.65 (d, 3H, J = 6.04 Hz); MS (ESI): 507 [M + H] + . Paso D - 5-(6-formil-1H-bencimidazol-1-il)-3-{(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo A una solución de 5-[6-(1 ,2-dihidroxi-etil)-1 H-bencimidazol-1 -il]-3-{(1 R)-1-[2-(trifluorometil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo (16.72 gramos, 33.0 milimoles) en 1:1:1 de dicloro-metano/agua/metanol (220 mililitros) se le agregó peryodato de sodio (10.58 gramos, 49.5 milimoles). La pasta resultante se agitó durante 1 hora, y luego se diluyó con agua y EtOAc. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04 y se concentraron al vacío para dar 14.76 gramos (94 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 10.09 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 8.02-7.89 (m, 3H), 7.81-7.72 (m, 2H)i 7.57-7.51 (m, 2H), 5.98 (q, 1H, J = 6.10 Hz), 3.84 (s, 3H), 1.66 (d, 3H, J = 6.22 Hz); MS (ESI): 475 [M + H]+. Paso E - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-{(1 R)-1-[2-(trifluorometil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo A una solución agitada de 5-(6-formil-1 H-bencimidazol-1 - i I ) - 3 -{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo (14.76 gramos, 31.1 milimoles), N-metil-piperazina (5.72 mililitros, 62.3 milimoles) y ácido acético (2.1 mililitros, 37.4 milimoles) en dicloroetano (150 mililitros), se le agregó triacetoxi-borohidruro de sodio (9.9 gramos, 46.7 milimoles). La reacción se agitó durante 1.5 horas, luego se agregó K2C03 acuoso al 5 por ciento, hasta que el pH fue de aproximadamente 8. Entonces la mezcla se diluyó con EtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, se concentraron al vacío, y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 1 al 8 por ciento de metanol/dicloro-metano con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 15.82 gramos (91 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.57 (s, 1H), 7.98 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.80-7.68 (m, 3H), 7.54 (t, 1 H, J = 7.59 Hz), 7.46 (s, 1H), 7.33-7.28 (m, 2H), 5.97 (q, 1 H, J = 6.16 Hz), 3.83 (S, 3H), 3.55 (s, 2H), 2.45-2.20 (m, 8H), 2.13 (s, 3H), 1.66 (d, 3H, J = 6.04 Hz); MS (ESI): 559 [M + H] + . Paso F - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxamida Una mezcla de 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}-3-{(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo (15.82 gramos, 28.35 milimoles) y amoníaco 7N en metanol (250 mililitros, 1.75 moles) se agregó a un matraz de reacción de vidrio de alta presión. El matraz se selló, luego se calentó a 80°C durante aproximadamente 40 horas. El matraz se enfrió a temperatura ambiente, se abrió, y la mezcla de reacción se concentró al vacío; entonces se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 2 al 8 por ciento de metanol/dicloro-metano con hidróxido de amonio al 1 por ciento para dar 14.11 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.49 (s, 1 H), 7.93 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.86 (br s, 1 H), 7.80-7.75 (m, 2H), 7.68 (d, 1H, J = 8.23 Hz), 7.56 (t, 1 H, J = 7.68 Hz), 7.33 (s, 1H), 7.28 (d, 1 H, J- 8.42 Hz), 7.15 (br s, 1 H), 7.06 (s, 1 H), 5.94 (q, 1 H, J = 6.10 Hz), 3.52 (s, 2H), 2.45-2.20 (m, 8H), 2.13 (s, 3H), 1.74 (d, 3H, J = 6.22 Hz); MS (ESI): 544 [M + H] + . Ruta 2: Paso A - 2-bromo-4-{[(metiloxi)-metil]-oxi}-1 -nitro-benceno Una solución de 3-bromo-4-nitro-fenol (20.0 gramos, 91.7 milimoles) en dicloro-metano (475 mililitros) se agitó a 0°C. Se agregó di-isopropil-etil-amina (19.2 mililitros, 110.0 milimoles), seguida por la adición por goteo de una solución de cloro-metil-metil-éter (7.7 mililitros, 100.9 milimoles) en dicloro-metano (25 mililitros). La reacción se agitó a 0°C durante 1 hora, luego se calentó a temperatura ambiente, y se apagó con agua (150 mililitros). La mezcla se vertió en salmuera (150 mililitros), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se concentraron al vacío, y se pasaron por cromatografía sobre gel de sílice (330 gramos), eluyendo con un gradiente del 0 al 25 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 20.0 gramos (83 por ciento) del compuesto del título como un aceite transparente color naranja. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.07 (d, 1H, J = 8.97 Hz), 7.50 (d, 1H, J = 2.20 Hz), 7.21 (dd, 1H, J = 8.97 y 2.38 Hz), 5.34 (s, 2H), 3.39 (s, 3H). Paso B - 5-[(5-{[(metiloxi)-metil]-oxi}-2-nitro-fenil)-amino]-3-({(1R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo A una solución agitada de 5-amino-3-({(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (1.32 gramos, 3.82 milimoles) y 2-bromo-4-{[(metiloxi)-metil]-oxi}-1-nitro-benceno (1.0 gramos, 3.82 milimoles) en dioxano (20 mililitros), se le agregó tris-(dibenciliden-acetona)-dipaladio(0) (70.0 miligramos, 0.076 milimoles) y XANTPHOS (97.0 miligramos, 0.17 milimoles), seguido por carbonato de cesio (6.2 gramos, 19.0 milimoles). La mezcla se calentó a 60°C y se agitó durante 12 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc, y se filtró a través de Celite, lavando los sólidos con EtOAc y dicloro-metano. El filtrado se concentró al vacío y se pasó por cromatografía sobre gel de sílice (120 gramos), eluyendo con un gradiente del 5 al 35 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 1.64 gramos (82 por ciento) del compuesto del título como un aceite color rojo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 9.85 (s, 1H), 8.12 (d, 1H, J = 9.33 Hz), 7.90 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.74 (m, 2H), 7.53 (t, 1 H, J = 7.68 Hz), 6.84 (d, 1 H, J = 2.56 Hz), 6.73-6.68 (m, 2H), 5.77-5.72 (m, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 1.58 (d, 3H, J = 6.22 Hz); MS (ESI): 527 [M + H]+. Paso C - 5-(6-{[(metiloxi)-metil]-oxi}-1H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo A un matraz de reacción de hidrogenación de alta presión se le agregó 5-[(5-{[(metiloxi)-metil]-oxi}-2-nitro-fenil)-amino]-3-({(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (2.0 gramos, 3.8 milimoles), p-toluen-sulfonato de piridinio (95.0 miligramos, 0.38 milimoles), platino al 5 por ciento en peso sobre carbón (sulfurado) (740 miligramos, 0.19 milimoles) y orto-formato de trimetilo (40 mililitros). El matraz se purgó con un vacío de N2 (gas) (3 veces), luego con H2 (gas) / vacío (3 veces). Entonces se aplicó gas de H2 a 50 psi (3.5 kg/cm2) durante 3 horas. La mezcla de reacción entonces se filtró a través de Celite, lavando los sólidos con EtOAc y dicloro-metano. El filtrado entonces se concentró al vacío hasta obtener 1.92 gramos (100 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.49 (s, 1 H), 7.98 (d, 1H, J = 8.05 Hz), 7.79-7.66 (m, 3H), 7.53 (t, 1H, J = 7.59 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.22 (d, 1H, J = 2.20 Hz), 7.06 (dd, 1 H, J = 8.78 y 2.20 Hz) 5.97 (q, 1H, J = 6.04 Hz), 5.23 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.39 (s, 2H), 1.65 (d, 3H, J = 6.22 Hz); MS (ESI): 507 [M + H]+. Paso D - 5-(6-hidroxi-1H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo A una solución agitada de 5-(6-{[(metiloxi)-metil]-oxi}-1 H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (8.18 gramos, un lote diferente empleando un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 2, Paso C, 16.16 milimoles) en 1:1 de tetrahidrofurano/metanol (130 mililitros), se le agregó HCl 1N en agua (65 mililitros, 65.0 milimoles). La mezcla de reacción se calentó a 35°C y se agitó durante 72 horas; luego se enfrió a temperatura ambiente. La reacción se vertió en dicloro-metano (500 mililitros), y se agregó agua (100 mililitros). La mezcla se neutralizó a un pH de 7 mediante la adición de NaHC03 acuoso (saturado). La capa acuosa se extrajo entonces con dicloro-metano (1 vez) y EtOAc (1 vez). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se concentraron al vacío, y se pasaron por cromatografía sobre gel de sílice (120 gramos), eluyendo con un gradiente del 10 al 60 por ciento de EtOAc/hexano para dar 6.9 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso color salmón claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 9.62 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.00 (d, 1H, J = 7.87 Hz), 7.80-7.71 (m, 2H), 7.56-7.51 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.05 (d, 1 H, J = 2.01 Hz), 6.81 (dd, 1 H, J = 8.70 y 2.11 Hz) 5.95 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 1.64 (d, 3H, J = 6.23 Hz); MS (ESI): 463 [M + H]+. Paso E - 3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-5-(6-{[(trifluoro-metil)-sulfonil]-oxi}-1H-bencimidazol-1-il)-2-tiofen-carboxilato de metilo A una solución agitada y enfriada (0°C) de 5-(6-hidroxi-1 H-bencimidazol-1-il)-3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-ox¡)-2-tiofen-carboxilato de metilo (2.49 gramos, 5.38 milimoles) y n-fenil-trifluoro-metan-sulfonamida (2.06 gramos, 5.76 milimoles) en diclorometano (30 mililitros), se le agregó di-isopropil-etil-amina (2.0 mililitros, 11.5 milimoles). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente, y se agitó durante 12 horas. La mezcla de reacción entonces se concentró al vacío, y se pasó por cromatografía sobre gel de sílice (120 gramos), eluyendo con un gradiente del 5 al 40 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 3.12 gramos (98 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.76 (s, 1H), 8.01-7.94 (m, 2H), 7.80- 7.70 (m, 3H), 7.56-7.43 (m, 3H), 5.98 (q, 1H, J = 6.10 Hz), 3.84 (s, 3H), 1.65 (d, 3H, J = 6.22 Hz); MS (ESI): 595 [M + H] + . Paso F - 3-{(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-5-(6-vinil-1H-bencimidazol-1 -il)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una mezcla de 3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-5-(6-{[(trifluoro-metil)-sulfonil]-oxi}-1 H-bencimidazol-1 -il)-2-tiofen-carboxilato de metilo (20.69 gramos, de un lote diferente empleando un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 2, Paso E, 34.83 milimoles), vinil-trifluoro-borato de potasio (5.6 gramos, 42.10 milimoles) y trietil-amina (4.85 mililitros, 34.86 milimoles), agitada a temperatura ambiente en propanol normal (175 mililitros), se le agregó un complejo de [1 ,1 '-bis-(difenil-fosfino)- ferrocenoj-dicloro-paladio(ll) / dicloro-metano (570 miligramos, 0.70 milimoles). La mezcla se calentó entonces a reflujo, y se agitó durante 3 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua, y se extrajo con EtOAc (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se concentraron al vacío, y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 10 al 50 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 12.98 gramos (79 por ciento) del compuesto del título como un sólido espumoso amarillo claro. MS (ESI): 473 [M+H]+. Paso G - 5-[6-(1,2-dihidroxi-etil)-1H-bencimidazol-1-il]-3-{(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso C. Paso H - 5-(6-formil-1H-bencimidazol-1-il)-3-{(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso D. Paso I - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxilato de metilo El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso E. Paso J - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxamida El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso F. Ruta 3: Paso A - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo A una solución agitada del 5-[6-(cloro-metil)-1 H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-tiofen-2-carboxilato de metilo (150 miligramos, 0.30 milimoles) en dioxano (1.0 mililitros), se le agregó N-metil-piperazina (50 microlitros, 0.45 milimoles). La reacción se calentó a 60°C durante 18 horas, se enfrió a temperatura ambiente, y se concentro al vacío. El residuo se disolvió en ÉtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se concentraron al vacío, y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente del 0 al 10 por ciento de metanol/dicloro-metano, con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 134 miligramos (79 por ciento) del compuesto del título como un sólido blanco. MS (ESI): 559 [M + H]+. Paso B - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxamida El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso F. Ruta 4: Paso A - 4-[bis-(metiloxi)-metil]-2-bromo-1 -nitro-benceno Una solución de 3-bromo-4-nitro-benzaldehído (7.97 gramos, 34.6 milimoles), la cual se preparó de una manera análoga al procedimiento de la literatura (Katritzky, A. R.; Xie, L. Tetrahedron Letters 1996, 37, 347-350), orto-formato de trimetilo (11.4 mililitros, 104 milimoles), e hidrato de ácido p-toluen-sulfónico (329 miligramos, 1.73 milimoles) en metanol (69 mililitros), se puso a reflujo durante 3 horas. La reacción se apagó entonces mediante la adición de hidróxido de amonio acuoso saturado (1 mililitro), y se concentró sobre gel de sílice. La purificación mediante cromatografía en columna (del 10 al 25 por ciento de EtOAc:hexanos) proporcionó 8.76 gramos (92 por ciento) del compuesto del título como un aceite color naranja. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): d 7.89 (m, 2H), 7.59 (m, 1H), 5.47 (s, 1 H), 3.38 (s, 6H). Paso B - 5-({5-[bis-(metiloxi)-metil]-2-nitro-fenil}-amino)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo Se preparó una solución de tris-(dibenciliden-acetona)-dipaladio(O) (117 miligramos, 0.127 milimoles), 9,9-dimetil-4,5-bis-(difenil-fosfino)-xanteno (162 miligramos, 0.280 milimoles), 5-amino-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (2.31 gramos, 6.69 milimoles), 4-[bis-(metiloxi)-metil]-2-bromo-1-nitro-benceno (1.76 gramos, 6.37 milimoles), y carbonato de cesio (10.39 gramos, 31.89 milimoles) en 1 ,4-dioxano (25 mililitros), en un matraz de fondo redondo bajo N2. El matraz se evacuó y se rellenó tres veces con N2 y luego se agitó a 60°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó entonces con tetrahidrofurano (100 mililitros) y se concentró sobre gel de sílice. La purificación mediante cromatografía en columna (del 5 al 75 por ciento de EtOA:hexanos) proporcionó 2.79 gramos (81 por ciento) del compuesto del título como una espuma color rojo. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): d 9.63 (br s, 1H), 8.21 (m, 1 H), 7.94 (m, 1 H), 7.62 (m, 2H), 7.48 (s, 1 H), 7.40 (m, 1 H), 7.02 (m, 1 H), 6.47 (s, 1H), 5.73 (q, 1H, J = 6.2 Hz), 3.88 (s, 3H), 3.34 (s, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 1.72 (d, 3H, J = 6.2 Hz); MS (ESI): 541 [M + H] + . Paso C - 5-{6-[bis-(metiloxi)-metil]-1H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo A una solución deL 5-({5-[bis(metiloxi)-metil]-2-nitro-fenil}amino)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (2.71 gramos, 5.01 milimoles) en orto-formato de trimetilo (50 mililitros), en una botella Fischer-Porter, se le agregó p-toluen-sulfonato de piridinio (126 miligramos, 0.501 milimoles) y platino sulfurado sobre carbón (Pt al 5 por ciento en peso, 977 miligramos, 0.250 milimoles de Pt). La mezcla se hidrogenó en un aparato de hidrogenación Fischer-Porter a 50 psi (3.5 kg/cm2) de hidrógeno hasta que cesó la absorción de hidrógeno (17 horas). La mezcla de reacción se filtró a través de un filtro de vidrio sinterizado para remover el catalizador, lavando con dicloro-metano (75 mililitros). El eluyente se concentró para proporcionar 2.61 gramos (100 por ciento) del compuesto del título crudo como un aceite color naranja, el cual se llevó al siguiente paso sin purificación. MS (ESI): 521 [M + H] + . Paso D - 5-(6-formil-1H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo A una solución del 5-{6-[bis-(metiloxi)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo crudo (2.61 gramos, 5.01 milimoles) (del Paso C, anterior) en acetona (20 mililitros) y agua (5 mililitros), se le agregó p-toluen-sulfonato de piridinio (126 miligramos, 0.501 milimoles). La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, y luego se vertió en agua (30 mililitros) y NaHC03 acuoso saturado (30 mililitros). La mezcla se extrajo con dicloro-metano (30 mililitros, 2 veces). Las fracciones orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron sobre gel de sílice. La purificación mediante cromatografía en columna (del 30 al 100 por ciento de EtOAc:hexanos) proporcionó 1.37 gramos (58 por ciento, 2 pasos) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): d 10.06 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.96-7.88 (m, 4H), 7.72-7.61 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.84 (q, 1H, J = 6.3 Hz), 3.95 (s, 3H), 1.79 (d, 3H, J = 6.3 Hz); MS (ESI): 475 [M + H] + . Paso E - 5-{6-[(4-metil-1-piperazinil)-metil]-1 H-bencimidazol-1-il}-3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso E. Paso F - 5-{6-[(4-metil-piperazin-1 -il)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}- 3-{(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etoxi}-tiofen-2-carboxamida El compuesto del título se puede preparar mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso F. Ejemplo 4: 3-ü(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etill-oxi)-5-(6-r(4-metil-piperazin-1-il)-metill-1H-bencimidazo 1-1 -ill-tiofen -2 -carboxamida Paso A - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[(5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-2-nitro-fenil)-amino]-2-tiofen-carboxilato de metilo A una mezcla del 2,2-dimetil-propanoato de (4-nitro-3-{[(trifluoro-metil)-sulfonil]-oxi}-fenil)-metilo (1.0 gramos, 2.59 milimoles), 5-amino-3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen- carboxilato de metilo (Ejemplo del Intermediario 2) (860 miligramos, 2.75 milimoles), tris-(dibenciliden-acetona)-dipaladio(0) (70.0 miligramos, 0.076 milimoles), y XANTPHOS (90.0 miligramos, 0.16 milimoles) se le agregó tolueno (7.0 mililitros). Se inició la agitación, seguida por la adición de carbonato de cesio (2.95 gramos, 9.1 milimoles). La reacción se calentó a 60°C, y se agitó durante 30 minutos, luego se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc, y se filtró a través de Celite, lavando los sólidos con EtOAc y dicloro-metano. El filtrado se concentró al vacío y se pasó por cromatografía sobre gel de sílice (40 gramos), eluyendo con un gradiente del 5 al 15 por ciento de acetona/hexano, para dar 920 miligramos (65 por ciento) del compuesto del título como un sólido color rojo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 9.77 (s, 1H), 8.09 (d, 1H, J = 8.61 Hz), 7.63 (dd, 1 H, J = 7.69 y 1.65 Hz), 7.46-7.30 (m, 4H), 7.01 (dd, 1 H, J = 8.79 y 1.47 Hz), 6.67 (s, 1 H), 5.76-5.70 (m, 1 H), 5.09 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 1.56 (d, 3H, J = 6.23 Hz), 1.14 (s, 9H); MS (ESI): 547 [M + H] + . Paso B - 5-[(2-amino-5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-fenil)-amino]-3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo A un matraz de reacción de hidrogenación de alta presión se le agregó 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[(5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-2-nitro-fenil)-amino]-2-tiofen-carboxilato de metilo (6.5 gramos, de un lote diferente empleando un procedimiento análogo al del Ejemplo 4, Paso A, 11.9 milimoles), platino al 5 por ciento en peso sobre carbón (sulfurado) (2.2 gramos, 0.56 milimoles) y EtOAc (95 mililitros). El matraz se purgó con un vacío de N2 (gas) (3 veces), y luego con un vacío de H2 (gas) (3 veces). Entonces se aplicó gas de hidrógeno a 50 psi (3.5 kg/cm2) durante 3 horas. La mezcla de reacción entonces se filtró a través de Celite, lavando los sólidos con EtOAc y dicloro-metano. El filtrado entonces se concentró al vacío para dar 5.46 gramos (89 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo. MS (ESI): 517 [M + H] + . Paso C - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-(6-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-1H-bencimidazol-1-il)-2-tiofen-carboxilato de metilo Una mezcla agitada de 5-[(2-amino-5-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-fenil)-amino]-3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo (5.45 gramos, 10.5 milimoles), p-toluen-sulfonato de piridinio (265 miligramos, 1.0 milimoles), y orto-formato de trietilo (15 mililitros), se calentó a 40°C durante 1 hora, y luego se enfrió a temperatura ambiente. Toda la mezcla se vertió sobre un cartucho de gel de sílice (25 gramos), y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (120 gramos), eluyendo con el 100 por ciento de hexanos durante 10 minutos, y luego un gradiente del 0 al 10 por ciento de EtOAc/hexano, para dar 4.71 gramos (85 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo. MS (ESI): 527 [M + H] + . Paso D - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-(hidroxi-metil)-1H-bencimidazol-1-il]-2-tiofen-carboxilato de metilo El compuesto del título se preparó a partir del 3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-(6-{[(2,2-dimetil-propanoil)-oxi]-metil}-1H-bencimidazol-1 -il)-2-tiofen-carboxilato de metilo, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso G. MS (ESI): 443 [M + H] + . Paso E - 5-[6-(cloro-metil)-1H-bencimidazol-1-il]-3.{[(1 )-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo El compuesto del título se preparó a partir del 3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-(hidroxi-metil)-1 H-bencimidazol-1 -il]-2-tiofen-carboxilato de metilo, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 1, Ruta 1, Paso H. MS (ESI): 461 [M + H]+. Paso F - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(4-metil-piperazin-1 -il)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}-tiofen-2-carboxilato de metilo A una mezcla agitada del 5-[6-(cloro-metil)-1 H-bencimidazol-1 -il]-3-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo (150 miligramos, 0.32 milimoles) en dioxano (1.5 mililitros), se le agregó n-metil-piperazina (55 microlitros, 0.49 milimoles) y trietilamina (136 microlitros, 0.97 milimoles). La reacción se calentó entonces a 45°C durante 18 horas, se enfrió a temperatura ambiente, y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc (125 mililitros) y agua (50 mililitros). La capa acuosa se extrajo entonces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se concentraron al vacío, y se pasaron por cromatografía sobre gel de sílice (4 gramos), eluyendo con un gradiente del 0 al 10 por ciento de metanol/dicloro-metano, con hidróxido de amonio al 1 por ciento, para dar 123 miligramos (72 por ciento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. MS (ESI): 525 [M + H]+.

Paso G - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(4-metil-piperazin-1 -il)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}-tiofen-2-carboxamida El compuesto del título se preparó a partir del 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(4-metil-piperazin-1-il)-metil]-1 H-bencimidazol-1 -il}-tiofen-2-carboxilato de metilo, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo 3, Ruta 1, Paso F. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.52 (s, 1H), 7.83 (s, 1 H), 7.69 (d, 2H, J = 8.24 Hz), 7.51-7.34 (m, 4H), 7.28 (d, 1H, J = 8.24 Hz), 7.16-7.11 (m, 2H), 5.98 (q, 1H, J = 6.35 Hz), 3.55 (s, 2H), 2.42-2.22 (m, 8H), 2.13 (s, 3H), 1.72 (d, 3H, J = 6.23 Hz); MS (ESI): 510 [M + H]+.

Ejemplo del Intermediario 4: 3-{f(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etill-ox¡)-5- (6-hidroxi-1 H-bencimidazol-1 -il)-2-tiofen-carboxilato de metilo Paso A - 2-bromo-4-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-1 -nitro-benceno El 2-bromo-4-fluoro-1-nitro-benceno (20.0 gramos, 90.9 milimoles) y alcohol 4-metoxi-bencílico (22.7 mililitros, 182 milimoles) se disolvieron en dicloro-metano (400 mililitros) con agitación. Se agregó una solución de hidróxido de sodio 1 N (400 mililitros), seguida por sulfato ácido de tetrabutil-amonio (3.09 gramos, 9.10 milimoles). La reacción se agitó durante 8 horas y se vertió en un embudo de separación. Las capas se separaron, y la acuosa se extrajo una vez con dicloro-metano y una vez con dietiléter. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS0 , se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 28.01 gramos (91 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.03 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 7.50 (d, 1H, J = 2.6 Hz), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.17 (dd, 1H, J = 2.7, 9.0 Hz), 6.95-6.91 (m, 2H), 5.14 (s, 2H), 3.73 (s, 3H). Paso B - 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{[5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-2-nitro-fenil]-amino}-2-tiofen-carboxilato de metilo El 2-bromo-4-({[4-(metiloxi)-f en il]-metil}-oxi)-1 -nitro- benceno (20.19 gramos, 59.7 milimoles) y 5-amino-3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)- etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo (18.60 gramos, 59.7 milimoles) se disolvieron en 1,4-dioxano (500 mililitros) con agitación en un matraz equipado con un agitador mecánico, condensador de reflujo, y termómetro. La solución se desgasificó durante 75 minutos burbujeando nitrógeno a través de la solución en agitación. Se agregaron 9,9-dimetil-4,5-bis-(difenil-fosfino)-xanteno (1.52 gramos, 2.63 milimoles), carbonato de cesio (97.26 gramos, 299 milimoles), y tris-(dibenciliden-acetona)-dipaladio(0) (1.09 gramos, 1.19 milimoles). La reacción se calentó a 60°C, y se agitó durante 16 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se filtró a través de Celite. El sólido se lavó con metanol al 20 por ciento en dicloro-metano. El filtrado se concentró sobre aproximadamente 200 gramos de gel de sílice. El sólido se colocó en un embudo fritado y se lavó con EtOAc al 10 por ciento en dicloro-metano. El filtrado se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 27.18 gramos (80 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.87 (s, 1H), 8.10 (d, 1 H, J = 9.5 Hz), 7.63 (m, 1 H), 7.39-7.29 (m, 4H), 7.23 (m, 1H), 6.96- 6.90 (m, 2H), 6.80 (d, 1 H, J = 2.6 Hz), 6.75 (s, 1 H), 6.69 (dd, 1 H, J = 2.6, 9.3 Hz), 5.75 (q, 1 H, J = 6.3 Hz), 5.03 (AB, 2H, JAB = 13.2 Hz, JAB = 11.3 Hz), 3.74 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 1.55 (d, 3H, J = 6.4 Hz). Paso C - 5-{[2-amino-5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-fenil}-amino}-3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{[5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-2-nitro-fenil]-amino}-2-tiofen-carboxilato de metilo (27.18 gramos, 47.8 milimoles) se disolvió en EtOAc (400 mililitros) con agitación. Se agregó platino sulfurado (al 5 por ciento en peso sobre carbón, 2.80 gramos), y la reacción se puso bajo una atmósfera de H2 utilizando un aparato de globo. Después de 36 horas, se agregó una cantidad adicional de catalizador (2.80 gramos), y se continuó la agitación bajo 1 atmósfera de hidrógeno. Después de 16 horas más, la reacción se filtró a través de un cojín de Celite, lavando con EtOAc. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título, el cual se llevó inmediatamente al siguiente paso. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.66 (br s, 1 H), 7.56 (dd, 1 H, J = 1.7, 7.8 Hz), 7.41-7.09 (m, 5H), 6.93-6.88 (m, 2H), 6.71 (d, 1 H, J = 2.8 Hz), 6.65 (d, 1 H, J = 8.6 Hz), 6.57 (dd, 1H, J = 2.7, 8.6 Hz), 5.87 (s, 1 H), 5.62 (q, 1 H, J = 6.4 Hz), 4.82 (s, 2H)? 4.46 (br s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 1.52 (d, 3H, J = 6.2 Hz).

Paso D - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-1 H-bencimidazol-1-il]-2-tiofen-carboxilato de metilo El 5-{[2-amino-5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-fenil]-amino}-3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-2-tiofen-carboxilato de metilo se disolvió en orto-formato de trimetilo (100 mililitros) y dietil-éter (100 mililitros) con agitación. Se agregó p-toluen-sulfonato de piridinio (0.601 gramos, 2.39 milimoles) en una sola porción. La reacción se agitó durante 2.5 horas, y se apagó mediante la adición de trietilamina (aproximadamente 3 mililitros). La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea para proporcionar 25.45 gramos (97 por ciento en 2 pasos) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.47 (s, 1H), 7.71 (dd, 1H, J = 1.6, 8.2 Hz), 7.63 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 7.43-7.08 (m, 7H), 7.00 (dd, 1H, J = 2.4, 8.8 Hz), 6.96-6.90 (m, 2H), 5.97 (q, 1H, J = 6.4 Hz), 5.03 (AB, 2H, JAB = 17.1 Hz, JAB = 11.3 Hz), 3.80 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 1.60 (d, 3H, J = 6.4 Hz). Paso E - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-(6-hidroxi-1H-bencimidazol-1-il)-2-tiofen-carboxilato de metilo El 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-2-tiofen-carboxilato de metilo (25.45 gramos, 46.4 milimoles) se disolvió en dicloro-metano (120 mililitros) y se enfrió a 0°C con agitación. Se agregó por goteo ácido trifluoroacético (40.0 mililitros, 519 milimoles) por medio de un embudo de adición. La reacción se agitó durante 1 hora, y se agregó por goteo hidróxido de sodio (20.0 gramos, 500 milimoles) en agua (120 mililitros) por medio de un embudo de adición. El pH de la mezcla se ajustó entonces hasta neutro con una solución saturada de NaHC03. La reacción se vertió en un embudo de separación, y las capas se separaron. La capa acuosa se lavó con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 14.86 gramos (75 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.62 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.74 (dd, 1H, J = 1.7, 7.7 Hz), 7.53 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.46-7.38 (m, 3H), 7.32 (m, 1H), 7.08 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.79 (dd, 1H, J = 2.2, 8.6 Hz), 5.94 (q, 1H, J = 6.2 Hz), 3.79 (s, 3H), 1.60 (d, 3H, J = 6.2 Hz). Ejemplo del Intermediario 5: 5-(6-hidroxi-1H-bencimidazol-1-il)- 3-(((1 R)-1-r2-(trifluoro-metil)-fenill-etil)-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo Paso A - 5-{[5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-2-nitro-fenil]-amino}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo El compuesto del título se preparó a partir del 5-amino-3-({(1 R)-1 -[2-(t rif luoro- metil) -fenil] -etil }-oxi)-2-tiofen-carbox i lato de metilo y 2-bromo-4-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-1 -nitro-benceno, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo del Intermediario 4, Paso B. MS (ESI): 603 [M + H] + . Paso B - 5-{[2-amino-5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-fenil]-amino}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo El compuesto del título se preparó a partir del 5-{[5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-2-nitro-fenil]-amino}-3-({{1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo, mediante un procedimiento análogo al del Ejemplo del Intermediario 4, Paso C. MS (ESI): 573 [M + H]+.

Paso C - 5-(6-hidroxi-1 H-bencimidazol-1 -il)-3-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo El 5-{[2-amino-5-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-fenil]-amino}-3-({(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (11 gramos, 19.19 milimoles) se disolvió en 100 mililitros de orto-formato de trimetilo con agitación. Se agregó p-toluen-sulfonato de piridinio (0.502 gramos, 1.91 milimoles) en una sola porción. La reacción se agitó durante 2.5 horas. La mezcla se concentró el 5-[6-({[4-(metiloxi)-fenil]-metil}-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo crudo se disolvió en cloroformo (75 mililitros), y se enfrió a 0°C con agitación. Se agregó ácido trifluoro-acético (50.0 mililitros, 649 milimoles). La reacción se agitó durante 1 hora y se dejó llegar hasta la temperatura ambiente. La mezcla se concentró mientras se enfriaba para remover la mayor parte del ácido trifluoro-acético. La mezcla se disolvió en cloroformo (200 mililitros). La reacción se vertió en un embudo de separación, y las capas se separaron. El pH de la mezcla se ajustó entonces hasta neutro con una solución saturada de NaHC03. La capa acuosa se lavó con cloroformo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 8.16 gramos (92 por ciento en 2 pasos) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 7.88 (d, 1 H, J = 7.87 Hz), 7.83 (s, 1 H), 7.66-7.55 (m, 3H), 7.40 (t, 1H, J = 7.7 Hz), 6.92 (d, 1H, J - 2.2 Hz), 6.85 (dd, 1 H, J = 2.3, 8.7 Hz), 5.78 (q, 1 H, J = 6.23 Hz), 5.47 (s, 1 H), 3.91 (s, 3H), 1.75 (d, 3H, J = 6.23 Hz); MS (ESI): 463 [M + H] + . Ejemplo 5: 5-r6-(4-piperidinil-oxi)-1 H-bencimidazol-1-ill-3- (((1 R)-1-í2-(trifluoro-metil)-fenill-etil)-oxi)-2-t¡ofen-carboxamida Paso A - 4-({1-[5-[(metiloxi)-carbonil]-4-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tienil]-1H-bencimidazol-6-il}-oxi)-1-piperidin-carboxilato de 1 ,1-dimetil-etilo El 5-(6-hidroxi-1H-bencimidazol-1-il)-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.478 gramos, 1.03 milimoles), carbonato de cesio (0.470 gramos, 1.44 milimoles), y terbutil-éster del ácido 4-(toluen-4-sulfonil-oxi)-piperidin-1 - 10 carboxílico (0.439 gramos, 1.24 milimoles) se combinaron en 10 mililitros de N,N-dimetil-formamida, y se calentaron a 60°C con agitación. La reacción se calentó durante 36 horas y se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en EtOAc y agua, y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera, y las capas acuosas combinadas se extrajeron con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.482 gramos (72 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8.43 (s, 1H), 7.95 (dd, J = 7.7 Hz, 1H), 7.78-7.66 (m, 2H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.29 (s, 1 H), 7.09 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.01 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H), 5.97 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 4.59 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.65-3.56 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 2H), 1.91-1.82 (m, 2H), 1.63 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.59-1.49 (m, 2H), 1.38 (s, 9H). MS m/z 646 (M + 1). Paso B - 5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo El 4-({1-[5-[(metiloxi)-carbonil]-4-({(1 R)-1 -[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tienil]-1H-bencimidazol-6-il}-oxi)-1-piperidin-carboxilato de 1 ,1 -dimetil-etilo (1.84 gramos, de un lote diferente empleando un procedimiento análogo al del Ejemplo 5, Paso A, 2.85 milimoles) se disolvió en 30 mililitros de dicloro-metano con agitación, y se enfrió a 0°C. Se agregó por goteo ácido trifluoroacético (10.0 mililitros, 130 milimoles) por medio de un embudo de adición. La reacción se agitó durante 1 hora, y se agregó por goteo una solución de hidróxido de sodio 2 N (60 mililitros) por medio de un embudo de adición. Se utilizó una solución acuosa saturada de NaHC03 para ajustar el pH hasta básico. La mezcla se vertió en un embudo de separación, y las capas se separaron. La capa acuosa se lavó una vez con dicloro-metano y una vez con dietil-éter. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 1.37 gramos (88 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.42 (s, 1 H), 7.95 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.78-7.67 (m, 2H), 7.61 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 7.61 (m, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 7.05 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 6.97 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1 H), 5.96 (q, J = 6.1 Hz, 1 H), 4.41 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.97-2.88 (m, 2H), 2.59-2.49 (m, 2H), 1.92-1.83 (m, 2H), 1.63 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.51-1.38 (m, 2H). MS m/z 546 (M + 1). Paso C - 5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxamida El 5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.154 gramos, 0.282 milimoles) se disolvió en amoníaco 7 N en metanol (12.0 mililitros, 84.0 milimoles) en un tubo sellado, y se calentó a 80°C durante 2 días. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.129 gramos (86 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.34 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.81 (br s, 1 H), 7.78-7.70 (m, 2H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.53 (m, 1H), 7.12 (br s, 1 H), 7.03 (s, 1 H), 7.00-6.93 (m, 2H), 5.94 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 4.44 (m, 1 H), 3.03-2.94 (m, 2H), 2.70-2.61 (m, 2H), 1.96-1.86 (m, 2H), 1.72 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.59-1.46 (m, 2H). MS m/z 531 (M + 1).

Ejemplo 6: 3-(í(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etilloxi)-5-r6-(4-piperidinil-oxi)-1 H-bencimidazol-1 -ill-2-tiofen-carboxamida Paso A - 4-[(1-{4-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[(metiloxi)-carbonil]-2-tienil}-1 H-bencimidazol-6-il)oxi]-1-piperidin-carboxilato de 1,1-dimetil-etilo 13 El 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-(6-hidroxi-1H-bencimidazol-1 -il)-2-tiofen-carboxilato de metilo (2.00 gramos, 4.66 milimoles), trifenil-fosfina (4.89 gramos, 18.6 milimoles), y 4-hidroxi-1 -piperidin-carboxilato de terbutilo (1.88 gramos, 9.34 milimoles), se disolvieron en dicloro-metano (50 mililitros) con agitación, y se enfriaron a 10°C. Se agregó por goteo azo-dicarboxilato de di-isopropilo (1.84 mililitros, 9.35 milimoles) mediante una jeringa. La reacción se agitó durante 5 minutos, y se dejó calentar a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 4 horas, y se adsorbió sobre gel de sílice. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó el compuesto del título junto con pequeñas cantidades de impurezas. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.47 (s, 1 H), 7.70 (dd, 1 H, J = 1.6, 7.7 Hz), 7.64 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.44-7.37 (m, 2H), 7.34 (S, 1H), 7.31 (m, 1H), 7.15 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.01 (dd, 1H, J = 2.2, 8.8 Hz), 5.97 (q, 1H, J = 6.2 Hz), 4.59 (m, 1 H), 3.80 (s, 3H), 3.65-3.56 (m, 2H), 3.27-3.14 (m, 2H), 1.92-1.81 (m, 2H), 1.60 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 1.60-1.47 (m, 2H), 1.38 (s, 9H); MS (ESI): 612 [M + H]+. Paso B - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1 H-bencimidazol-1 -il]-2-tiofen-carboxilato de metilo El 4-[(1-{4-{[(1 R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[(metiloxi)-carbonil]-2-tienil}-1 H-bencimidazol-6-il)-oxi]-1 -piperidin-carboxilato de 1 ,1 -dimetil-etilo se disolvió en dicloro-metano (60 mililitros), y se enfrió a 0°C. Se agregó por goteo ácido trifluoro-acético (15.0 mililitros, 195 milimoles) por medio de un embudo de adición. La reacción se agitó durante 1.5 horas, y se agregó por goteo una solución de hidróxido de sodio 2N (88 mililitros) por medio de un embudo de adición. Se utilizó una solución acuosa saturada de NaHC03 para ajustar el pH a aproximadamente 8. La mezcla se vertió en un embudo de separación, y las capas se separaron. La capa acuosa se lavó con dicloro-metano (3 veces) y EtOAc (1 vez). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 1.95 gramos (82 por ciento en 2 pasos) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.46 (s, 1 H), 7.71 (dd, 1 H, J = 1.7, 7.7 Hz), 7.62 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 7.46-7.38 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.32 (m, 1 H), 7.09 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.97 (dd, 1 H, J = 2.2, 8.8 Hz), 5.97 (q, 1 H, J = 6.2 Hz), 4.42 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.96-2.88 (m, 2H), 2.58-2.49 (m, 2H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.60 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 1.51-1.39 (m, 2H); MS (ESI): 512 [M + 1] + .

Paso C - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1 H -bencimidazol-1-il]-2-tiofen-carboxamida El 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1 -il]-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.150 gramos, 0.293 milimoles) se disolvió en amoníaco 7 N en metanol (12.0 mililitros, 84.0 milimoles) en un tubo sellado, y se calentó a 80°C durante 48 horas. La solución se concentró y se volvió a cargar con amoníaco 7N en metanol fresco (12.0 mililitros, 84.0 milimoles), y se calentó a 110°C durante 72 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.126 gramos (87 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.38 (s, 1H), 7.79 (br s, 1 H), 7.66 (dd, 1 H, J = 1.6, 7.7 Hz, 1 H), 7.61 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 7.45 (dd, 1 H, J = 1.3, 7.8 Hz), 7.40 (m, 1H), 7.84 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.11 (br s, 1H), 7.01 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.96 (dd, 1 H, J = 2.3, 8.7 Hz), 5.98 (q, 1H, J = 6.2 Hz), 4.41 (m, 1H), 2.98-2.89 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 2H), 1.94-1.84 (m, 2H), 1.70 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 1.54-1.40 (m, 2H); MS (ESI): 497 [M + H] + . Ejemplo 7: 5-(6-í(1 -metil-4-piperidinil)oxil-1 H-bencimidazol-1 -il)-3-(((1R)-1 -T2-(t rif I uo ro- metil) -fe ni II -et i I) -oxi) -2 -tiof en -carboxamida Paso A - 5-{6-[(1 -metil-4-piperidinil)-oxi]-1 H-bencimidazol-1 -il}-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo El 5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1-il]-3-({(1R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.200 gramos, 0.367 milimoles) se disolvió en dicloro-metano (4 mililitros) y metanol (2 mililitros). Se agregaron ácido acético (0.025 mililitros, 0.44 milimoles) y formaldehído (0.055 mililitros, al 37 por ciento en agua, 0.74 milimoles) mediante una jeringa. Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (0.117 gramos, 0.552 milimoles) en una sola porción. La reacción se agitó durante 1 hora y se apagó con una solución saturada de NaHC03. La mezcla se vertió en dicloro-metano y NaHC03 acuoso medio-saturado. Las capas se separaron, y la capa acuosa se lavó con dicloro-metano (3 veces) y EtOAc (1 vez). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS0 , se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.150 gramos 17 (73 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.43 (s, 1H), 7.96 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.78-7.68 (m, 2H), 7.62 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 7.51 (m, 1 H), 7.32 (s, 1H), 7.06 (br s, 1H), 6.98 (m, 1H), 5.97 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 4.41 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.52-2.43 (m, 2H), 2.27-2.11 (m, 2H), 1.98-1.85 (m, 2H), 1.73-1.60 (m, 2H), 1.62 (d, J = 6.0 Hz, 3H).

MS (ESI): 560 [M + H] + . Paso B - 5-{6-[(1 -metil-4-piperidinil)-oxi]-1 H-bencimidazol-1 -il}-3- ({(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxamida El 5-{6-[(1-metil-4-piperidinil)-oxi]-1 H-bencimidazol-1 - i I > -3- ({(1 R)-1-[2-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-oxi)-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.148 gramos, 0.264 milimoles) se disolvió en amoníaco 7N en metanol (12.0 mililitros, 84.0 milimoles) en un tubo sellado, y se calentó a 80°C durante 24 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.138 gramos (96 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.35 (s, 1 H), 7.92 (d, J = 11 Hz, 1 H), 7.82 (br s, 1 H), 7.80-7.71 (m, 2H), 7.64-7.51 (m, 2H), 7.12 (br s, 1 H), 7.06 (s, 1 H), 6.99-6.94 (m, 2H), 5.95 (q, J = 6.2 Hz, 1 H), 4.36 (m, 1 H), 2.64-2.53 (m, 2H), 2.23-2.11 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.94- 1.84 (m, 2H), 1.73 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.71-1.57 (m, 2H). MS (ESI): 545 [M + H] + . Ejemplo 8: 3-ü(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etill-oxi)-5-(6-r(1 -metil-4-piperidinil)-oxi1-1 H-bencimidazol-1 -il)-2-tiofen-carboxamida Paso A - 3-{[(1 R)-1 -(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(1 -metil-4-piperidinil)-oxi]-1 H -bencimidazol-1-il}-2-tiofen-carboxilato de metilo El 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-[6-(4-piperidinil-oxi)-1H-bencimidazol-1 -il]-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.260 gramos, 0.508 milimoles) se disolvió en dicloro-metano (4 mililitros) y metanol (2 mililitros). Se agregaron ácido acético (0.035 mililitros, 0.61 milimoles) y formaldehído (0.076 mililitros, al 37 por ciento en agua, 1.0 milimoles) mediante una jeringa. Se agregó triacetoxi-borohidruro de sodio (0.161 gramos, 0.760 milimoles) en una sola porción. La reacción se agitó durante 2 horas y se vertió en dicloro-metano y NaHC03 acuoso medio-saturado. Las capas se separaron, y la capa acuosa se lavó con dicloro-metano y EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.215 gramos (80 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.48 (s, 1H), 7.73 (dd, 1H, J = 1.8, 7.7 Hz), 7.63 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.38 (s, 1 H), 7.34 (m, 1H), 7.12 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.99 (dd, 1H, J = 2.2, 8.8 Hz), 5.98 (q, 1H, J = 6.2 Hz), 4.41 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.65-2.54 (m, 2H), 2.24-2.13 (m, 2H), 2.17 (S, 3H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.72-1.61 (m, 2H), 1.62 (d, 3H, J = 6.2 Hz); MS (ESI): 526 [M + H]+. Paso B - 3-{[(1R)-1-(2-cloro-fenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(1-metil-4-piperidinil)-oxi]-1H-bencimidazol-1-il}-2-tiofen-carboxamida El 3-{[(1R)-1-(2-clorofenil)-etil]-oxi}-5-{6-[(1-metil-4-piperidinil)-oxi]-1 H-bencimidazol-1 -il}-2-tiofen-carboxilato de metilo (0.214 gramos, 0.407 milimoles) se disolvió en amoníaco 7N en metanol (12.0 mililitros, 84.0 milimoles) en un tubo sellado, y se calentó a 80°C durante 2.5 días. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea proporcionó 0.208 gramos (100 por ciento) del compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): d 8.39 (s, 1 H), 7.80 (br s, 1 H), 7.67 (dd, 1 H, J = 1.5, 7.6 Hz), 7.62 (d, 1 H, J = 8.6 Hz), 7.45 (m, 1 H), 7.41 (m, 1 H), 7.34 (m, 1 H), 7.13 (s, 1 H), 7.11 (br s, 1 H), 7.02 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 6.97 (dd, 1 H, J = 2.2, 8.8 Hz), 5.99 (q, 1 H, J = 6.2 Hz), 4.37 (m, 1 H), 2.63-2.53 (m, 2H), 2.22-2.14 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.95-1.86 (m, 2H), 1.71 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 1.70-1.59 (m, 2H); MS (ESI): 511 [M + H] + . Ejemplos Comparativos Los Ejemplos Comparativos Números 121, 126, 127, 136 y 143 se pueden preparar empleando los métodos conocidos en la técnica, incluyendo aquéllos descritos en La Publicación del TCP Número WO2004/014899 a SmithKIine Beecham Corp.

Ejemplos Biológicos I. Ensayo para la inhibición de PLK1 A. Preparación del dominio de cinasa PLK marcado con His N-terminal 6x. El dominio de cinasa PLK marcado con His N-terminal 6x (aminoácidos 21-346 precedidos por MKKGHHHHHHD) SEQ ID NO: 1 se preparó a partir de células T.ni infectadas por baculovirus bajo el control del promotor de polihedrina. Todos los procedimientos se llevaron a cabo a 4°C. Las células se usaron en HEPES 50 mM, NaCI 200 mM, imidazol 50 mM, glicerol al 5 por ciento; pH de 7.5. El homogenato se centrifugó a 14,000 revoluciones por minuto en un rotor SLA-1500 durante 1 hora, y el sobrenadante se filtró a través de un filtro de 1.2 mieras. El sobrenadante se cargó sobre una columna de Sepharose quelante de Níquel (Amersham Pharmacia), y se lavó con regulador de lisis. La proteína se eluyó empleando pasos del 20 por ciento, del 30 por ciento, y del 100 por ciento del regulador B, en donde el regulador B es HEPES 50 mM, NaCI 200 mM, imidazol 300 mM, glicerol al 5 por ciento; pH de 7.5. Las fracciones que contenían PLK se determinaron mediante SDS-PAGE. Las fracciones que contenían PLK se diluyeron cinco veces con HEPES 50 mM, DTT 1 mM, glicerol al 5 por ciento; pH de 7.5, y luego se cargaron sobre una columna de SP Sepharose (Amersham Pharmacia). Después de lavar la columna con HEPES 50 mM, DTT 1mM, glicerol al 5 por ciento; pH de 7.5, la PLK se eluyó por pasos con HEPES 50 mM, DTT 1 mM, NaCI 500 mM; glicerol al 5 por ciento; pH de 7.5. La PLK se concentró utilizando una membrana de corte de un peso molecular de 10 kDa, y luego se cargó sobre una columna de filtración de gel Superdex 200 (Amersham Pharmacia) equilibrada en HEPES 25 mM, DTT 1 mM, NaCI 500 mM, glicerol al 5 por ciento; pH de 7.5. Las fracciones que contenían la PLK se determinaron mediante SDS-PAGE. La PLK se reservó, se puso en alícuotas, y se almacenó a -80°C. Las muestras pasaron por control de calidad utilizando espectrometría de masas, secuenciación N-terminal, y análisis de aminoácidos. B. La actividad enzimática +/- inhibidores se determinó como sigue: Todas las mediciones se obtuvieron bajo condiciones en donde la producción de señal aumentó linealmente con el tiempo y la enzima. Los compuestos de prueba se agregaron a placas de ensayo blancas de 384 pozos (0.1 microlitros para ensayos de 10 microlitros y algunos de 20 microlitros, 1 microlitro para algunos ensayos de 20 microlitros) en concentraciones variables conocidas en sulfóxido de dimetilo al 100 por ciento. Se utilizaron sulfóxido de dimetilo (1 al 5 por ciento final, como fue apropiado) y EDTA (65 mM en la reacción) como controles. La Mezcla de Reacción se preparó como sigue a 22°C: HEPES 25 mM, pH de a7.2 MgCI215 mM ATP 1 µM 0.05 µCi/pozo de 33P-? ATP (10 Ci/milimol) Péptido de sustrato 1 µM (Biotina-Ahx-SFNDTLDFD) SEQ ID NO: 2 0.15 mg/ml de albúmina de suero bovino DTT 1 mM Dominio de cinasa PLK1 2 nM (se agregó al final) La Mezcla de Reacción (10 ó 20 microlitros) se agregó rápidamente a cada pozo inmediatamente en seguida de la adición de la enzima, por medio de manipuladores de líquidos automatizados, y se incubó durante 1-1.5 horas a 22°C. Las reacciones enzimáticas de 20 microlitros se detuvieron con 50 microlitros de mezcla de paro (EDTA 50 mM, 4.0 miligramos/mililitro de perlas SPA de Estreptavidina en suero regulado con fosfato de Dulbecco Estándar (sin Mg2+ ni Ca2+), ATP 50 µM) por pozo. Las reacciones de 10 microlitros se detuvieron con 10 microlitros de mezcla de paro (EDTA 50 mM, 3.0 miligramos/mililitro de Perlas de Imágenes SPA acopladas con Estreptavidina ("LeadSeeker") en suero regulado con fosfato de Dulbecco Estándar (sin Mg2+ ni Ca2+), ATP 50 µM) por pozo. Las placas se sellaron con sellos de plástico transparentes, se centrifugaron a 500 x g durante 1 minuto, o se dejaron asentar durante la noche, y se contaron en un Packard TopCount durante 30 segundos/pozo (SPA regular), o se tomaron imágenes utilizando un tomador de imágenes Viewlux (LeadSeeker SPA). La señal arriba del fondo (controles de EDTA) se convirtió hasta el porcentaje de inhibición en relación con el obtenido en los pozos de control (solamente con sulfóxido de dimetilo).

C. Resultados. Los datos se reportan en la Tabla 1 que se encuentra más adelante. En la Tabla 1, + = plC50 <6; ++ = plC50 6-8; +++ = plC50 >8. II. Ensayo de Inhibición del Crecimiento con Azul de Metileno -Inhibición de proliferación celular mediante los inhibidores de PLK1 Hablando en términos generales, las líneas celulares que crecen exponencialmente de diferentes orígenes tumorales, cultivadas en medios apropiados, conteniendo suero bovino fetal al 10 por ciento a 37°C en una incubadora con C02 al 5 por ciento, se aplicaron a una baja densidad (menos de 2,000 células/pozo) en placas de 96 pozos. Veinticuatro horas después de la aplicación, las células se trataron con diferentes concentraciones de los compuestos de prueba, en el intervalo de 10 µM a 0.04 nM. Varios pozos se dejaron sin tratamiento como un control. Setenta y dos horas después del tratamiento, se determinaron los números de células utilizando 100 microlitros por pozo de azul de metileno (Sigma M9140) (al 0.5 por ciento en 50:50 de etanol.agua). El teñido se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de enjuagar las placas, y el tinte se solubilizó en N-lauroil-sarcosina al 1 por ciento, sal de sodio (Sigma L5125, en suero regulado con fosfato) (más adelante se describen mayores detalles de un ensayo de azul de metileno). Las placas se leyeron en un lector de microplacas, midiendo la OD a 620 nanómetros. El porcentaje de inhibición del crecimiento celular se expresó como porcentaje de proliferación en relación con una proliferación del 100 por ciento (control). La concentración del compuesto de prueba que inhibió el 50 por ciento del crecimiento celular (IC50) se determinó mediante un ajuste de datos de 4 parámetros utilizando XLfit (el valor del control sin células se sustrajo de todas las muestras para el fondo). Los datos se muestran en la Tabla 1 más adelante, y representan una compilación de varios experimentos diferentes, cada uno llevado a cabo utilizando los parámetros generales ilustrados anteriormente, aunque se pueden haber empleado variaciones menores en algunos casos. En un ensayo, s cultivaron líneas celulares tumorales de fibroblastos de prepucio humano normal (HFF), de colon humano (HCT116, RKO), de pulmón (H460, A549) y de mama (MCF7), en DMEM alto en glucosa (Life Technologies) conteniendo suero bovino fetal al 10 por ciento (FBS) a 37°C en una incubadora humidificada con C02 al 5 por ciento y aire al 95 por ciento. Las células se cosecharon utilizando tripsina/EDTA, se contaron utilizando un hemocitómetro, y se aplicaron en 100 microlitros de medio de cultivo por pozo, en las siguientes densidades, en una placa de cultivo de tejido de 96 pozos (Falcon 3075): 5,000 células HFF/pozo, 3,000 células HCT116/pozo, 2,500 células RKO/pozo, 2,500 células H460/pozo, 5,000 células A549/pozo, 4,000 células MCF7/pozo. Al día siguiente, los compuestos se diluyeron en DMEM bajo en glucosa conteniendo 100 microgramos/mililitro de gentamicina, al doble de la concentración final requerida, a partir de soluciones de suministro 10 mM en sulfóxido de dimetilo. Se agregaron 100 microlitros/pozo de estas diluciones a los 100 microlitros del medio actualmente en las placas de ensayo. Se agregó un medio conteniendo sulfóxido de dimetilo al 0.6 por ciento a los pozos de control. La concentración final de sulfóxido de dimetilo en todos los pozos fue del 0.3 por ciento. Las células se incubaron a 37°C, con C02 al 5 por ciento durante 72 horas. El medio se removió mediante aspiración. La biomasa celular se estimó tiñendo las células con 80 microlitros por pozo de azul de metileno (Sigma M9140, al 0.5 por ciento en 50:50 de etanohagua), y con incubación a temperatura ambiente durante 30 a 60 minutos. El teñido se removió mediante aspiración, y las placas se enjuagaron mediante inmersión en agua, y luego se secaron al aire. Para liberar el teñido de las células, se agregaron 100 microlitros de solución de solubilización (N-lauroil-sarcosina al 1 por ciento, sal de sodio, Sigma L5125, en suero regulado con fosfato), y las placas se agitaron suavemente durante aproximadamente 30 minutos. La densidad óptica a 620 nanómetros se midió en un lector de microplacas. El porcentaje de inhibición del crecimiento celular se calculó en relación con los pozos de control tratados con vehículo. La concentración del compuesto que inhibe el 50 por ciento del crecimiento celular (IC50) se interpoló utilizando regresión no lineal (Levenberg-Marquardt) y la ecuación, y = Vmax*(1- (x/(K+x))) + Y2, en donde "K" fue igual a la IC5o- Los datos se reportan en la Tabla 1 más adelante. En la Tabla 1, + = IC50 >1 µM; ++ = IC500.1 -1 µM: +++ = IC50 <0.1 µM.

III. Determinación del enlace de proteína con las proteínas de plasma humanas, utilizando diálisis en equilibrio Placa de 96 Pozos (Diálisis de Alta Producción): Las soluciones de suministro de los compuestos se salpicaron en plasma humano a una concentración objetivo de 2,000 nanogramos/mililitro. La mezcla se invirtió suavemente varias veces para asegurar la homogeneidad, y se recolectaron alícuotas de 50 microlitros por triplicado para verificar las concentraciones iniciales. En seguida del ensamble de la placa de diálisis (tiras de membrana de diálisis HT, límite de corte de peso molecular de 12,000 a 14,000 dáltones), se colocó el plasma salpicado (150 microlitros) en el compartimiento del donador del pozo, y se colocó suero regulado con fosfato, pH de 7.4 (150 microlitros) en el compartimiento del receptor. Se establecieron ocho pozos por tipo de compuesto y plasma. La placa se colocó en una incubadora a 37°C sobre un agitador de placas. En seguida del período de incubación de 6 horas, se removió la placa. Se analizaron alícuotas individuales de 50 microlitros de cada compartimiento de donador y receptor (por pozo). El análisis de muestras se hizo mediante LC/MS/MS (los resultados se reportan como proporciones de Área Pico de Fármaco/Área Pico de Estándar Interno). El ensayo de enlace de proteína también se puede llevar a cabo utilizando células de diálisis en lugar de las placas de diálisis de 96 pozos HT. Los datos se reportan en la Tabla 1 que se encuentra más adelante. En la Tabla 1, % Enlace de Proteína, + = >98 por ciento; ++ = 95-98 por ciento: +++ = <95 por ciento.

IV. Ensayo de Solubilidad de Alta Producción Se preparan dos muestras para cada compuesto. Una (la muestra estándar) contiene al compuesto en una concentración fija de 20 µM en un cóctel de solventes acuosos/orgánicos mixtos. La otra (la muestra de prueba) contiene al compuesto en una concentración máxima de 200 µM en regulador de fosfato 0.05 M a un pH de 7.4, y se agitan durante 24 horas. La muestra de prueba se filtra mediante un filtro de 0.45 mieras, y luego se centrifuga durante 10 minutos para remover cualquier sólido sin disolver. Se llevan a cabo análisis de HPLC sobre estas muestras. Las áreas pico se utilizan para calcular la solubilidad. Los datos se reportan en la siguiente Tabla 1. En la Tabla 1, solubilidad, + = <30 µM; ++ = 30-100 µM: +++ = >100 µM.

Tabla 1 ND: No Determinado. La Tabla 1 muestra que los compuestos reivindicados poseen propiedades superiores sobre los ejemplos comparativos probados. Por ejemplo, los compuestos de ejemplo 1 a 8 tienen una potencia enzimática y celular superior sobre los ejemplos comparativos 121, 136, y 143 en el ensayo enzimático de PLK1 y en el ensayo de proliferación celular de azul de metileno en múltiples líneas celulares examinadas. Los compuestos de ejemplo 1 a 8 tienen una solubilidad superior en regulador de fosfato 0.05 M a un pH de 7.4, sobre el ejemplo comparativo 127. Los compuestos de ejemplo 1 a 3 y 5 a 8 tienen un enlace de proteína superior en suero humano en el ensayo de diálisis en equilibrio sobre los ejemplos comparativos 126 y 127. V. Cell-Titer-Glo - Inhibición de la proliferación celular mediante los inhibidores de PLK1 Las líneas celulares que crecen exponencialmente de diferentes orígenes tumorales, cultivadas en medios apropiados conteniendo suero bovino fetal al 10 por ciento a 37°C en una incubadora con C02 al 5 por ciento, se aplicaron en una baja densidad (menos de 2,000 células/pozo) en placas de 96 pozos. Veinticuatro horas después de la aplicación, las células se trataron con diferentes concentraciones de los compuestos de prueba, en el intervalo de 10 µM a 0.04 nM. Varios pozos se dejaron sin tratamiento como control. Setenta y dos horas después del tratamiento, se determinaron los números de células utilizando de 50 a 100 microlitros por pozo de Cell-Titer-Glo (Promega #G7573). Las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 15 minutos, y la señal quimiluminiscente se leyó en el lector Victor V o Envison 2100.

El porcentaje de inhibición del crecimiento celular se expresó como el porcentaje de proliferación en relación con una proliferación del 100 por ciento (control). La concentración del compuesto de prueba que inhibió el 50 por ciento de crecimiento celular (IC50) se determinó mediante un ajuste de datos de 4 parámetros utilizando XLfit (el valor del control sin células se sustrajo de todas las muestras para el fondo). Los datos del Cell-Titer-Glo se muestran en la siguiente Tabla 2, y representan una compilación de varios experimentos diferentes, cada uno llevado a cabo utilizando los parámetros generales ilustrados anteriormente, aunque se pueden haber empleado variaciones menores en algunos casos. En la Tabla 2, + = IC50 >1 µM; ++ = IC500.5 -1 µM: +++ = IC50 <0.5 µM. Tabla 2

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto seleccionado a partir de: en donde * indica un átomo de carbono quiral; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 2. Un compuesto enantioméricamente enriquecido de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la estereoquímica del átomo de carbono quiral es R. 3. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoquímica absoluta ilustrada en A-1: y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 4. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoquímica absoluta ilustrada en B-1: y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 5. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoquímica absoluta ilustrada en C-1: y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 6. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoquímica absoluta ilustrada en D-1 : y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 7. U n compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoqu ímica absoluta ilustrada en E-1 : y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 8. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoqu ímica absoluta ilustrada en F- 1 : y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 9. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoquímica absoluta ilustrada en G-1: y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 10. Un compuesto enantioméricamente enriquecido, el cual tiene la estereoquímica absoluta ilustrada en H-1: y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos del mismo. 11. Una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10. 12. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 11 , la cual comprende además un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. 13. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 11, la cual comprende además un agente quimioterapéutico. 14. U na composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5. 1 5. Un método para el tratamiento de una condición mediada por PLK en un mam ífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 16. Un método para el tratamiento de un neoplasma susceptible en un mamífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 17. El método de acuerdo con la reivindicación 1 5, en donde el neoplasma susceptible se selecciona a partir del grupo que consiste en cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, cáncer endometrial, cáncer gástrico, melanoma, cáncer de ovario, cáncer pancreático, carci noma de células escamosas, carcinoma de cabeza y cuello, carcinoma esofágico, carcinoma hepatocelular, y malignidades hematológicas. 1 8. Un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero q ue lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 1 9. Un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 20. Un método para el tratamiento de cáncer de ovario en un mamífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5. 21 . Un método para el tratamiento de cáncer pulmonar no de células pequeñas en un mam ífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 22. Un método para el tratamiento de cáncer pulmonar no de células pequeñas en un mam ífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5. 23. U n método para el tratamiento de cáncer de próstata en un mam ífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 24. Un método para el tratamiento de cáncer de próstata en un mam ífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5. 25. Un método para el tratamiento de una malignidad hematológica en un mam ífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mam ífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 . 26. Un método para el tratamiento de una malignidad hematológica en un mamífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5. 27. Un método para el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada en un mamífero que lo necesite, comprendiendo este método administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1. 28. Un método para inhibir la proliferación de una célula, comprendiendo este método poner en contacto la célula con una cantidad de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 suficiente para inhibir la proliferación de la célula. 29. Un método para inhibir la mitosis en una célula, comprendiendo este método administrar a la célula una cantidad de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 suficiente para inhibir la mitosis en la célula. 30. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para utilizarse en terapia. 31. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para utilizarse en el tratamiento de una condición mediada por PLK en un mamífero que lo necesite. 32. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para utilizarse en el tratamiento de un neoplasma susceptible, tal como cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, cáncer endometrial, cáncer gástrico, melanoma, cáncer de ovario, cáncer pancreático, carcinoma de células escamosas, carcinoma de cabeza y cuello, carcinoma esofágico, carcinoma hepatocelular, y malignidades hematológicas, en un mamífero que lo necesite. 33. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para utilizarse en el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada en un mamífero que lo necesité. 34. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para utilizarse en la inhibición de la proliferación de una célula. 35. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para utilizarse en la inhibición de la mitosis en una célula. 36. El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición mediada por PLK en un mamífero que lo necesite. 37. El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un neoplasma susceptible, tal como cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, cáncer endometrial , cáncer gástrico, melanoma, cáncer de ovario, cáncer pancreático, carcinoma de células escamosas, carcinoma de cabeza y cuello, carcinoma esofágico, carcinoma hepatocelular, y malignidades hematológicas, en un mamífero que lo necesite. 38. El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición caracterizada por una proliferación celular inapropiada. 39. Una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 1 0, para utilizarse en el tratamiento de un neoplasma susceptible, tal como cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer pulmonar no de células pequeñas, cáncer de próstata, o malignidades hematológicas, en un mamífero que lo necesite.